三七總皂苷對動脈粥樣硬化患者血管炎癥因子及頸動脈內膜中層厚度和斑塊的影響*

江小萍曾凡鵬劉首明林小鴛馮素蓮沈祖泓

（廣東省清遠市中醫院，廣東清遠511500）

·研究報告·

三七總皂苷對動脈粥樣硬化患者血管炎癥因子及頸動脈內膜中層厚度和斑塊的影響*

江小萍曾凡鵬劉首明林小鴛馮素蓮沈祖泓

（廣東省清遠市中醫院，廣東清遠511500）

目的觀察三七總皂苷對高脂血癥的動脈粥樣硬化（AS）患者血清炎癥因子和頸動脈內膜中層厚度（CIMT）及斑塊的影響。方法將71例CIMT≥0.9 mm和（或）有頸AS斑塊的高脂血癥患者按隨機數字表法分為三七總皂苷組和阿托伐他汀組，采用酶聯免疫法及彩色超聲顯像儀，觀察兩組患者用藥前后超敏C反應蛋白（hs-CRP）、低密度脂蛋白（LDL-C）、人可溶性CD40配體（sCD40L）、基質金屬蛋白酶-9（MMP-9）、白介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）表達及CIMT和斑塊以及實驗室生化指標的變化。結果兩組患者服藥前hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平、CIMT和斑塊積分比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；兩組患者服藥12周hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平較各自服藥前明顯降低（P＜0.05），CIMT和斑塊積分較服藥前明顯降低（P＜0.05），兩組服藥前后比較差異有統計學意義（P＜0.05）；兩組患者用藥過程中出現的不良反應比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。結論三七總皂苷能保護高脂血癥的AS患者血管內皮功能，抑制頸動脈內膜增厚及動脈粥樣硬化斑塊增大，延緩AS的進展，其機制與其降低血清hs-CRP、LDLC、sCD40L、MMPs、IL-6、TNF-α水平有關。

動脈粥樣硬化三七總皂苷可溶性CD40配體

動脈粥樣硬化（AS）是一種與炎癥和免疫反應密切相關的疾病，炎癥可致血管內皮損傷、動脈中膜平滑肌細胞增生，最終導致動脈內膜脂紋、纖維斑塊和（或）粥樣斑塊形成［1］。sCD40L作為一種新的炎癥標志物，與CD40結合后介導免疫應答，參與AS的形成、引發內皮功能障礙，在AS的發生和發展起重要作用［2］。基質金屬蛋白酶（MMPs）是AS斑塊中炎癥細胞的產物，亦與AS的發生、發展密切相關［3］。因此，控制炎癥反應、保護血管內皮功能有可能成為治療AS的新途徑。三七總皂苷（tPNS）作為臨床的常用處方藥廣泛應用于AS、高脂血癥及冠心病等血管性疾病的治療中，具有良好的調脂、抗氧化、抑制炎癥反應、抗血小板聚集作用［4］。本研究旨在觀察tPNS對高脂血癥的頸AS患者血管內皮的保護及血管炎癥的抑制作用，探討中醫藥治療早期AS的方法，分析其抗AS的可能機制。現報告如下。

1　資料與方法

1.1病例選擇符合《中國成人血脂異常防治指南》［5］的診斷標準。納入標準：血脂異常、頸動脈內膜中層厚度≥0.9 mm和（或）有頸AS的患者。排除標準：已知或在隨訪期間發生患嚴重肝腎疾病、內分泌代謝疾病、結締組織疾病和腫瘤的患者。

1.2臨床資料選取2012年10月至2013年12月在本院住院的血脂異常患者75例，其中4例患者失訪，剩余71例。將入選的71例患者按隨機數字表法分為三七總皂苷組36例，男性21例，女性15例；平均年齡（64.81±12.41）歲；體質量指數（24.52±4.12）kg/m2；吸煙指數（313.55±298.15）；高血壓22例，糖尿病6例。阿托伐他汀組35例，男性20例，女性15例；平均年齡（64.29±13.46）歲；體質量指數（25.11±3.18）kg/m2；吸煙指數（325.13±273.80）；高血壓23例，糖尿病6例。兩組患者臨床資料比較差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究經本院倫理委員會批準。

1.3治療方法71例患者均予飲食治療和改善生活方式等處理，對高血壓、糖尿病患者予降壓、降糖治療。三七總皂苷組予三七總皂苷100 mg，口服，每日3次；阿托伐他汀組予阿托伐他汀20 mg，口服，每日1次。兩組療程均為12周。停用阿托伐他汀警戒值［5］：血清總膽固醇（TC）＜2.6 mmol/L；服藥期間出現肌痛同時肌酸激酶（CK）正常高限5倍、天門冬酸氨基轉移酶（AST）正常高限3倍、肌酐221 mmol/L等嚴重副作用需停藥。

1.4觀察指標記錄入選患者服藥前、服藥12周后血常規、肝腎功能、CK、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、三酰甘油（TG）、血清總膽固醇（TC）和血糖（GLU）、糖化血紅蛋白（HbA1C），采血前72 h禁酒及高脂飲食，空腹12 h取靜脈血。觀察用藥后反應：胃腸道反應、肝腎功能、出血情況及其他副作用。超敏C反應蛋白（hs-CRP）檢測：采用免疫透射比濁法檢測，全自動生化分析儀測定超敏C反應蛋白。入選患者均在人院后48 h內抽取空腹靜脈血5 mL，3000 r/min離心10 min分離血清，置于-20℃冰箱內保存。采用酶聯免疫吸附法檢測氧化修飾低密度脂蛋白（ox-LDL）、人可溶性CD40配體（sCD40L）、基質金屬蛋白酶-9（MMP-9）、白介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）。ELISA試劑盒購自生工生物工程（上海）股份有限公司，操作步驟和反應條件均嚴格按照試劑盒說明書進行和設定。檢測患者頸動脈內膜中層厚度（CIMT）：由經驗豐富的醫生對所有患者進行頸動脈超聲檢查。采用美國通用彩色多普勒超聲診斷儀（GE Vivid7），周圍血管探頭頻率為7.5～10 MHz，于采血前后24 h內測量雙側頸總脈、頸內動脈和頸動脈分叉處IMT及動脈硬化斑塊。CIMT＜0.9 mm定義為內膜中層厚度正常，0.9 mm≤CIMT＜1.3 mm為內膜中層增厚，以內膜局限性突出管腔、內膜厚度≥1.3 mm為斑塊形成指標。頸動脈粥樣硬化斑塊積分方法：測定雙側頸總動脈、頸內動脈和頸動脈分叉處斑塊面積，將斑塊面積相加即為其斑塊總積分。

1.5統計學處理采用SPSS17.0統計分析軟件。計量資料以（±s）表示，采用t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1兩組患者治療前后血清hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平、CIMT和斑塊總積分以及生化指標比較見表1。結果示兩組患者服藥前、服藥12周hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平、CIMT和斑塊積分比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；兩組患者服藥12周HDL-C、CK、GLU、HbA1C較本組服藥前無明顯變化（P＞0.05）；LDL-C、TG、TC和hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平均較本組服藥前明顯降低（P＜0.05），CIMT和斑塊積分較服藥前明顯降低（P＜0.05），兩組服藥后比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.2兩組患者不良反應情況比較結果為三七總皂苷組無不良反應出現，阿托伐他汀組出現谷丙轉氨酶升高1例、天門冬氨酸氨基轉移酶升高1例。

表1　兩組治療前后血脂、血糖、CK、hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平及CIMT和斑塊積分比較（±s）

表1　兩組治療前后血脂、血糖、CK、hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平及CIMT和斑塊積分比較（±s）

與本組治療前比較，*P＜0.05；與對照組同時段比較，△P＜0.05。下同。

斑塊積分（mm2）三七總皂苷組服藥前154.31±52.18 0.94±0.38 3.34±0.785.84±1.383.9±0.885.04±1.18 5.65±0.58 21.36±5.65561.06±72.15561.06±72.15 336.35±62.783.35±0.5843.39±11.611.05±0.242.34±0.89（n=36）服藥后131.90±48.52 1.15±0.32 2.91±0.62*△4.91±0.52*△2.91±0.92*△4.81±1.52 5.37±0.425.19±3.35*△206.8±51.02*△206.80±51.02*158.9±58.82*△1.71±0.52*△19.85±10.39*△0.81±0.12*△1.61±0.92*△阿托伐他汀組服藥前149.73±63.51 0.99±0.41 3.41±0.815.91±1.114.21±0.915.11±1.22 5.59±0.62 23.58±6.59530.71±69.52550.71±69.52 341.95±71.183.21±0.6142.78±10.531.01±0.272.57±1.01（n=35）服藥后155.79±58.67 1.09±0.47 2.79±0.67*4.79±1.27*2.79±0.87*4.79±1.27 5.29±0.475.91±2.99*218.79±48.27*215.79±48.27*159.82±61.61*1.79±0.67*20.11±11.29*0.79±0.17*1.59±0.87*組別時間CK（U/L）HDL-C（mmol/L）LDL-C（mmol/L）TG（mmol/L）TC（mmol/L）GLU（mmol/L）HbA1C（%）hs-CRP（mg/L）oxLDL（μg/L）sCD40L（pg/mL）MMP-9（ng/mL）IL-6（pg/mL）TNF-α（ng/L）CIMT（mm）

3　討論

炎癥反應貫穿于AS斑塊形成、發展和破裂的全過程，hs-CRP是全身性炎癥反應的非特異性的標志，可直接參與AS病變的形成、斑塊破裂及血栓形成［6］。CD40屬于腫瘤壞死因子受體超家族，CD40L屬于TNF超家族。CD40L、CD40的相互作用貫穿AS發生發展的全過程，CD40L和CD40主要表達在AS損傷部位的巨噬細胞、血管內皮細胞、T細胞和平滑肌細胞上［7］。當內皮細胞功能損傷后CD40表達增加，與CD40L結合，可激活炎癥反應、活化血小板、引發內皮功能障礙［8］，同時也促進MMP-9的產生，MMP-9可降解細胞外基質，最終加速AS的發生和發展。研究表明［9］：抑制sCD40L表達，可保護血管內皮功能、防止AS斑塊的形成和發展、促進斑快的穩定。本研究結果發現：外周血清sCD40L、MMPs水平在兩組用藥后明顯低于用藥前、CIMT及斑塊積分明顯低于用藥前，提示三七總皂苷、阿托伐他汀均可有效降低sCD40L、MMPs的表達，減輕炎癥反應，保護血管內皮功能，抑制頸動脈內膜增厚及動脈粥樣硬化斑塊增大。

oxLDL易沉積于動脈內膜，引起血管內皮損傷、內皮細胞通透性增加、巨噬細胞的炎癥反應和動脈中膜平滑肌細胞增生，最終導致動脈內膜脂紋、纖維斑塊和（或）粥樣斑塊形成［10］。同時，oxLDL可刺激多種炎癥因子如TNF-α、IL-6的表達，炎癥介質共同介導單核-巨噬細胞和T淋巴細胞與內皮細胞的黏附，促進它們向血管壁的遷移，造成早期血管壁內皮細胞的損傷，加速AS炎癥反應［11］。因此改善血管內皮功能及降低炎癥標志物水平是預防AS的關鍵。本研究結果發現，兩組用藥后外周血清hs-CRP、IL-6、TNF-α水平、CIMI及斑塊積分明顯低于用藥前，提示三七總皂苷可有效降低hs-CRP、IL-6、TNF-α的表達，減輕炎癥反應，抑制頸動脈內膜增厚及AS斑塊增大。

綜上所述，本研究結果表明，長期服用三七總皂苷能有效降低AS患者血清炎癥因子的表達，并能通過抑制CD40/CD40L活化，減少炎癥因子的釋放，從而減輕炎癥反應，保護血管內皮細胞，抑制頸動脈內膜增厚及動脈粥樣硬化斑塊增大，延緩AS的進展。

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The Effect of Total Panax Notoginseng Saponins（tPNS）on Inflammatory Factor，Carotid Artery Intimal Medial Thickness（CIMT）and Atherosclerotic Plaque of Hyperlipidemia Patients with Atherosclerosis

JIANG Xiaoping，ZENG Fanpeng，LIU Shouming，et al.
Qingyuan Hospital of TCM，Guangdong Province，Guangdong，Qingyuan 511500，China

Objective：To study the effect of total panax notoginseng saponins（tPNS）on Inflammatory factor，carotid artery intimal medial thickness（CIMT）and Atherosclerotic plaque of hyperlipidemia patients with atherosclerosis.Methods：71 patients were divided random into 2 groups：TPNS group and atorvastatin group. Before and after medication，the levels of Serum hsCRP，oxLDL，sCD40L，MMPs，IL-6，TNF-α，CIMT and Atherosclerotic plaque were measured in 71 patients.Results：Before medication，the levels of Serum hsCRP，oxLDL，sCD40L，MMPs，IL-6，TNF-α，CIMT and Atherosclerotic plaque of both groups were not statistically significant.After 12 weeks′medication，the levels of Serum hsCRP，oxLDL，sCD40L，MMPs，IL-6，TNF-α，CIMT and Atherosclerotic plaque of both groups were significantly lower than those before medication.The side effects of medicine of both groups were not statistically significant.Conclusions：TPNS has a protective effect on vascular endothelium in hyperlipidemia patients with atherosclerosis.This effect is related to downregulation of serum hs-CRP，oxLDL level and the decrease of sCD40L，MMPs，IL-6，TNF-αexpression in hyperlipidemia patients with atherosclerosis.

Atherosclerosis；Total pannax notoginseng saponin（tPNT）；Soluble CD40 ligand

R543.5

A

1004-745X（2015）10-1753-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.10.020

2015-05-11）

廣東省中醫藥局建設中醫藥強省科研基金資助項目（20121098）