寧慧波, 呂 林,李孝亮,郭 林,田文濤,肖煥星,歐偉業
(1.上海海利生物技術股份有限公司,上海 奉賢 201403;2.山東農業大學動物科技學院,山東 泰安 271000)
豬瘟的診治實例及免疫體會
寧慧波1, 呂 林2,李孝亮1,郭 林1,田文濤1,肖煥星1,歐偉業1
(1.上海海利生物技術股份有限公司,上海 奉賢 201403;2.山東農業大學動物科技學院,山東 泰安 271000)
山東某豬場暴發了以仔豬及保育豬腹瀉,發燒、皮膚末梢和耳朵發紫、全身痙攣,四肢抽搐為特征的急性傳染病,給豬場帶來了極大的經濟損失。通過病理剖檢和實驗室診斷確定此次疫情是由豬瘟病毒感染引起,通過緊急撲殺發病豬,對假定健康豬進行緊急免疫接種豬瘟高效原代細胞苗和藥物治療等一系列的綜合防控措施,豬場狀況得到了明顯改善,提高了豬群成活率和經濟效益,目前,該豬場已恢復正常生產。
豬瘟;PCR;病理切片;ELISA;免疫程序
豬瘟是由豬瘟病毒(CSFV)引起的一種急性、熱性、高度接觸性的烈性傳染病。不同年齡、品種的豬均易感。主要通過消化道、呼吸道、眼結膜、皮膚創口等途徑感染傳播。該病發病急,感染率及死亡率高,以全身敗血、內臟實質器官出血、壞死和梗死為特征[1]。目前豬瘟依然不容忽視,需采取綜合性的防治措施。
2015年1月10日,山東德州某規模化豬場(800頭母豬)的大批仔豬出現腹瀉、發燒,急性死亡等情況,斷奶時死亡率高達40%。保育豬陸續出現消瘦、腹瀉、毛色雜亂、全身皮膚發紅等癥狀,轉群時死淘率高達30%。母豬及肥豬無明顯臨床癥狀。采取多種治療措施,療效不佳。2015年1月15日,筆者應邀到現場進行診治,了解豬場病情已經持續半個月,無特效療法,經了解豬場免疫程序混亂,并且使用的豬瘟疫苗為低廉豬瘟疫苗。
該場為新建豬場,于2014年6月開始陸續引種,為了降低生產成本,多種重要疫苗未進行免疫且豬群使用的豬瘟疫苗為低廉細胞苗,母豬配種前只免疫一次豬瘟疫苗,仔豬在30 d左右進行豬瘟疫苗初免。豬場仔豬在2周開始發病,很快在整個豬群蔓延傳播,發病率高,病程短,仔豬及保育豬死亡率快速升高。
病豬精神沉郁,食欲減退或廢絕,喜歡喝臟水(圖1);體溫升高達41 ℃,且持續不退;腹瀉(圖2)、消瘦;耳尖呈紫紅色、背部有出血點(圖3);被毛粗亂(圖4);斷奶時死亡率高達40%,保育豬轉群時死淘率高達30%,母豬及肥豬無明顯臨床癥狀。

圖1 喜歡喝臟水

圖2 病豬腹瀉

圖3 耳尖呈紫紅色、背部有出血點

圖4 被毛粗亂
喉頭水腫且有出血點(圖5),心肌出血(圖6),肺臟淤血水腫(圖7),脾臟表面及邊緣梗死(圖8),腹股溝淋巴結出血壞死(圖9),膀胱黏膜點狀出血(圖10),腎臟表面點狀出血(圖11)[2]。
選取病豬的脾臟、肝臟、淋巴結以及腦等組織,分別取0.5 g左右加入2mL左右磷酸緩沖液(PBS)混合研磨至勻漿狀態,反復凍融3次,進行豬瘟病毒、豬藍耳病病毒、偽狂犬病毒、圓環病毒及流行性腹瀉病毒的RT-PCR檢測;采取剖檢豬只的淋巴結、腎臟及大腦用10%福爾馬林溶液固定,石蠟切片,HE染色,鏡檢;同時對發病仔豬所對應的母豬進行血液采集,通過ELISA方法檢測豬瘟抗體水平,所使用的抗體檢測試劑盒均為美國IDEXX公司的相關產品。

圖5 喉頭水腫且有出血點

圖6 心肌出血

圖7 肺臟淤血水腫

圖8 脾臟表面及邊緣梗死

圖9 腹股溝淋巴結出血壞死

圖10 膀胱黏膜點狀出血

圖11 腎臟表面點狀出血
5.1PCR檢測檢測結果
通過對送檢病料的RT-PCR的檢測發現,豬瘟病毒為陽性,擴增條帶大小為300 bp左右(圖12)。豬藍耳病病毒、偽狂犬病毒、圓環病毒及流行性腹瀉病毒均為陰性(圖13、14、15、16)。

圖12 送檢組織的豬瘟病病原檢測結果

圖13 送檢組織的豬藍耳病病原檢測結果

圖14 送檢組織的偽狂犬病病原檢測結果

圖15 送檢組織的圓環病病原檢測結果

圖16 送檢組織的流行性腹瀉病病原檢測結果
5.2 病理組織學檢測結果
病理組織切片鏡下觀察,腹股溝淋巴結淋巴細胞壞死,胞核濃縮、破碎、崩解、壞死(圖17);腎小球及腎間質出血,腎小管上皮細胞輕微顆粒變性(圖18);腦部呈現腦血管袖套現象(圖19)。

圖17 胞核濃縮、破碎、崩解、壞死(HE×400)

圖18 腎小球及腎間質出血,腎小管上皮細胞輕微顆粒變性(HE×200)

圖19 腦部呈現腦血管袖套現象(HE×400)
5.3ELISA檢測結果
參照美國IDEXX相關試劑盒產品說明書,判定標準為:豬瘟病毒抗體阻斷率≥40%為陽性;阻斷率<30%為陰性,之間為可疑。檢測發現豬瘟抗體平均阻斷率為32.18%,陽性率為44.44%,離散度為87.69%(表1),提示豬瘟保護率較低。結合流行情況、臨床癥狀、病理剖檢及實驗室檢查確定為豬瘟病毒感染。

表1 檢測結果
6.1隔離封鎖、嚴格消毒
對發病豬只立即隔離、個別無治療價值病豬立即撲殺,并對尸體進行無害化掩埋處理,糞便發酵處理;對接觸過病豬的所有人員、用具進行徹底消毒,用氯制劑、堿制劑等消毒藥品輪換進行圈舍消毒。
6.2加強飼養管理
做好豬舍內糞污清理工作;加強豬舍通風換氣、保持豬舍干燥;降低飼養密度,消除各方面的應激因素;飼料添加電解多維、葡萄糖等營養抗病因子,保證豬群營養平衡需求。
6.3緊急接種
對未發病豬群進行緊急免疫,每頭豬接種豬瘟高效原代細胞苗2頭份,4周后加強免疫一次。出生仔豬進行豬瘟超免[3],21及50日齡再次免疫,劑量為1頭份。
6.4病豬對癥治療
主要是控制豬瘟病引起的繼發感染。對發病豬舍豬群飼料添加70%氟苯尼考300 g/t、電解質、葡萄糖,連用7 d;個體治療選用頭孢噻呋鈉配合柴胡肌肉注射,同時輔助使用黃芪多糖,以增強非特異性免疫機能。
6.5跟蹤檢查
采取上述綜合措施1個月后,全場各豬群生長繁殖性能顯著改善。斷奶仔豬成活率恢復到85%,保育豬成活率恢復到90%。抽取不同妊娠階段母豬檢測豬瘟抗體水平,結果顯示整齊度良好(表2)。

表2 豬瘟抗體水平檢測結果
7.1 種豬的引入是豬瘟疫情不穩定的重要因素
在自然條件下,豬瘟病毒只要通過直接或間接與感染豬只接觸經口鼻傳播[4]。在豬場中,為了保證豬群正常生產,因此要引入后備母豬。持續不斷的引種增加了豬瘟感染的風險,造成豬瘟的散發或者流行。該豬場分多次引入后備母豬,當第2次引入后備豬混群之后,豬場開始發病。故引入后備母豬時應進行嚴格充分的隔離,做好病原的檢測,確保引種后豬群的整體穩定性。
7.2疫苗免疫是控制豬瘟的重要手段
豬瘟是一種病毒性疾病,抗生素對其無效,在目前國內生物安全條件下,特別是一些養殖密集地區的中等規模養殖場,疫苗仍是防控豬瘟的主要手段[5]。
7.3選擇合適的疫苗是成功控制豬瘟的保障
我國政府對豬瘟的防治十分重視,豬瘟疫苗的研制技術一直處于世界前列,20 世紀80 年代即已研制出先進的第五代豬瘟活疫苗。目前國內豬瘟疫苗生產廠家眾多,但是在豬瘟疫苗生產中容易污染牛腹瀉病毒(BVDV),從而造成免疫效果下降甚至失敗[6]。因此選擇高效價、無污染的豬瘟疫苗對于提高豬瘟防控效果顯得非常重要。
豬瘟是我國一類烈性傳染病,自2007年開始對豬瘟實行全面強制免疫。近幾年由于豬藍耳病、圓環病毒感染等豬病的流行,使得部分豬場對豬瘟的防控意識下降,抱有僥幸心理,認為只要免疫豬瘟疫苗就不會出現問題。該豬場爆發豬瘟的主要原因是感染后備母豬的引入及低效豬瘟疫苗的使用。通過及時隔離消毒、緊急免疫、優化環境、提高營養等一系列措施后,豬群逐漸恢復穩定。因此做好基礎病原豬瘟的綜合防控對于豬群的持久穩定依然很重要。
[1] 蔡寶祥. 家畜傳染病學[M].第4版.北京:中國農業出版社,2001:201.
[2] 徐有生.科學養豬與豬病防治原色圖譜[M]. 第1版.北京:中國農業出版社,2009:81-83.
[3] 丘惠探,麥志均,粱健堯,等.豬瘟不同順序零天免疫的免疫效果比較[J]. 中國預防獸醫學報,2001,23(2):125-127.
[4] Barbara E S, Jeffery J Z, Sylvie D Z,et al. Diseases of swine[M]. Oxford:Blackwell Publishing, 2006:326-327.
[5] 田召芳,李春蕾,張文娟,等.豬瘟疫苗免疫綜述[J].中國動物檢疫,2011,28(8):70-73.
[6] 王琴,寧宜寶.豬瘟免疫失敗主要原因的解析[J].中國獸醫雜志,2005,41(6):61-63.
天康天藍凈 專防藍耳病
2015-06-16)