果糖二磷酸鈉注射液的質(zhì)量研究

王志遠(yuǎn)

（吉林省德惠市疾病預(yù)防控制中心，吉林 德惠 130300）

果糖二磷酸鈉注射液的質(zhì)量研究

王志遠(yuǎn)

（吉林省德惠市疾病預(yù)防控制中心，吉林 德惠 130300）

目的 為驗(yàn)證新生產(chǎn)的果糖二磷酸鈉注射液符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，達(dá)到銷(xiāo)售要求。方法 參照相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)果糖二磷酸鈉注射液的質(zhì)量進(jìn)行研究。結(jié)果 果糖二磷酸鈉注射液的各項(xiàng)指標(biāo)達(dá)到要求。結(jié)論 新生產(chǎn)的果糖二磷酸鈉注射液符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，允許上市銷(xiāo)售。

果糖二磷酸鈉；注射液；果糖；二磷酸鈉；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

本品為果糖1，6-二磷酸三鈉鹽的滅菌水溶液，是存在于體內(nèi)的代謝中間產(chǎn)物，它通過(guò)調(diào)節(jié)糖代謝中若干酶的活性產(chǎn)生藥理作用。臨床用于酒精中毒、營(yíng)養(yǎng)不良、慢性呼吸衰竭、腦供血不足、神經(jīng)內(nèi)科、呼吸內(nèi)科、兒科、精神科。現(xiàn)將其質(zhì)量研究報(bào)道如下。

1　樣品來(lái)源

果糖二磷酸鈉注射液由吉林省都邦制藥有限公司提供，規(guī)格為每100mL含果糖二磷酸鈉10 g；批號(hào)為20131210、20131211、20131212。果糖二磷酸鈉：上海新亞藥業(yè)有限公司。6-磷酸果糖購(gòu)于美國(guó)siga化學(xué)公司，果糖為分析純。市售樣品生產(chǎn)廠家為：廣東宏遠(yuǎn)集團(tuán)藥業(yè)有限公司，批號(hào)為131209。

2　含量限度

測(cè)定方法：見(jiàn)含量測(cè)定項(xiàng)下，三批樣品含量為99.0%、100.8%、99.0%，對(duì)照品為100.47%。 結(jié)論：從含量測(cè)定結(jié)果可知本單位產(chǎn)品的含量均在90%～110%。

3　性 狀

對(duì)本品三批樣品進(jìn)行檢查。測(cè)定方法：目測(cè)，檢測(cè)結(jié)果顯示三批樣品與對(duì)照品均為無(wú)色或幾乎無(wú)色的澄明液體。結(jié)論：試驗(yàn)結(jié)果表明，本單位產(chǎn)品均為無(wú)色澄明液體。

4　鑒 別

4.1取本品作為供試品溶液，另取果糖二磷酸鈉對(duì)照品適量，加水制成每1mL中含0.1 g的溶液，作為對(duì)照品溶液。按照中國(guó)藥典2010年版進(jìn)行薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一微晶纖維素薄層板上，按35∶20∶22.5∶15∶7.5的比例將正丁醇-冰醋酸-水-丙酮-稀氨溶液進(jìn)行混合做為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，晾干，噴以鹽酸間苯二酚乙醇溶液（取鹽酸間苯二酚0.36 g，加76%乙醇10mL，使溶解即得）。在105 ℃加熱30min，使顯色，本品所顯主斑點(diǎn)的顏色及位置應(yīng)與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)相同，繼續(xù)再噴以鉬酸銨混合溶液［丙酮-12.5%鉬酸銨溶液-鹽酸-高氯酸（86∶8∶3∶3）］，本品所顯斑點(diǎn)的顏色及位置應(yīng)與對(duì)照品溶液相同。三批樣品與對(duì)照品一致。

4.2取本品約0.5mL，加硝酸使成酸性，加熱，加鉬酸銨試液，即發(fā)生黃色沉淀，加過(guò)量氨試液，沉淀溶解。

4.3本品顯鈉鹽的鑒別反應(yīng)（中國(guó)藥典2010年版二部附錄Ⅲ）。結(jié)論：三批樣品與對(duì)照品鑒別試驗(yàn)均呈對(duì)應(yīng)的陽(yáng)性反應(yīng)。

5　檢 查

①酸度：本品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定pH值的范圍為3.0～4.5。取本品的三批樣品，依法檢查（中國(guó)藥典2010年版）。三批樣品pH值為4.14、4.06、4.03，對(duì)照品pH值為4.06。結(jié)論：三批樣品pH均在3.0～4.5。②顏色：取本品與黃色、橙黃色或黃綠色1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液（中國(guó)藥典2010年版）比較，不得更深。③游離磷酸鹽：精密量取約相當(dāng)于果糖二磷酸鈉20 mg的本品0.2mL，置100mL量瓶中，加水15mL，混合均勻，另取標(biāo)準(zhǔn)磷酸鹽溶液［精密稱(chēng)取經(jīng)105 ℃干燥2 h的磷酸二氫鉀0.1433 g，置1 L量瓶中，加硫酸溶液（3→10）10mL與水適量使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，臨用前用水稀釋10倍］25mL，置另一100mL量瓶中，各精密加鉬酸銨硫酸試液5.0mL與1-氨基-2-萘酚-4-磺酸溶液（取無(wú)水亞硫酸鈉5.0 g，亞硫酸氫鈉94.3 g與1-氨基-2-萘酚-4-硫酸0.7 g，充分混合，臨用前取此混合物1.5 g，加水10mL使溶解，必要時(shí)濾過(guò)）2mL，加水至刻度，搖勻，在20 ℃左右放置30～50min，按照中國(guó)藥典2010年版分光光度法，在740 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，本品的吸收度不得大于對(duì)照溶液的吸收度（1.25%）。④裝量：按照中國(guó)藥典2010年版的要求，取本品，進(jìn)行檢查，均符合規(guī)定。⑤熱原：按照中國(guó)藥典2010年版的要求，取本品，劑量按家兔體質(zhì)量每1 kg注射2mL，進(jìn)行檢查，均符合要求。⑥無(wú)菌：按照中國(guó)藥典2010年版的要求進(jìn)行檢查，取本品，用薄膜過(guò)濾法處理后，均符合要求。⑦異常毒性：照果糖二磷酸鈉項(xiàng)下的方法檢查，均符合要求。⑧過(guò)敏試驗(yàn)：照果糖二磷酸鈉項(xiàng)下的方法檢查，均符合要求。⑨降壓物質(zhì)：取本品，加滅菌注射用水制成每2mL中含100 mg（以無(wú)水物計(jì)）的溶液， 按照中國(guó)藥典2010年版要求進(jìn)行檢查，劑量按體質(zhì)量每1000 g注射0.5mL，均符合規(guī)定。

6　有關(guān)物質(zhì)

取本品作為供試品溶液，精密量取6-磷酸果糖適量，加水制成每2mL中含有1 mg的溶液，作為第一對(duì)照品。另精密量取果糖適量，加水制成每2mL中含有1 mg的溶液，作為第二對(duì)照品。按照中國(guó)藥典2010年版薄層色譜法試驗(yàn)，將上述三種溶液各吸取5μL，分別點(diǎn)于同一微晶纖維素薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水-丙酮-稀氨溶液（35∶20∶22.5∶15∶7.5）為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，晾干，噴以鹽酸間苯二酚乙醇溶液（取間苯二酚0.5 g，加80%乙醇100mL使溶解，加鹽酸5mL，搖勻，即得）。在105 ℃加熱5min，使顯色，如果本品顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，不得多于2個(gè)，并與相應(yīng)的對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)比較，不得更深。方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)：我們對(duì)果糖二磷酸鈉進(jìn)行加熱、酸、堿和強(qiáng)光照射（4500lux）試驗(yàn)，本品破壞性樣品的濃度為0.3 g/mL，為樣品點(diǎn)樣濃度的3倍。破壞方法如下：①酸破壞：取果糖二磷酸鈉對(duì)照品適量，加0.1mol/L鹽酸5mL，使成0.3 g/mL的果糖二磷酸鈉，置水浴中加熱破壞20min，過(guò)濾。②堿破壞：取果糖二磷酸鈉對(duì)照品適量，加0.1mol/L氫氧化鈉5mL，使成0.3 g/mL的果糖二磷酸鈉，置水浴中加熱破壞10min，過(guò)濾。③熱破壞：取果糖二磷酸鈉對(duì)照品適量，置10mL具塞刻度試管中，使成0.3 g/mL的果糖二磷酸鈉，置水浴中加熱破壞10min，過(guò)濾。④強(qiáng)光破壞：取果糖二磷酸鈉對(duì)照品適量，置10mL具塞刻度試管中，使成0.3 g/mL的果糖二磷酸鈉，置強(qiáng)光（4500Lux ±500Lux）破壞6 h，過(guò)濾。破壞樣品過(guò)濾后直接進(jìn)行點(diǎn)樣。破壞性樣品的圖譜見(jiàn)附頁(yè)3。⑤最低檢測(cè)限與定量限的測(cè)定：取果糖二磷酸鈉注射液［20131210］適量，加水分別制成每1mL含0.5、0.4、0.3 mg的溶液，按照有關(guān)物質(zhì)測(cè)定項(xiàng)下的方法試驗(yàn)，測(cè)定的最低檢測(cè)限約0.3 mg/mL，定量限約為0.5 mg/mL。測(cè)定的結(jié)果見(jiàn)附圖4。

7　含量測(cè)定

對(duì)照品溶液的制備：精密稱(chēng)取約相當(dāng)于無(wú)水果糖二磷酸鈉20 mg的果糖二磷酸鈉對(duì)照品適量，置100mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。供試品溶液的制備：精密量取本品適量，加水稀釋制成含C6H11Na3O12P2約0.2 mg/mL的溶液，搖勻，即得。測(cè)定法：精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各1mL，分別置于10mL量瓶中，各加8mol/L鹽酸溶液5mL與2.5%二苯胺乙醇液2mL搖勻，置于（95 ±2）℃水浴中加熱30min，并時(shí)刻振搖，取出，冷卻，以70%乙醇稀釋至刻度，按照中國(guó)藥典2010年版分光光度法，在638 nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸收度，計(jì)算。

含量測(cè)定方法學(xué)研究：①溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)：取果糖二磷酸鈉注射液［20131210］適量，加水制成含0.2 mg/mL果糖二磷酸鈉的溶液，于不同時(shí)間測(cè)定，結(jié)果表明：果糖二磷酸鈉注射液在8 h內(nèi)是穩(wěn)定的。②線性關(guān)系試驗(yàn)：取果糖二磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品，用水制成每1mL含160、180、200、220、240 μg的溶液，以濃度為橫坐標(biāo)，吸收度為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸，A值分別為0.462、0.519、0.575、0.632、0.689。得回歸方程：A=0.0283x+0.0094，R2=0.9995。結(jié)果表明果糖二磷酸鈉濃度在16～24 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。見(jiàn)圖1。③精密度試驗(yàn)：精密稱(chēng)取果糖二磷酸鈉對(duì)照品，精密稱(chēng)定6份，分別加水制成200μg/mL的溶液，搖勻，分別測(cè)定，吸收度分別是0.563、0.572、0.574、0.542、0.571、0.568。RSD=1.31% 結(jié)果表明：本法精密度較好。另精密稱(chēng)取果糖二磷酸鈉對(duì)照品加水制成200 μg/mL的溶液，搖勻，測(cè)定6次，吸收度分別是0.568、0.570、0.569、0.567、0.564、0.568。RSD=0.35%，結(jié)果表明：本法精密度較好。含量測(cè)定法：①對(duì)照品溶液的制備。精密稱(chēng)取約相當(dāng)于無(wú)水果糖二磷酸鈉20 mg的果糖二磷酸鈉對(duì)照品適量，置100mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。②供試品溶液的制備：精密量取本品適量，加水稀釋制成含C6H11Na3O12P2約0.2 mg/mL的溶液，搖勻，即得。③測(cè)定法：按上述含量測(cè)定研究方法進(jìn)行測(cè)定，對(duì)照中國(guó)藥典2010年版分光光度法分別測(cè)定吸收度，計(jì)算，即得。三批樣品果糖二磷酸鈉含量測(cè)定結(jié)果均為99.0%、100.8%、99.0%，對(duì)照品為100.4%。含量測(cè)定結(jié)果表明：符合規(guī)定。

經(jīng)質(zhì)量研究，對(duì)果糖二磷酸鈉注射液三批（20131210、20131211、20131212）樣品與市售樣品質(zhì)量指標(biāo)（性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定）進(jìn)行檢驗(yàn)，經(jīng)檢驗(yàn)測(cè)試對(duì)比，皆達(dá)到了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，質(zhì)量穩(wěn)定。

圖1　

R-3

B

1671-8194（2015）10-0075-02