陳錦成,馮賢巧,蘇丹萍,陳志科,陳敏鴻,賀東生*
(1.廣州市南沙區大崗鎮畜牧獸醫站,廣東 廣州 511470;2.陽江市畜牧科學研究與技術推廣中心,529500;3.華南農業大學,510640)
一例豬乙型腦炎、豬偽狂犬病與豬圓環病毒病2型混合感染的診斷
陳錦成1,馮賢巧2,蘇丹萍3,陳志科2,陳敏鴻3,賀東生3*
(1.廣州市南沙區大崗鎮畜牧獸醫站,廣東 廣州 511470;2.陽江市畜牧科學研究與技術推廣中心,529500;3.華南農業大學,510640)
豬乙型腦炎是由乙型腦炎病毒(JEV)引起的人獸共患傳染病。豬是JEV的主要儲存宿主,其感染一般呈現豬-蚊-人的鏈狀方式。豬感染乙型腦炎后主要表現為懷孕母豬流產、產死胎或木乃伊胎,公豬睪丸炎以及少數仔豬呈神經癥狀,常給養豬業造成巨大的經濟損失。
豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病毒(PRV)引起的豬的急性傳染病??梢鹑焉锬肛i流產、死胎、公豬性功能低下,新生仔豬的大量死亡,育肥豬呼吸困難、生長停滯等,是危害全球養豬業的重大傳染病之一。
豬圓環病毒病是由豬2型圓環病毒(PCV2)感染導致的豬的一種免疫抑制性疾病,主要引起斷奶仔豬多系統衰竭綜合征、保育豬和育肥豬的呼吸道疾病及肉芽腫性腸炎,并可使懷孕母豬繁殖障礙。其高感染率給養殖戶造成嚴重的經濟損失。
本研究針對廣東某規?;B殖場發病情況、臨床癥狀、剖檢觀察及實驗室檢測診斷為豬乙型腦炎病毒、豬偽狂犬及豬2型圓環病毒混合感染。
1.1臨床診斷與病料的采集

圖1 病豬的病理變化圖
2014年9月,廣東某豬場發生懷孕母豬發生流產,產木乃伊胎,產房仔豬出現發燒、呼吸困難、腹瀉,部分有神經癥狀。病死仔豬剖檢可見腦出血水腫,肝、脾和腎有壞死灶;全身淋巴結腫大出血;肺淤血、水腫等為主要臨床特征。無菌采集病死豬的腦、肝臟、脾臟、淋巴結、等病變組織,作為臨床組織病料樣品,進行實驗室診斷。
1.2細菌培養
無菌取腦、肝和脾等病變臟器,分別接種于麥康凱和營養瓊脂等培養基,37 ℃培養24 h,觀察培養結果。同時,取病料進行涂片,經革蘭氏染色和瑞氏染色,鏡檢觀察。
1.3病毒核酸檢測
病料經適當處理后,利用TAKARA MiniBEST Viral DNA/ RNA Extraction Kit Ver 5.0試劑盒提取DNA及RNA,采用PCR和RTPCR方法對CSFV、PRRSV、JEV、PPV、PRV和PCV2進行檢測。
2.1細菌檢測結果
經接種培養后,各培養基中未見病原細菌生長;涂片鏡檢未見可疑病原細菌分布。
2.2PCR及RT-PCR檢測結果
瓊脂糖凝膠電泳結果顯示,采集病料中CSFV、PRRSV和PPV的RTPCR/PCR擴增結果均為陰性,部分樣品的JEV、PRV和PCV2的擴增結果呈陽性,結果見圖2、圖3和圖4。
根據臨床診斷和實驗室診斷結果,確診為豬乙型腦炎、豬偽狂犬病和豬圓環病毒混合感染。
3.1 豬乙型腦炎病
預防的根本在于消滅蚊蟲,搞好環境衛生,做好疫苗免疫接種。常用的疫苗為乙腦弱毒疫苗,應在乙腦流行前使用,多選擇在每年的4月至5月中旬。接種對象為初產母豬。同時,豬乙型腦炎為人獸共患,其傳播媒介為蚊蟲,因此在該病流行期間,對于疫區內的人也要接種乙腦疫苗,避免人獸共患的情況發生。
3.2豬偽狂犬病
發病時應將發病豬群隔離飼養,做好環境衛生控制;對發病豬豬舍及其周邊環境進行全面消毒,采用“全進全出”的生產模式。選用優質高效的豬偽狂犬基因缺失弱毒苗(gE、TK基因缺失)加強免疫;健康豬群仔豬3日齡內滴鼻免疫,2月齡再肌注免疫1次,種公母豬每3個月普免1次,后備母豬配種前免疫2次。

圖3 JEV RT-PCR檢測結果

圖4 PRV PCR檢測結果

圖5 PCV2 PCR檢測結果
3.3豬圓環病毒病
豬場應采取預防為主的方針,綜合防治,才能達到減少或避免損失的目的。對新引進種豬要進行檢測,不引進帶毒種豬。實行全進全出飼養模式;堅持對豬瘟、口蹄疫、高致病性豬藍耳病等重點疫病及細小病毒病、豬偽狂犬病的程序免疫,嚴格實施生物安全措施,控制并發、繼發感染;根據不同日齡適時調整飼料配方,保證豬群營養水平,增強自身抗病能力。
豬乙型腦炎病、豬偽狂犬病和豬圓環病毒病均是危害養豬業的重要疫病。蚊蟲在豬乙型腦炎的傳播中扮演了關鍵的角色,蚊蟲感染乙型腦炎病毒后呈終身感染,并且病毒可經蟲卵傳代,因此防蚊滅蚊是防治乙腦的重要措施。近年來出現的豬偽狂犬變異株也使得許多豬場的豬偽狂犬疫情時有發生,現有的豬偽狂犬疫苗對豬偽狂犬變異株有一定的作用,應全面加強免疫。豬圓環病毒病是一種以免疫障礙為特征的豬的病毒性傳染病,單純有豬圓環病毒2型感染發病的很少見,該病的混合感染現象發生廣泛,發病率與死亡率都很高,是當今乃至日后相當長時期內對養豬業危害最為嚴重的疫病之一。
本次疫情究其原因,分析可能是由于該豬場管理水平較低,疫苗免疫不確實,導致豬只免疫力下降并發病。在結合發病情況、臨床癥狀、剖檢病變的基礎上,根據實驗室PCR診斷結果,確診本次廣東省某集約化豬場發生的疫情為豬乙型腦炎病毒、豬偽狂犬病毒及豬圓環病毒2型的混合感染,通過加強飼養管理,做好滅蚊滅鼠工作,優化免疫程序,提高免疫效果和豬群對疫病的抵抗力,采取一定的綜合防治措施,加強衛生和飼養管理,并積極采取有效的對癥療法,穩定并控制疫情,確保了豬場的健康發展。
2015-11-22)
2012番禺市科技局和廣東省農推([2013]185)項目資助
賀東生