心腦血管疾病與載脂蛋白E基因多態性及其血脂水平的相關性探究

王雪梅，魯慶波（.新疆喀什地區第一人民醫院CCU，新疆 喀什 844000；.新疆喀什地區第一人民醫院神經內一科，新疆 喀什 844000）

心腦血管疾病與載脂蛋白E基因多態性及其血脂水平的相關性探究

王雪梅1，魯慶波2
（1.新疆喀什地區第一人民醫院CCU，新疆 喀什 844000；2.新疆喀什地區第一人民醫院神經內一科，新疆 喀什 844000）

目的 探討中國喀什地區心腦血管疾病與載脂蛋白E基因多態性及其血脂水平的相關性。方法 應用聚合酶鏈式反應（PCR）技術和限制性片段長度多態性（RFLP）及血脂檢測技術，在195名正常對照人群和心腦血管疾病患者203例中觀察其載脂蛋白E基因多態性的分布并記錄血脂水平。結果 在受試人群中，ApoE基因多態性分布有所差異，ApoEε3在對照組中所占比例較多，而ApoEε2和ApoEε4則在實驗組中所占比例較多，差異有統計學意義（P＜0.05）。而在血脂水平上，甘油三酯在攜帶ApoEε2的患者中較高，總膽固醇在攜帶ApoEε4的患者中較高。結論 在中國喀什地區，載脂蛋白E2及E4等位基因在心腦血管疾病患者中的比例較高，在血脂上，ApoEε2與甘油三酯水平及ApoEε4與總膽固醇水平呈相關趨勢，ApoEε2和ApoEε4可能是導致心腦血管疾病發病的危險因素。

載脂蛋白E；基因多態性；心腦血管疾病；血脂

心腦血管疾病是由基因與環境因素交互作用形成的慢性疾病［1］。具有發病率高、死亡率高、復發率高、致殘率高且并發癥較多的特點，目前已對人們的生命健康產生了嚴重威脅，因此受到人們的高度重視。近年來，有研究表明，心腦血管疾病與載脂蛋白E結構密切相關，載脂蛋白E（Apoliporotein E，Apo E）有ε2、ε3、ε4三種常見等位基因和ε2/2，ε2/3，ε3/3，ε2/4，ε3/4，ε4/4六種基因型，是血漿中較為重要的載脂蛋白，本文就心腦血管疾病與載脂蛋白E基因多態性及其血脂指標進行了相關性探究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2012年9月～2014年9月診斷為心腦血管疾病的住院患者203例為試驗組，其中男108例，女95例，平均年齡（61.53±9.94）歲，正常人群195名為對照組，其中男98例，女97例，平均年齡（59.75±8.67）歲，兩組患者的年齡、性別、文化程度等比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 提取DNA

凌晨抽取患者靜脈血2 mL，采用分離白細胞，低滲溶血，常規酚一氯仿法提取DNA，EDTA抗凝。

1.2.2 ApoE基因多態性檢測

引物為：5'-ACAGAATTCGCCCCGGCCTGGT ACAC-3'

5'-TAAGCTTGGCACGGCTGTCCAAG GA-3'［2］

PCR反應參數為：取PCR產物5 μL，加HhaⅠ酶3 U，37℃酶切5 h，用2%瓊脂糖凝膠電泳分離酶切產物。結果可顯示PCR產物為244bp，被酶切為91bp和83bp的片段為ε2基因，被酶切為91bp和48bp的片段為ε3基因，被酶切為72bp和48bp的片段為ε4基因。

1.2.3 血脂檢測

所有血脂指標均用日立7170全自動生化儀分析測定。甘油三酯（TG），血清總膽固醇（TC）采用終點法測定，低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）則采用酶法測定。

1.3 數據處理

采用SPSS 18.0統計學軟件進行分析，各組基因型及等位基因比較采用x2檢驗，計量資料采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 ApoE基因多態性與心腦血管疾病的相關性

試驗組和對照組中ApoE基因型及等位基因的頻率分布與心腦血管疾病的關聯性分析結果見表1、表2。結果表明，試驗組相對于對照組ApoEε2和ApoEε4比例較高，ApoEε3比例較低，差異有統計學意義（P＜0.05）。心腦血管疾病與ApoE基因多態性之間存在關聯。

表1 對照組與試驗組ApoE基因型的分布 ［n（%）］

表2 對照組與試驗組ApoE等位基因頻率的分布 ［n（%）］

2.2 各血脂指標與ApoE基因多態性的相關性

試驗組各項血脂指標均高于對照組，在試驗組中ε4的TC水平及ε2的TG水平明顯較高。說明在心腦血管患者中ε2可能有升高TG的作用，而ε4可能有升高TC的作用，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3、表4。

表3 對照組不同ApoE等位基因之間血脂指標的比較（±s，mmol/L）

表3 對照組不同ApoE等位基因之間血脂指標的比較（±s，mmol/L）

等位基因　TC　TG　LDL-C　HDL-C ε2　4.34±0.67　0.99±0.13　2.48±0.31　1.51±0.23 ε3　4.66±0.63　1.27±0.46　3.15±0.54　1.31±0.26 ε4　4.51±0.56　1.58±0.57　2.82±0.56　1.44±0.18

表4 試驗組不同ApoE等位基因之間血脂指標的比較（±s，mmol/L）

表4 試驗組不同ApoE等位基因之間血脂指標的比較（±s，mmol/L）

等位基因　TC　TG　LDL-C　HDL-C ε2　5.23±0.68　2.04±0.67　3.09±0.64　1.14±0.15 ε3　5.16±0.74　1.48±0.74　3.48±0.73　1.29±0.23 ε4　5.58±0.96　1.69±0.65　3.32±0.82　1.38±0.31

3 討 論

心腦血管疾病是心血管疾病和腦血管疾病的統稱，其發病原因十分復雜，在我國，近年來發病率呈上升趨勢，被懷疑與飲食、運動及吸煙等不良習慣有關，隨著生活水平的提高，鹽、糖、脂肪的高攝入使人們患心腦血管疾病的危險性增加，體力勞動減少，體重增加，使之成為心腦血管疾病的患病因素。有研究表明，Apo基因多態性能夠影響血脂水平，與動脈粥樣硬化的發生、發展密切相關［3］。

Apo基因多態性已發現20余種［4］，ApoE主要通過肝臟合成，位于19號染色體長臂13區2帶［5］，是一種直接參與膽固醇代謝的蛋白［6］，現普遍認為，ApoE基因多態性可影響脂質代謝，并最終導致心腦血管疾病的發生，ApoE不同的基因型對血脂水平的影響也不同，所以本文應用聚合酶鏈式反應（PCR）技術和限制性片段長度多態性（RFLP）及血脂檢測技術，對195例正常對照人群和203例心腦血管疾病患者進行了血脂水平的觀察，并探究了心腦血管疾病與ApoE基因多態性及其血脂水平的關系。通過本次實驗可得知，在中國黑龍江地區，載脂蛋白E2及E4等位基因在心腦血管疾病患者中的比例較高，具有相關性。在血脂水平上，ε2可能有升高患者TG的作用，而ε4可能有升高患者TC的作用。ApoEε2與甘油三酯水平及ApoEε4與總膽固醇水平具有相關性。可認為ApoEε2和ApoEε4可能是導致心腦血管疾病發病的危險因素。

［1］ 馬冠生，孔靈芝.中國居民營養與健康狀況調查報告之九—2002行為和生活方式［M］.北京:人民衛生出版社，2006:223-224.

［2］ 趙曉濤，張 正，賈 玫，等.心腦血管疾病患者的載脂蛋白E基因多態性與血脂水平相關性［J］.中國民康醫學雜志，2006，18（2）:88-94.

［3］ Willer CJ， Sanna S，Jackson AU.et al. Newly identified loci that influence lipid concentrations and risk of coronary artery disease［J］.Nat Genet，2008，40（2）:161-169.

［4］ 薛 慧，陳乃耀，趙 輝.載脂蛋白基因多態性與心腦血管疾病關系的研究［J］.臨床薈萃，2010，25（5）:451-453.

［5］ 孫洪英.載脂蛋白E基因多態性與血脂、腦血管疾病關系的研究進展［J］.西部醫學，2007，19（2）:292-294.

［6］ 黃保崗.載脂蛋白E基因多態性與腦血管疾病關系的研究進展［J］.國際神經病學神經外科學雜志，2013，40（5-6）:460-462.

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ISSN.2095-6681.2015.05.074.02