硒VE營養素補充劑的開發

北京同仁堂科技發展股份有限公司（100079）徐京

硒VE營養素補充劑是以富硒原料、維生素E為主要原料，配以填充劑等輔料開發制成的保健食品（營養素補充劑），根據人體對硒和維生素E的生理需要量，采用合理的配方及工藝加工而成，預期達到適量且有效補充人體所需硒和維生素E的效果。

1 硒的作用及其補充方法

硒是一種微量元素,參與體內多種內分泌代謝活動，具有保護細胞膜的結構和功能免遭損害，保護細胞重要活性物質不受強氧化劑的破壞的作用；能參與免疫反應,提高人體B細胞的增殖和活性，也可改善T細胞功能，并通過避免氧化損傷而保護免疫系統；在生物體內可和許多重金屬反應，對幫助人畜抵抗環境中的重金屬污染起到一定的作用；還在視覺和感覺中參與眼中光感受器使光子轉換成電信號能量的轉換過程等[1][2]。

此外，大量的研究表明，硒具有廣泛的生物學作用，特別是對癌癥(如肺癌、腸癌、前列腺癌和肝癌等)；同時，硒具有強大的保護作用，對心臟病、老年性疾病、肝和胰臟疾病等四十多種人類疾病有良好的預防治療作用。相應的，如果人體內缺少一定量的硒元素，將同樣導致上述疾病的發生。

人體中所需要的硒不能靠自身合成，需要從外界獲得，食物是主要來源。但由于自然界中的硒分布不均，天然食物中的硒含量不能滿足我國缺硒及低硒地區人群補硒的需求。我國居民硒膳食攝入量情況調查表明：富硒地區人均膳食硒攝入量為每人每天50～100μg；貧硒地區為10～50μg；而低硒地區僅10μg[3]，而日、英、美等國的國民的硒攝入量都在77～191μg/d。因此，我國居民需要通過服用高硒的藥品或強化食品、保健食品、日用品等來補充人體所需要的硒元素。通過食用以富硒食品原料為主加工的保健食品則以其硒含量高，食用方便安全等優點更易為消費者所接受。此類保健食品包括營養素補充劑和有一定保健功能的保健食品兩大類，其中具有保健功能的產品大多是申請的增強免疫力的功能，所用硒原料共有三種，用的比較多的是亞硒酸鈉（無機硒）和硒化卡拉膠（有機硒），而新申報下來的此類保健食品中越來越多地用到了富硒酵母（有機硒）。

2 硒VE營養素補充劑安全穩定

維生素E是人體內具有廣泛生理功能的重要脂溶性維生素， 具有較強的抗氧化性，人體不能自行合成，必須從外界攝取。維生素E除了促進生殖， 維持中樞神經系統、心血管系統和骨骼肌的功能之外， 還具有免疫調節劑的作用。維生素E 通過增強體液免疫、提高細胞介導的免疫應答、影響吞噬細胞功能等作用而影響機體免疫狀態[4][9]。維生素E與硒有協同作用，能維持體內硒的活性形式，并且通過自身的抗氧化功能降低機體對硒的需要量[5]，硒和維生素E聯用可明顯升高HDL水平，抗脂質過氧化作用效果優于硒、維生素E單用，為臨床二者聯合應用提供了實驗依據，在安全劑量范圍內使用無毒副作用[6]。硒VE營養素補充劑選用的維生素E原料對熱和空氣非常穩定，且其標準符合美國藥典和歐洲藥典的要求。

補充硒所用的原料之一是富硒酵母，其中硒的存在形式與普通啤酒酵母中硒的天然存在形式相似， 其有機硒含量占總硒量的95%以上。動物試驗表明， 富硒酵母沒有致畸和致突變方面的作用， 其毒性大大低于亞硒酸鈉。在生理活性方面，富硒酵母較無機硒高， 如對腫瘤的抑制效果較亞硒酸鈉顯著[7]。研究表明， 有機硒在生物體內停留時間較長， 在人體硒營養狀況良好的情況下， 有機硒可貯存起來，當人體硒營養攝入不足時， 貯存的有機硒能夠補充到生理代謝中， 從而滿足硒的需求。無機硒(如亞硒酸鹽和硒酸鹽)， 進入人體后很快通過排泄途徑排出體外， 在體內停留時間較短， 因此活性低于有機硒， 且毒性又大于有機硒，通常不適合于直接添加到食品中。因此通過生物富硒將無機硒轉化為有機硒， 是生產富硒食品及添加劑的一種安全有效的方法[8]。

3 生產工藝

原輔料過篩、稱量→逐級混合→膠囊填充→拋光→裝瓶→貼簽→成品檢驗→入庫。

4 穩定性實驗

硒VE營養素補充劑可開發成多種劑型，如硬膠囊、軟膠囊、口服液、片劑等，本文中僅以硬膠囊的劑型舉例說明工藝及穩定性實驗過程。

4.1 穩定性實驗

4.1.1 穩定性實驗條件 37℃～40℃，相對濕度75%，0、1、2、3月，每月1次，共測4次。

4.1.2 中試樣品批次 1、2、3共計三批。

4.1.3 結果與分析 通過對硒VE營養素補充劑三個批次的中試樣品進行三個月穩定性、衛生學和標志性成分的實驗，結果顯示各項指標均在質量標準范圍內，且硒和維生素E的測定結果穩定性較為理想，說明該產品的配方及工藝可行，可以作為工業化生產的參考依據。

本產品中功效成分的檢測結果均在《營養素補充劑申報與審評規定（試行）》中規定用量的范圍內，因此具有相應的營養素補充的作用。

4.2 標志性成分的檢測

4.2.1 硒的測定[10]

4.2.1.1 材料與試劑 硝酸、高氯酸、鹽酸、氫氧化鈉均為優質純；三級水。

4.2.1.2 儀器與設備 原子熒光光譜儀，帶硒空心陰極燈；電熱板；微波消解系統；感量為 1 mg的天平；粉碎機；烘箱。

4.2.1.3 試驗方法 ①試樣處理 粉碎，混勻，備用。微波消解：稱取0.5g～2g（精確至0.001g） 試樣于消化管中，加10mL 硝酸、2mL 過氧化氫，振搖混合均勻，于微波消化儀中消化，冷卻后轉入三角瓶中，加幾粒玻璃珠，在電熱板上繼續加熱至近干，切不可蒸干。再加5.0mL 鹽酸（6mol/L），繼續加熱至溶液變為清亮無色并伴有白煙出現，將六價硒還原成四價硒。冷卻，轉移試樣， 消化液于25mL 容量瓶中定容，混勻備用。同時做空白試驗。吸取10.mL 試樣消化液于15mL 離心管中，加鹽酸（4.3）2.0mL，鐵氰化鉀溶液（4.7）1.0 mL，混勻待測。

②標準曲線的配制 分別取0.00mL，0.10mL，0.20mL，0.30mL，0.40mL，0.50 mL標準應用液于15mL 離心管中用去離子水定容至10mL，再分別加鹽酸（4.3）2mL，鐵氰化鉀溶液（4.7）1.0mL，混勻，制成標準工作曲線。

③測定 儀器參考條件：負高壓 340 V；燈電流100mA；原子化溫度800℃；爐高8mm；載氣流速500mL/min；屏蔽氣流速1000mL/min；測量方式 標準曲線法；讀數方式 峰面積；延遲時間1s；讀數時間15s；加液時間8s；進樣體積2mL。測定：設定好儀器最佳條件，逐步將爐溫升至所需溫度后，穩定10min～20min后開始測量。連續用標準系列的零管進樣，待讀數穩定之后，轉入標準系列測量，繪制標準曲線。轉入試樣測量，分別測定試樣空白和試樣消化液，每測不同的試樣前都應清洗進樣器。分析結果的表述：硒的含量

式中：X為試樣中硒的含量，單位為毫克每千克或毫克每升（mg/kg或mg/L）；C為試樣消化液測定濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；C0為試樣空白消化液測定濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；m 為試樣質量（體積），單位為克或毫升（g 或mL）；V為試樣消化液總體積，單位為毫升（mL）。

以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，結果保留三位有效數字。在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10 %。

附表 已被批準為營養素補充劑的補硒產品舉例

4.2.2 維生素E的測定[11]

4.2.2.1 材料與試劑 維生素E 標準品；α-淀粉酶：酶活力≥1.5 U/mg；無水硫酸鈉：分析純；異丙醇、乙醇、甲醇、正己烷、環己烷均為色譜純。石油醚：沸程30 ℃～60 ℃。

4.2.2.2 儀器與設備 高效液相色譜儀，帶紫外檢測器；旋轉蒸發器；恒溫磁力攪拌器：20 ℃～80 ℃；氮吹儀；離心機：轉速≥5000轉/分鐘；培養箱：60℃±2 ℃；天平：感量為0.1mg。

4.2.2.3 試驗方法 ①試樣處理：稱取混合均勻的固體試樣約5g或液體試樣約50g（精確到0.1mg）于250mL三角瓶中，加入lgα-淀粉酶，固體試樣需用約50mL45℃～50 ℃的水使其溶解，混合均勻后充氮，蓋上瓶塞，置于60℃±2℃培養箱內培養30 min。

②待測液的制備 皂化：于上述處理的試樣溶液中加入約100mL 維生素C 的乙醇溶液，充分混勻后加25mL 氫氧化鉀水溶液混勻，放入磁力攪拌棒，充氮排出空氣，蓋上膠塞。1000mL 的燒杯中加入約300mL 的水，將燒杯放在恒溫磁力攪拌器上，當水溫控制在53℃±2℃時，將三角瓶放入燒杯中，磁力攪拌皂化約45min 后，取出立刻冷卻到室溫。 提取：用少量的水將皂化液全部轉入500mL 分液漏斗中，加入100mL 石油醚，輕輕搖動，排氣后蓋好瓶塞，室溫下振蕩約10min 后靜置分層，將水相轉入另一500mL 分液漏斗中，按上述方法進行第二次萃取。合并醚液，用水洗至近中性。醚液通過無水硫酸鈉過濾脫水，濾液收入500mL圓底燒瓶中，于旋轉蒸發器上在40℃±2℃充氮條件下蒸至近干（絕不允許蒸干）。殘渣用石油醚轉移至10mL 容量瓶中，定容。從上述容量瓶中準確移取2.0mL石油醚溶液放入試管中， 將試管置于40℃±2℃的氮吹儀中，將試管中的石油醚吹干。向試管中加5.0mL甲醇，振蕩溶解殘渣。再將試管以不低于5000轉/分鐘的速度離心10 min，取出靜置至室溫后待測。

③測定 色譜參考條件：色譜柱：C18柱，250mm×4.6mm，5μm，或具同等性能的色譜柱。流動相：甲醇。流速：1.0 mL/min。檢測波長：維生素A：325nm；維生素E：294nm。柱溫：35℃±1℃。進樣量：20μL。標準曲線的繪制：分別準確吸取維生素E標準儲備液1.00mL、2.00 mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL于50mL棕色容量瓶中，用乙醇定容至刻度混勻。此標準系列工作液濃度分別為10.0μg/mL、20.0μg/mL、30.0μg/mL、40.0μg/mL、50.0μg/mL。將維生素E 標準工作液注入液相色譜儀中，得到峰高(或峰面積)。以峰高(或峰面積)為縱坐標，以維生素E 標準工作液濃度為橫坐標分別繪制維生素E 標準曲線。維生素E 試樣的測定：將②中待測液注入液相色譜儀中，得到峰高(或峰面積)，根據標準曲線得到待測溶液中維生素E的濃度。

④ 分析結果的表述 維生素E 含量按正式計算：

式中：X為試樣中維生素E（α-生育酚）的含量，單位為毫克每百克（mg/100g）；Cs為從標準曲線得到的維生素E 待測液的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；m為試樣的質量，單位為克（g）。

以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，結果保留三位有效數字。在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值，維生素E不得超過算術平均值的5%。

5 展望

硒是人體不可缺少的必需微量元素，在抗氧化、提高免疫力、降低重金屬的毒性等方面具有十分重要的生理功能，對多種疾病具有預防及治療等作用，人體補充到足量的硒十分必要。我國硒的平均攝入量遠沒有達到每天每人40μg（生理需要量）以上的補硒要求，更遠遠落后于日、英、美等國的國民的硒攝入量。硒VE營養素補充劑通過補充適量的硒和維生素E，可滿足大范圍缺硒及少硒地區人群的補硒要求，適應人群十分廣泛，因此具有很大的市場發展空間。