苦參水提物對濕疹豚鼠皮膚炎癥腫脹度的影響研究

張麗華　陳 燕*

（1 佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院組胚教研室，廣東 佛山 528000；2 廣東省第二人民醫(yī)院藥學(xué)部，廣東 廣州 510317）

苦參水提物對濕疹豚鼠皮膚炎癥腫脹度的影響研究

張麗華1陳 燕2*

（1 佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院組胚教研室，廣東 佛山 528000；2 廣東省第二人民醫(yī)院藥學(xué)部，廣東 廣州 510317）

目的 通過觀察苦參水提物對濕疹豚鼠皮膚炎癥腫脹度的抑制作用，探討其抗炎作用，為臨床治療提供依據(jù)。方法 豚鼠40只，用2，4-二硝基氯苯在豚鼠頸背部涂抹致敏，在右耳內(nèi)側(cè)激發(fā)造模。隨機分成5組，每組8只，分別作為模型對照組、陽性對照組、苦參提取液高、中、低濃度組，對濕疹部位皮膚連續(xù)涂抹給藥14 d，取雙耳等面積的同部位，比較重量，以左、右耳重量之差來評價皮膚炎癥腫脹度。結(jié)果 與模型對照組相比，苦參水提物高、中濃度組豚鼠皮膚腫脹度明顯減輕，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05） ，與陽性對照組比較，苦參水提物高濃度組的豚鼠皮膚腫脹度明顯減輕，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05） 。結(jié)論 苦參水提物減少了濕疹豚鼠皮膚的炎性反應(yīng)，對濕疹的治療有一定意義。

苦參；濕疹；腫脹度；水提物；抗炎作用

濕疹是一種由各種內(nèi)外因素引起的過敏性炎癥性皮膚病，臨床上以皮膚丘疹水皰、滲出、糜爛為主，呈多形性改變，易反復(fù)發(fā)病。其組織學(xué)特征為表皮細胞間水腫，伴有不同程度的棘層肥厚及淺表血管周圍淋巴組織細胞浸潤［1］。癥見自覺性皮膚瘙癢，易引起睡眠紊亂，嚴重影響生活質(zhì)量。目前濕疹治療主要以糖皮質(zhì)激素藥物為主，需長期用藥，不良反應(yīng)較大［2］。近年來，中醫(yī)藥治療對濕疹具有相當(dāng)重要的作用，其療效顯著，不良反應(yīng)少，受到皮膚科醫(yī)師的重視［3］。

苦參（Sophora flavescens）是豆科植物苦參的根，含苦參堿、氧化苦參堿、槐花醇、金雀花堿等多種生物堿，具有抑菌、抗炎、抗過敏、調(diào)節(jié)免疫等多種藥理作用［4-5］，主要用于治療濕疹、瘙癢癥等風(fēng)熱、濕熱之皮膚病等病癥，在治療各種以變態(tài)反應(yīng)為特征的皮膚炎癥性疾病中取得較為明顯的療效［6-7］。因其具有清熱燥濕、止癢安神的功效而為歷來中醫(yī)治療皮膚病所推崇。本實驗主要探討苦參水提物對濕疹豚鼠皮膚炎癥的影響，并觀察皮膚腫脹度改變情況。

表1　苦參水提物對2，4-二硝基氯苯所致豚鼠皮膚腫脹的影響（，n=8）

表1　苦參水提物對2，4-二硝基氯苯所致豚鼠皮膚腫脹的影響（，n=8）

注：各組與模型對照組比較，*P＜0.05；與陽性對照組比較，△P＜0.05

組別　藥物　腫脹度（mg）　抑制率（%）模型對照組（A）　生理鹽水　45.82±9.47　-陽性對照組（B）　復(fù)方醋酸地塞米松乳膏　28.46±3.28*　37.89高濃度組（C）　苦參水提物高濃度組（5 g/mL）　19.92±4.20*△　56.52中濃度組（D）　苦參水提物高濃度組（2.5 g/mL）　27.33±5.17*　40.35低濃度組（E）　苦參水提物高濃度組（1.25 g/mL）　35.15±7.33　23.29

1　材料與方法

1.1實驗動物：純白短毛豚鼠，雄性，體質(zhì)量（250±20）g，由廣東省實驗動物中心提供，實驗動物合格證號：SCXK（粵）2013-0002。

1.2儀器：電子天平，BS-600L，上海友聲衡器有限公司生產(chǎn)； 金屬打孔器（6 mm），廣州正宏醫(yī)療器械設(shè)備有限公司。

1.3藥品及試劑：苦參（廣東杏林藥業(yè)有限公司，20131203）；復(fù)方醋酸地塞米松乳膏（廣東東康藥業(yè)有限公司，批號：130909）；2，4-二硝基氯苯（2，4-dinitrochlorobenzene，DNCB）（上海試劑一廠，批號890901）；丙酮（AR，天津市大茂化學(xué)試劑廠）。

1.4方法

1.4.1藥物的制備。苦參水提物的制備：苦參飲片1 kg，加 5 倍水，浸泡 2 h，煎煮 1 h，過濾，藥渣再加 3 倍水煎煮30 min，過濾，合并濾液濃縮至含生藥5 g/mL。取適量含生藥5 g/mL的苦參水提物，用純水適當(dāng)稀釋，分別得到含生藥2.5、1.25g/mL的苦參水提物。最后經(jīng)熱壓滅菌后冷藏保存留用。

致敏劑及激發(fā)溶液的制備：精密稱取DNCB 2.5 g，用丙酮溶解，并定容到50 mL容量瓶中，制成5%的DNCB致敏溶液。取0.5%的DNCB致敏溶液1 mL，用丙酮稀釋并定容到50 mL容量瓶中，制得0.1% DNCB激發(fā)溶液。

1.4.2豚鼠濕疹模型的建立：建立40只豚鼠慢性濕疹模型。每只豚鼠頸背部剪毛2 cm×2 cm大小，5%DNCB溶液25 μL外涂致敏。2周后.每只豚鼠右耳內(nèi)側(cè)涂0.1%DNCB溶液100 μL作為激發(fā)。每周1次，連續(xù)4次。

1.4.3實驗分組、給藥與取材：將濕疹模型豚鼠隨機分為A、B、C、D、E五組，每組8只。于第4次激發(fā)72 h后，對上述各組進行濕疹部位皮膚涂抹給藥治療，每日2次。A組為模型對照組，給予生理鹽水；B組為陽性對照組，按說明書給予復(fù)方醋酸地塞米松乳膏；C、D、E組分別為苦參水提物高、中、低濃度組，含苦參生藥濃度分別為5、2.5、1.25 g/mL，分別按2、1、0.5 g/kg給藥。各組均連續(xù)給藥14 d，隨后停藥1 d，用直徑6 mm的打孔器切下雙耳等面積的同部位，精密天平稱重。

1.4.4觀察指標：以左、右耳片重量之差作為皮膚炎癥腫脹程度評價指標，按下式計算各組腫脹度，并求出腫脹抑制率（%）。腫脹度=炎癥皮膚重量（右耳）-健康皮膚重量（左耳）；抑制率（%） =（模型對照組腫脹度-藥物組腫脹度）/ 模型對照組腫脹度 ×100%。

1.4.5統(tǒng)計學(xué)處理：用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差（）表示，多組之間的比較采用方差分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié) 果

2.1豚鼠慢性濕疹模型：0.1% DNCB溶液第一次激發(fā)48 h后，右耳廓開始出現(xiàn)腫脹，與未激發(fā)的左耳相比，有明顯區(qū)別，第二次、第三次激發(fā)后，腫脹增厚進一步加劇，并出現(xiàn)少許脫屑；第4次激發(fā)后右耳腫脹、增厚明顯，表面出現(xiàn)結(jié)痂，與人慢性濕疹的臨床表現(xiàn)相近似，表明造模成功。

2.2腫脹度及腫脹抑制率：與模型對照組相比，苦參水提物高、中濃度組豚鼠皮膚腫脹度明顯減輕，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），與陽性對照組比較，苦參水提物高濃度組的豚鼠皮膚腫脹度明顯減輕，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)果見表1。

3　討 論

治療濕疹目前常用的藥物有皮質(zhì)類固醇激素、組胺拮抗類、鈣劑、維生素等，它們控制濕疹癥狀效果良好，但停藥后易復(fù)發(fā)，且不良反應(yīng)較多。苦參及其總生物堿治療急性、亞急性濕疹用藥安全，無抗組胺藥物的嗜睡及皮質(zhì)激素的不良反應(yīng)，具有廣闊的開發(fā)前景［4］。苦參性味苦、寒，歸心、肝、胃、大腸、膀胱經(jīng)，具有清熱燥濕、祛風(fēng)殺蟲止癢之功效，歷來為中醫(yī)治療皮膚病所推崇。其有效成分苦參堿和氧化苦參堿具有抗炎作用，可降低過敏介質(zhì)的釋放，具有免疫抑制作用［8-9］，還能殺滅和抑制體表多種細菌和真菌生長［10］。

現(xiàn)階段研究關(guān)于濕疹的報道卻多見于療效報道，本實驗利用經(jīng)典的豚鼠濕疹模型對苦參水提物抗?jié)裾钏幚碜饔眠M行了評價。與模型對照組相比，苦參水提物高、中濃度組豚鼠皮膚腫脹度明顯減輕（P＜0.05），與陽性對照組比較，苦參水提物高濃度組的豚鼠皮膚腫脹度亦明顯減輕（P＜0.05），其效果優(yōu)于復(fù)方醋酸地塞米松乳膏。因此，苦參水提物對豚鼠濕疹模型有明顯的改善作用，值得進一步深入研究，為以后開發(fā)采用中藥苦參治療濕疹的外用制劑提供依據(jù)。

［1］謝富軍，何棟，蔡飛，等.濕疹的研究現(xiàn)狀［J］.按摩與康復(fù)醫(yī)學(xué)，2011，2（11）:23-24.

［2］王玉文，蒙秉新.糖皮質(zhì)激素降階梯療法治療慢性濕疹臨床療效觀察［J］.臨床皮膚科雜志，2011，40（5）:303-305.

［3］陳平，楊志波，楊光艷，等.外用中藥治療慢性濕疹研究進展［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2012，30（3）:524-527.

［4］徐國紅.苦參治療濕疹的藥理作用研究［J］.長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2010，26（10）:781.

［5］陳靜，梁生旺.苦參的成分及質(zhì)量分析研究進展［J］.廣東藥學(xué)院學(xué)報，2012，28（5）:569-572.

［6］吳偉明，孫忠敏，陳麗佳，等.苦參不同提取液對慢性濕疹治療效果的研究［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2012，30（3）:650-652.

［7］張冰凌.苦參等中藥在皮炎濕疹類皮膚病治療中的應(yīng)用［J］.中醫(yī)臨床研究，2013，5（10）:87-88.

［8］劉梅，劉雪英，程劍鋒.苦參堿的藥理研究進展［J］.中國中藥雜志，2003，28（9）:801-803.

［9］黃秀梅，李波.氧化苦參堿對TNF-α、IL-6 和 IL-8 的影響［J］.中成藥，2003，25（11）:903-906.

［10］劉婧.苦參湯聯(lián)合馬應(yīng)龍麝香痔瘡膏治療肛周濕疹60例［J］.實用中醫(yī)藥雜志，2013，29（10）:820.

The Effect of Sophora Flavescens Extract on the Skin Swelling of Guinea Pigs with Chronic Eczema

ZHANG Lihua1，CHEN Yan2
（1 Department of Histology and Embryology，F(xiàn)oshan University，F(xiàn)oshan 528000，China；2 Department of Pharmacy，Guangdong Provincial No.2 People's Hospital，Guangzhou 510317，China）

Objective To investigate the inhibition of the swelling of Sophora flavescens extract on the eczema skin，exploring the effect of the antiinflammatory，and to provide the basis for clinical treatment. Method Chronic eczema model of 40 guinea pigs was set up by 2，4-dinitrochlorobenzene sensitizing and exciting，which was randomly divided into model group，positive group and high，medium，low concentration group of sophora flavescens，with 8 enriettii for each group. Eczema skin was continuously administered drugs for 14 days. Lastly，the same part with equal area of each ear was taken and weighed.The difference between the left and right ears was used to evaluate swelling. Result Compared with model group，the high and medium concentration group of sophora flavescens could reduce the swelling on the eczema（P＜0.05）. The swelling of high dose group was less than the positive group （P＜0.05） . Conclusion Sophora flavescens extract decrease the inflammation on the eczema skin，and has some meaning for the treatment of eczema.

Sophora flavescens Extract； Chronic eczema； Swelling； Anti-inflammatory effect

R282.710.3

B

1671-8194（2015）18-0038-02

佛山市醫(yī)學(xué)類科技攻關(guān)項目“氧化苦參堿脂質(zhì)體外用凝膠制備及其抗?jié)裾钏幮а芯俊保?01308122）；廣東省醫(yī)學(xué)科研基金立項項目（A2014706）；廣東省中醫(yī)藥局建設(shè)中醫(yī)藥強省立項資助項目（20141007）；廣東省醫(yī)院藥學(xué)研究基金（奧賽康基金）立項項目（2015A02）

E-mail：yanchen666 @126.com