鄭朋朋,李珊,張加研,敖新宇,*
(1.西南林業(yè)大學生命科學學院,云南昆明650224;2.西南林業(yè)大學材料學院,云南昆明650024)
瑪咖與酒浸瑪咖的成分分析與比較
鄭朋朋1,李珊1,張加研2,敖新宇1,*
(1.西南林業(yè)大學生命科學學院,云南昆明650224;2.西南林業(yè)大學材料學院,云南昆明650024)
以云南種植瑪咖為試驗材料,對酒浸瑪咖與瑪咖中的蛋白質(zhì)、粗纖維、糖類、礦質(zhì)元素分別進行分析和比較。結果表明:兩者各成分的含量間存在極顯著差異;酒浸瑪咖中的多糖和粗纖維明顯高于瑪咖中的含量,分別為瑪咖含量的158.10%和178.70%;所測定的礦質(zhì)元素,酒浸瑪咖中均高于瑪咖中的含量,其中Zn和Ca分別是瑪咖中含量的144.64%和210.47%。從而說明酒浸瑪咖存在開發(fā)利用的潛在價值。
瑪咖;酒浸瑪咖;成分分析;礦質(zhì)元素
瑪咖(Maca)為十字花科(Cnlcifera)獨行菜屬(Lepidium L)植物,原生長于秘魯海拔4 000 m~4 500 m的安第斯山脈。在安第斯山脈地區(qū),瑪咖作為藥食兼用的植物已有悠久的歷史,現(xiàn)代大量研究表明瑪咖具有抗疲勞、改善性功能、抗氧化、減少前列腺增生、緩解更年期綜合癥、抑制癌細胞、增加骨密度等多種功效。國內(nèi)外專家對瑪咖的營養(yǎng)成分及次生代謝物質(zhì)進行了較深入的研究,瑪咖不僅含有豐富蛋白及微量元素等營養(yǎng)成分,還含有多種次生代謝物質(zhì):瑪咖烯、生物堿、芥子油苷及其水解衍生物、甾醇、多酚類及其他成分,這些次生代謝物質(zhì)被認為與瑪咖的保健功效有密切關系。瑪咖獨特全面的功效已受到世界保健食品行業(yè)的廣泛關注[1-5]。
由于云南省高寒山區(qū)獨特的區(qū)域優(yōu)勢,在麗江市古城區(qū)、玉龍縣和曲靖市會澤縣等高寒冷涼山區(qū)開展了瑪咖人工馴化栽培與種植,截至2010年云南省瑪咖種植面積達175 hm2,瑪咖產(chǎn)量780 t,分別占全國瑪咖種植面積、產(chǎn)量的90%、93%,成為全國最大的瑪咖生產(chǎn)基地,對中國瑪咖生產(chǎn)起著舉足輕重的作用。瑪咖已被開發(fā)成不同的商業(yè)產(chǎn)品,其中就有瑪咖酒,酒浸瑪咖即是瑪咖經(jīng)過酒浸泡后的廢渣,查閱相關資料尚未有對于酒浸瑪咖成分研究的相關報道,本研究對瑪咖與酒浸瑪咖的主要成分進行分析和比較,以期為酒浸瑪咖更好地開發(fā)與利用提供理論參考[6-9]。
1.1材料與試劑
1.1.1材料
瑪咖塊根干粉(A樣):云南省麗江市瑪咖種植地成熟瑪咖塊根,切成片晾干,再放入60℃烘箱烘干,研磨過80目篩。
酒浸瑪咖根干粉(B樣):上述瑪咖塊根干粉用糧食酒(51°主要成分為H2O和乙醇,少量還原糖)浸泡瑪咖干粉5 d,過濾晾干研磨過篩。
1.1.2試劑
硼酸、甲基紅、溴甲酚綠、葡萄糖、硫酸銅、硫酸鉀、氫氧化鈉、酒石酸鉀鈉、3,5-二硝基水楊酸、濃鹽酸(AR):國藥集團化學試劑有限公司;濃硫酸、苯酚、無水乙醇、三氯甲烷、正丁醇(AR):汕滇藥業(yè)有限公司。
1.1.3儀器
電熱恒溫鼓風干燥箱(DHG-9240A型)、水浴鍋(HWS-12):上海一恒科學儀器有限公司;干燥器、粉碎機(M20):KIKA-WERKE公司;80目篩子、電子天平(BS224S):SARTORIUS公司;全自動定氮儀(FOSS-2300)、消化儀(FOSS-2300):瑞典福斯分析儀器有限公司;超聲波清洗儀(AS20500B):杭州匯爾儀器設備有限公司;紫外分光光度計(TU-1901):北京普析通用儀器有限責任公司;粗纖維測定儀(CXC-06):上海新嘉電子有限公司;離心機(5430R):Eppendorf;馬弗爐(SX2-25-12):上海市崇明實驗儀器廠。
1.2方法
1.2.1水分含量的測定
A、B樣各取3份,每份樣準確稱取2 g,放入105℃衡重的稱量瓶中,在105℃烘箱中烘干2 h,取出放入干燥器冷卻稱重,記錄后重新放入105℃烘箱烘干,至質(zhì)量不再變化,計算含水量。

式中:m0為衡重稱量瓶質(zhì)量,g;m1為衡重前樣品與衡重稱量瓶的質(zhì)量,g;m2為衡重后樣品與衡重稱量瓶質(zhì)量,g。
1.2.2蛋白質(zhì)含量的測定
1.2.2.1樣品的消化
具體操作如下:準確稱取0.1 g樣品,加入研細的4.5 g硫酸鉀、0.5 g硫酸銅和8 mL濃硫酸,F(xiàn)OSS-2 300消化儀中,210℃消化1 h,420℃消化2 h,待冷卻后測定。
1.2.2.2蛋白質(zhì)含量測定
待樣品冷卻后,儀器參數(shù)為:檢測液30 mL、氫氧化鈉50 mL,鹽酸濃度0.104 7 mol/L,測定樣品中蛋白質(zhì)含量,結果有儀器自動讀出。
1.2.3還原糖與總糖含量的測定
1.2.3.1還原糖與總糖的葡萄糖標準曲線
稱取105℃烘箱衡重的葡萄糖100 mg溶解后定容到100 mL,配成1.0 mg/mL的葡萄糖儲備液,分別移取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL標準葡萄糖溶液到具塞試管中,補水至1.0 mL,分別加入DNS試劑2.0 mL,沸水浴中準確煮沸5 min,取出后水槽中冷卻,再加入9.0 mL蒸餾水,在540 nm波長下測定吸光值,以葡萄糖質(zhì)量體積濃度為橫坐標,吸光值為縱坐標繪制葡萄糖標準曲線。
1.2.3.2還原糖與總糖的提取與測定
準確稱取1 g樣品,每份樣品加入40 mL蒸餾水,在60℃水浴中浸提2 h,過濾保留濾液,濾渣在浸提1 h,再過濾,合并兩次的濾液并定容到100 mL,稀釋5倍后取1.0 mL按照1.2.3.1中方法測定吸光值,計算還原糖含量。

式中:A為樣品吸光值;m為樣品質(zhì)量,g。
準確稱取1 g樣品,每份樣品加入20 mL蒸餾水和6 mol/L鹽酸5 mL,沸水浴0.5 h,待冷卻后用6 mol/L氫氧化鈉中和提取液為中性,過濾保留濾液并定容到100 mL,稀釋10倍后取1.0 mL按照1.2.3.1中方法測定吸光值,計算總糖含量。

式中:A為樣品吸光值;m為樣品質(zhì)量,g。
1.2.4粗纖維含量測定[10]
準確稱取1 g樣品(m0),放入砂芯漏斗中。開啟酸、堿、蒸餾水的預熱開關,待酸、堿、蒸餾水沸騰后,打開加酸開關,分別按1號~6號加液按鈕加酸200 mL,每支加1滴~2滴正辛醇,開啟消煮加熱開關,待消煮管內(nèi)酸液再次沸騰后,保持微沸30 min,將消煮加熱開關關閉,打開抽濾開關,打開抽濾泵開關,分別將消煮管內(nèi)的酸液抽掉。抽完酸液后,先關閉抽濾泵開關,打開蒸餾水開關,再按下加液按鈕,在消煮管中加入蒸餾水后在抽干,連續(xù)2次~3次,直至用試紙測試顯中性后關閉加蒸餾水開關。打開加堿開關,分別在消煮管中加入微沸的堿液200 mL后關閉加堿開關,也在每支消煮管中加入1滴~2滴正辛醇后重復上述的操作,進行堿消煮、抽濾和蒸餾水洗滌。然后,用吸管分別在消煮管上口加入25 mL左右的95%以上濃度的乙醇(不能用丙酮等有機溶劑浸泡),浸泡十幾秒后抽干。取出砂芯漏斗移入恒溫箱,在(130±2)℃下烘2 h,取出后再干燥器中冷卻至室溫,稱重后得到m1。將稱重后的坩鍋再放入(500±25)℃的高溫爐內(nèi)灼燒1 h,取出后置于干燥器中冷卻至室溫后稱重得到m2,測定結果按下式計算:

式中:m0為樣品質(zhì)量,g;m1為130℃加熱2 h后砂芯漏斗與處理樣品的質(zhì)量,g;m2為500℃灼燒1 h后砂芯漏斗與處理樣品的質(zhì)量,g。
1.2.5多糖提取與測定[11]
1.2.5.1多糖的葡萄糖標準曲線
準確稱取105℃恒重的葡萄糖10.0 mg,溶解后定容到100 mL,配成100 μg/mL的葡萄糖標準溶液;精確量取100 μg/mL的葡萄糖標準溶液0.0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL,補水至1.0 mL,分別制成0、20、40、60、80、100 μg/mL待測標注溶液,加4%苯酚1.0 mL、濃硫酸5.0 mL,水槽中冷卻10 min,待冷卻后在490 nm波長下測定樣品的吸光值,以濃度為橫坐標,吸光值為縱坐標做標注曲線。
1.2.5.2多糖的提取
準確稱取1 g樣品,每份加入40 mL蒸餾水,在超聲清洗儀中超聲(功率520 W)10 min后,70℃水浴2 h,過濾保留濾液,濾渣相同條件下再浸提1 h,過濾,合并兩次濾液,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至5 mL,加入無水乙醇至體積分數(shù)為80%,4℃沉淀12 h,離心取沉淀,Sevag法除蛋白后定容待測。
1.2.5.3多糖的測定
采用苯酚-硫酸法測定瑪咖多糖。稀釋10倍后取1.0 mL樣品加4%的苯酚1.0 mL、濃硫酸5.0 mL,放入水槽中冷卻10 min,待冷卻后,在490 nm波長下測定吸光值,計算多糖含量。

式中:A為樣品吸光值;m為樣品質(zhì)量,g。
1.2.6礦質(zhì)元素的測定[12]
1.2.6.1樣品的前處理
準確稱取0.500 g樣品,加1 mL濃硫酸和4 mL濃硝酸,置于電熱板上碳化15 min,然后補加4 mL濃硝酸和1 mL高氯酸,置于微波消解器中,按如下程序消解:(0.2 MPa,3 min)(0.5 MPa,2 min)(1.0 MPa,1 min)(1.2 MPa,1 min)(1.8 MPa,10 min),消解完成后冷卻至室溫,將樣品管中的液體轉(zhuǎn)移到50 mL容量瓶中,用5%硝酸定容,同時設置空白對照。
1.2.6.2測定條件
ICP-OES工作主要參數(shù):入射功率1.0 kW:等離子氣流量15 L/min;輔助氣流量1.5 L/min:霧化器壓力200 kPa;泵速15 r/min;取3次測量值的平均值。
2.1葡萄糖標準曲線
2.1.1還原糖與總糖的葡萄糖標準曲線
通過Origin8.0對試驗數(shù)據(jù)進行分析并繪制標準曲線,如圖1所示,還原糖與總糖的葡萄糖標準曲線回歸方程為:A=1.505C+0.057;R2=0.997。

圖1 還原糖和總糖的葡萄糖標準曲線Fig.1Glucose standard curve of reducing sugar and total sugar
2.1.2多糖的葡萄糖標準曲線
通過Origin8.0對試驗數(shù)據(jù)進行分析并繪制標準曲線,如圖2所示,多糖的葡萄糖標準曲線回歸方程為:A=0.007 66C-0.000 286;R2=0.999 4。

圖2 多糖的葡萄糖標準曲線Fig.2Glucose standard curve of polysaccharide
2.2酒浸瑪咖與瑪咖成分分析
瑪咖、酒浸瑪咖含水量分別為11.17%和11.05%,其他成分含量均為折除水分之后的絕對含量,測定與計算結果見表1。

表1 酒浸瑪咖與瑪咖主要營養(yǎng)成分分析結果Table 1Analysis results of main nutrients
由表1可見,酒浸瑪咖中總糖、多糖、粗纖維的含量高于瑪咖,由P值可知,兩者營養(yǎng)成分之間的含量差異均達到極顯著水平。經(jīng)過糧食酒的浸泡,瑪咖中的極性小分子與蛋白質(zhì)進入糧食酒中,而多糖、粗纖維則極少溶于糧食酒中,浸泡之后的瑪咖即酒浸瑪咖中的多糖、粗纖維含量相對增加,從而導致酒浸瑪咖中總糖含量也相對增加。
研究表明多糖具有抗癌、抗腫瘤、抗病毒、增強免疫力、降血脂、降血壓等生理活性,從表1可見,酒浸瑪咖中多糖含量為(17.09±0.742)%,高于一般植物樣品中的多糖含量;粗纖維雖不能直接被人體消化吸收,但粗纖維能很好地促進消化,提高人體腸道的消化吸收功能。

表2 酒浸瑪咖與瑪咖礦質(zhì)元素分析結果Table 2Analysis results of mineral elements
由表2可見酒浸瑪咖中各礦質(zhì)元素的含量均高于瑪咖,P值則表明兩者的礦質(zhì)元素含量之間的差異極顯著。其中Zn和Ca分別是瑪咖中含量的144.64%和210.47%。Zn是人體必需的微量元素之一,在人體生長發(fā)育、生殖遺傳、免疫、內(nèi)分泌等重要生理過程中起著極其重要的作用,被人們冠以“生命之花”、“婚姻和諧素”的美稱;鈣離子是機體各項生理活動不可缺少的離子。它對于維持細胞膜兩側(cè)的生物電位,維持正常的神經(jīng)傳導功能。維持正常的肌肉伸縮與舒張功能以及神經(jīng)-肌肉傳導功能,還有一些激素的作用機制均通過鈣離子表現(xiàn)出來??梢娋平斂д橇己玫难aZn和Ca的食物。從而表明酒浸瑪咖存在開發(fā)利用的潛在價值。
本研究對瑪咖與酒浸瑪咖的主要營養(yǎng)成分及礦質(zhì)元素進行了分析,并對分析結果進行了比較,結果表明:酒浸瑪咖中的多糖和粗纖維明顯高于瑪咖中的含量,分別為瑪咖含量的158.10%和178.70%;所測定的礦質(zhì)元素,酒浸瑪咖中均高于瑪咖中的含量,其中Zn和Ca分別是瑪咖中含量的144.64%和210.47%。上述成分對人體的健康具有積極作用,從而說明酒浸瑪咖存在開發(fā)利用的潛在價值。
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Component Analysis and Comparison with Maca and Wine-soaked Maca
ZHENG Peng-peng1,LI Shan1,ZHANG Jia-yan2,AO Xin-yu1,*
(1.Life Science College,Southwest Forestry University,Kunming 650224,Yunnan,China;2.College of Materials,Southwest Forestry University,Kunming 650224,Yunnan,China)
In order to compare differences in composition between Maca and Wine-soaked Maca.Lijiang,Yunnan planted Maca as the material for the test,protein,crude fiber,carbohydrates,mineral elements content were determined and compared.There was a significant difference among the component content;Wine-soaked Maca's polysaccharides and crude fiber content was significantly higher than the content of Maca,was 158.10% and 178.70%of Maca;Mineral elements were higher than the content of Maca,especially Zn and Ca was 144.64%and 210.47%content of Maca.Thus indicating the presence of the potential value of the development and utilization of Wine-soaked Maca.
Maca;Wine-soaked Maca;component analysis;mineral elements
10.3969/j.issn.1005-6521.2015.17.009
2015-04-03
云南省優(yōu)勢特色重點學科生物學一級學科建設項目(50097505)
鄭朋朋(1990—),男(漢),研究生,研究方向:生物化學與分子生物學
敖新宇(1978—),男(漢),副教授,碩士,研究方向:生物化學與分子生物學。