不同pH值飲用水對SD大鼠生長發育及血清生化的影響

陳文文，余　強，王志遠，劉月環，吳舊生

（1. 浙江大學動物科學學院，杭州 310058； 2. 浙江省醫學科學院實驗動物中心，杭州 310013）

不同pH值飲用水對SD大鼠生長發育及血清生化的影響

陳文文1，2，余強2，王志遠2，劉月環2，吳舊生1

（1. 浙江大學動物科學學院，杭州 310058； 2. 浙江省醫學科學院實驗動物中心，杭州 310013）

目的觀測不同pH值飲用水對大鼠生長發育的影響。方法選取3周齡SPF級SD大鼠，隨機分為4組，分別給予不同pH值的飲用水，并于飼養后第4、6、8、10和12周，分別從每組取10只大鼠，雌雄各半，測定體質量，安死術后取心、肝、脾、肺、腎和腎上腺6個臟器稱重，計算臟器系數，同時采集血樣檢測血糖、血脂、肝功能、腎功能等生化指標。結果不同pH值飲用水組SD大鼠體質量，與同周齡pH7.0飲用水組相比無顯著性差異。不同pH值飲用水組SD大鼠臟器系數及生化指標亦在正常值范圍內波動。結論不同pH值飲用水對3～15周齡大鼠體質量、臟器系數和生化指標基本上無顯著影響。

飲用水； 臟器系數pH值； 臟器系數； 血糖； 血脂； 肝功能

SD大鼠是常用的實驗動物，具有適應性強、繁殖率高等優點，廣泛應用于生物醫藥、藥理學、遺傳疾病等研究［1］。動物的生長發育性能是其遺傳特性與所處環境共同作用的結果［2］。其中，飲用水對大鼠的生長發育起著至關重要的作用。國內外研究發現，采用高壓滅菌 （121 ℃，25～30 min）后，將水酸化至pH2.0～2.5的處理方法可有效抑制飲用水中細菌生長，以此解決實驗動物飲用水儲存期短的問題［3，4］。但長期飲用酸化水是否會導致實驗動物敏感生理生化指標發生變化等問題尚少有報道。因此，本文進行了SD大鼠長期飲用不同pH值滅菌酸化水的飼養試驗，旨在確定長期飲用酸化水對SD大鼠血液理化指標的影響。

1　材料與方法

1.1實驗動物

3周齡SPF級SD大鼠200只，雌雄各半，由浙江省實驗動物中心提供［SCXK（浙）2014-0001］。整個試驗過程在屏障系統進行，飼養條件嚴格按照GB14925-2010實驗動物環境及設施指標設置。

1.2主要儀器

BS-1500A電子天平，感量1 g，德國賽多利斯公司；AB204-E型電子天平，感量1 mg，瑞士梅特勒-托利多國際有限公司； 7020全自動生化儀，日本日立公司。

1.3方法

1.3.1分組與飼養3周齡大鼠隨機分為4組，雌雄各半，分別飲用滴加0.1 mol/L的鹽酸或氫氧化鈉溶液調節至所需的pH濃度，并用pH計檢測，制備得pH2.0、pH3.0、pH7.0和pH9.0滅菌過濾水。自由飲食。

1.3.2檢測指標于實驗后4、6、8、10和12周后（即7、9、11、13和15周齡），每組分別各取5只雄性和5只雌性大鼠，稱重，用速眠新麻醉靜脈采血后，頸椎脫臼處死。取心、肝、脾、肺、腎、腎上腺，除去上述器官周圍的脂肪結締組織，吸盡臟器表面血液，用電子天平稱量，計算臟器系數。血樣經3 000 r/min離心15 min，分離血清，采用全自動生化儀檢測血清生化指標。血液生化指標包括谷氨酸轉氨酶（ALT）、天冬氨酸轉氨酶（AST）、尿素（UREA）、肌酐（CREA）、空腹血糖（GLU）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLOB）、白蛋白與球蛋白比值（A/G）、總蛋白（TP）、總膽紅素（T-BIL）、直接膽紅素（DBIL）、間接膽紅素（IBIL）、總膽固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和免疫球蛋白G（IgG）。

1.4統計方法

2　結果

2.1不同pH值飲用水對SD大鼠體質量的影響

大鼠分別飲用pH2.0、pH3.0和pH9.0飲用水飼養4周、6周、8周、10周和12周，與同周齡pH7.0飲用水組SD大鼠的體質量比較無顯著性差異（P＞0.05）（表1）。

2.2不同pH值飲用水對SD大鼠臟器系數的影響

如表1所示，分別給予不同pH值飲用水飼養4周～12周后，與同周齡pH7.0飲用水組SD大鼠相比， 盡管心、肝、脾等個別臟器系數具有統計學差異， 但其仍處于大鼠臟器系數正常值波動范圍內。

2.3不同pH值飲用水對SD大鼠血清生化指標的影響

分別給予不同pH值飲用水飼養4周～12周后，與同周齡pH7.0飲用水組SD大鼠相比，盡管某些時間點GLU、CREA、UREA、LDL-C等個別生化指標具有統計學差異，但其仍處于大鼠生化指標正常值波動范圍內（表2）。

表1　不同pH值飲用水對SD大鼠體質量及臟器系數的影響

表2　各組SD大鼠生化指標比較

（續表2）

2.4不同pH值飲用水對SD大鼠血清生化指標的影響

分別給予不同pH值飲用水飼養4周～12周后，與同周齡pH7.0飲用水組SD大鼠相比，盡管某些時間點GLU、CREA、UREA、LDL-C等個別生化指標具有統計學差異，但其仍處于大鼠生化指標正常值波動范圍內（表2）。

3　討論

飲水是SPF級動物飼養中引起微生物污染的一個重要環節。一般飲水的pH值 調到3.0時，可有效抑制細菌的增殖。研究表明，小鼠飲用pH2.5左右的酸化水能解決綠膿桿菌感染問題。國內一些學者也提出飲用pH2.0～2.5的酸化水以防止SPF小鼠綠膿桿菌感染［5］。樵星芳等［6，7］研究發現，高壓滅菌水存放第2日即可長菌，而酸化滅菌水（pH2.5～3.0）存放7 d間，細菌檢測均為陰性，說明小鼠飲水經過一定的酸化處理后利于存放，且隨著酸度增加，飲水中可檢出的細菌數亦隨之減少，可檢出細菌的時間亦延后，提示小鼠飲水經過一定程度酸化處理后，對抑制細菌的增殖有一定效果。同時研究表明，Wistar大鼠和ICR、KM小鼠長期飲用滅菌酸化水對其血液細胞學以及脾、胸腺等免疫臟器指標并無明顯影響［7-10］。

本研究選取3周齡離乳大鼠，分別給予不同pH值（2.0～9.0）的飲用水，飼養4～12周，觀察其對SD大鼠生長發育及生理功能的影響。結果表明，不同pH值飲用水組同周齡SD大鼠體質量之間無顯著性差異。同時，各組大鼠心、肝、脾、肺、腎等主要臟器系數以及血糖、血脂、肝功能、腎功能等血液生化指標的變化亦在正常值范圍內。由此說明，pH2.0～9.0飲用水對SD大鼠的臟器系數和生化指標無顯著性影響。但不同pH值飲用水對動物的組織學、遺傳學、免疫學和繁殖性能的影響尚有待進一步研究。

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Q95-33

B

1674-5817（2015）01-0061-04

10.3969/j.issn.1674-5817.2015.01.013

2014-08-29

浙江省科技廳院所專項（2012F30026）

陳文文（1982-）， 男， 助理研究員， 研究方向: 實驗動物學， E-mail: cww0428@163.com

吳舊生（1969-）， 男， 副教授， 研究方向: 實驗動物醫學， E-mail: wujosh@zju.edu.cn