老年冠心病心衰患者血漿網膜素-1水平的變化

王秀華 竇靈芝 王小清 (中南大學護理學院，湖南 長沙 4003)

近年來研究發現某些脂肪細胞因子除了參與糖脂代謝的調節，而且在調節免疫反應及炎癥反應中具有重要的作用〔1〕，其與動脈粥樣硬化(AS)的關系也初步為人們所認識。網膜素(Omentin)是一種新發現的由網膜組織表達并分泌的脂肪細胞因子，能夠提高胰島素介導的葡萄糖攝取及激活絲氨酸-蘇氨酸激酶/蛋白激酶B(Akt/PKB)，從而提高脂肪細胞的胰島素敏感性，具有調節脂肪代謝等重要作用，參與肥胖、2型糖尿病及AS的發生發展。研究發現〔2〕Omentin有兩種形式，即Omentin-1和 Omentin-2，外周血中主要以 Omentin-1的形式存在。Yamawaki等〔3〕研究發現Omentin通過激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)而介導內皮一氧化氮(NO)合成酶的磷?；?，進而促進NO的生成，生成的NO通過抑制c-Jun氨基末端激酶(JNK)的活化，來抑制腫瘤壞死因子(TNF)-α介導的的環氧合酶(COX)-2的表達水平，從而發揮其抗炎作用，該項研究，使得Omentin的抗炎作用機制得到了首次證實。Kazama等〔4〕通過對血管平滑肌細胞(SMCs)炎癥反應的研究結果發現，Omentin是一種新的抗炎細胞因子，而且其抗炎作用至少部分是由抗氧化作用所引起的。此外，Omentin-1也被看作機體在代謝失衡狀態下的一種保護性細胞因子〔5〕。有研究發現冠心病患者血漿Omentin水平是下降的，由此推測Omentin-1也可能參與冠狀動脈AS的發生，但Omentin是否參與了冠心病心衰患者的發展過程，相關研究甚少，而且Omentin的特異性受體是否可成為肥胖所導致的心血管疾病的新的藥物治療靶點還需進一步的研究來證實。本研究探討血漿Omentin-1水平在冠心病的發生、發展過程中的作用。

1 對象和方法

1.1 研究對象 選擇自2012年7月至2012年12月在中南大學湘雅二醫院通過冠狀動脈造影或冠狀動脈CT血管造影(CTA)明確診斷為冠心病的老年患者59例，男36例，女23例，同期健康體檢者31例作為正常對照組，男20例，女11例，冠心病組及正常對照組年齡均≥60歲。根據臨床癥狀將冠心病組分為穩定型心絞痛(SAP)組和不穩定型心絞痛(UAP)組;根據冠心病患者NYHA分級法分為三組，即心功能I級組有11例，心功能Ⅱ、Ⅲ級組36例，心功能Ⅳ級組12例。所有研究對象都簽署知情同意書。排除嚴重肝、腎功能不全;嚴重全身疾病(如呼吸系統疾病、消化系統、神經系統等);惡性腫瘤;各種急、慢性感染性疾病;自身免疫性疾病或結締組織病患者;最近3個月有重大創傷、外科手術者。

1.2 儀器設備和試劑 80-2臺式離心機，由上海手術機械廠生產;ELX800全自動酶標分析儀，由Bio-EK Instrument Inc生產;Omentin酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒及內脂素ELISA試劑盒均由長沙維爾生物科技公司提供。

1.3 研究方法

1.3.1 各項臨床指標檢測 所有患者及正常對照組均空腹10 h以上，于入院次日清晨測量身高、體重、血壓，并于空腹抽取肘靜脈血測定血常規、肝腎功能、血脂、C反應蛋白等指標(由檢驗科專人質控檢驗)。同時采集肘靜脈血3 ml放入EDTA抗凝管，搖勻，2 000 r/min，離心20 min后，分離上清液即血漿并凍存于－80℃，用于集中測定血漿Omentin-1。

1.3.2 血漿Omentin-1的測定 采用ELISA測定血漿Omentin-1的濃度。ELISA試劑盒由長沙維爾生物科技公司代理提供。檢測范圍為50 ng/L～1 000 ng/L。

1.4 統計學處理 應用SPSS17.0統計軟件行χ2檢驗、t檢驗，單因素方差分析(ANOVA);相關性分析采用Pearson相關分析方法，多因素分析采用多元線性逐步回歸分析。應用二元Logistic回歸分析評價各變量與冠心病的獨立相關性。

2 結果

2.1 冠心病組與正常對照組一般指標比較 與正常對照組相比，冠心病組體重指數(BMI)、血清總膽固醇(TC)水平、血清甘油三酯(TG)水平、血清C反應蛋白(CRP)水平均顯著升高，血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平顯著下降(P均＜0.05)，其他指標如年齡、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、谷丙轉氨酶(ALT)、谷革轉氨酶(AST)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)，兩組間比較差異無統計學意義(P均＞0.05)，見表1。

表1 冠心病組與正常對照組一肌臨床資料比較(s)

表1 冠心病組與正常對照組一肌臨床資料比較(s)

臨床資料 正常對照組(n=31)冠心病組(n=59)P值20/11 36/23年齡(歲)75.85±8.99 73.90±8.39 0.321 BMI(kg/m2)22.32±2.61 24.05±2.92 0.007 SBP(mmHg)132.84±12.55 134.83±14.31 0.515 DBP(mmHg)75.81±7.92 74.81±10.31 0.641 TC(mmol/L)4.20±0.57 4.72±0.86 0.004 TG(mmol/L)1.20±0.48 1.55±0.62 0.006 LDL-C(mmol/L)2.72±0.78 2.85±1.03 0.542 HDL-C(mmol/L)1.20±0.22 1.03±0.23 0.001 ALT(U/L)15.82±6.19 20.74±14.96 0.080 AST(U/L)20.92±4.94 22.76±8.81 0.283 BUN(mmol/L)6.10±1.99 6.16±2.24 0.899 Cr(mmol/L)79.33±30.40 87.58±23.69 0.159 CRP(mg/L)男/女(n)3.66±1.02 7.51±2.30 0.003

2.2 不同組別血漿Omentin-1水平比較 冠心病組血漿Omentin-1水平顯著低于正常對照組〔分別為(717.63±229.11)ng/L、(1 115.49±361.41)ng/L，P=0.000〕。SAP 組、UAP組血漿 Omentin-1水平〔(780.32±273.19)ng/L、(652.81±152.94)ng/L〕與正常對照組比較均顯著下降(P=0.003，P=0.000);UAP組血漿Omentin-1水平與SAP組比較有下降趨勢，但差異無統計學意義(P＞0.05)。心功能Ⅰ級組血漿Omentin-1水平較心功能Ⅱ、Ⅲ級組顯著升高〔分別為(1 033.87±277.84)ng/L、(676.58±137.25)ng/L，P=0.000〕;心功能Ⅰ級組血漿Omentin-1水平較心功能Ⅳ級組顯著升高〔(540.35±59.49)ng/L，P=0.015〕;心功能Ⅱ、Ⅲ級組血漿 Omentin-1水平較心功能Ⅳ級組顯著升高(P=0.000)。

2.3 血漿Omentin-1水平與性別、年齡、BMI、血壓、血脂、CRP、肝腎功能的關系 對冠心病組患者，通過Pearson相關性分析(單因素相關性分析)發現血漿Omentin-1水平與SBP呈顯著負相關(r=－0.26，P＜0.05)，與 HDL-C呈顯著正相關(r=0.271，P＜0.05)，與性別、年齡、BMI、DBP、TC、TG、LDL-C、CRP之間沒有相關性，r及 P 值分別為－0.005，0.967;－0.07，0.599;0.049，0.712;－ 0.026，0.847;0.078，0.555;0.068，0.610;－0.007，0.955;0.007，0.958。

2.4 血漿Omentin-1、內脂素影響因素的多元線性逐步回歸分析 分別以 Omentin-1應變量，以年齡、性別、BMI、SBP、DBP、TC、TG、LDL-C、HDL-C、CRP、ALT、AST、BUN、Cr為自變量進行多元線性逐步回歸分析，按 α=0.05水準，結果示血漿Omentin-1水平可能受HDL-C(P=0.006)水平的影響，回歸方程為 ^Y=240.100+563.067×HDL-C。

3 討論

除傳統的危險因素外，炎癥反應，血栓形成及其相關生物標記物(如CRP，纖維蛋白原，可溶性細胞黏附因子，白細胞介素，脂蛋白，同型半胱氨酸等)均參與了冠心病的發生發展。

Omentin是一種新的抗炎細胞因子，而且抗氧化作用可能是其起抗炎作用的部分機制〔3，4〕。研究發現Omentin mRNA主要在人心外膜和網膜脂肪組織中表達，在皮下和內乳動脈外膜脂肪組織中的表達水平較低，心外膜脂和腸系膜脂肪組織與網膜脂肪組織有著共同的胚胎起源〔6〕。既往研究發現冠心病組血漿 Omentin 水平較正常對照組顯著下降〔7～10〕。也有研究〔7，9〕表明血漿Omentin水平下降為冠心病的獨立危險因素。近來研究〔9〕還發現急性冠脈綜合征(ACS)亞組血清Omentin-1水平較SAP亞組顯著下降。但也有研究〔7〕發現ACS組血漿Omentin水平較SAP組有下降趨勢，而差異無統計學意義。本研究結果進一步提示Omentin可能是一種保護性因素。

Omentin可能通過增加Akt的磷酸化來增強胰島素的敏感性〔11〕，低水平的 Omentin 與胰島素抵抗(IR)的增加有關〔2〕，而IR所致的高胰島素血癥不僅能夠促進肝臟合成TC，又使脂蛋白酶活性降低導致TG分解障礙，TG水平升高使阻礙了極低密度脂蛋白(vLDL)轉變為HDL，使vLDL水平上升，HDL-C降低。近來研究〔2，12〕發現血漿 Omentin-1與HDL-C水平呈正相關，且研究〔12〕證實HDL-C是血清網膜素的獨立相關因素。本研究也表明血漿Omentin-1水平與血清HDL-C水平呈顯著正相關，這和上述研究結果相似，推測Omentin可能通過調節Akt的磷酸化參與了脂質代謝、動脈硬化的發展過程，進一步證實Omentin-1可能是冠心病的“保護因子”。但它的降低能否作為評價冠心病的危險因素指標，尚需大量臨床研究進一步證實。

此外，Duan等〔13〕研究首次發現，在體外Omentin通過激活磷脂酰肌醇-3激酶/絲氨酸-蘇氨酸激酶(PI3K/Akt)信號轉導通路來抑制血管平滑肌細胞鈣化過程中成骨細胞的分化，表明低水平的Omentin是動脈鈣化的危險因素，因此Omentin可能具有抗動脈鈣化的作用。Xie等〔14〕研究發現，在體內Omentin通過調節核因子-κB受體活化因子(RANK)信號轉導通路來改善動脈鈣化和骨丟失。動脈鈣化通常是在動脈硬化的基礎上發生的，主動脈硬化是由多種原因如彈力纖維的退變、AS等導致的主動脈彈性減退，合并有動脈鈣化的血管，其硬化程度相對更嚴重。隨著年齡的增加，大動脈彈性逐漸下降，從而出現SBP升高，DBP下降，脈壓增大，若合并小動脈硬化，則SBP、DBP均升高。本研究發現，血漿Omentin-1水平與SBP呈顯著負相關，即SBP越高，血漿Omentin-1水平越低，其動脈硬化程度越重，而促進心肌缺血、心衰等心血管事件的發生。Shibata等〔15〕在對一組男性冠心病患者的研究支持本研究結果。但目前，對冠狀動脈鈣化認識的觀點尚不統一。有研究認為冠狀動脈鈣化屬“不良”現象，是因為鈣化斑塊的數量大約反映了在冠狀動脈分支中AS區域的總和，然而，決定冠狀動脈預后的因素不僅僅是動脈粥樣硬化數量，而且也與每一斑塊易于破裂的可能性等有關。從某種意義上來說，鈣化可能意味著一種保護作用。因此，Omentin在AS發展過程中是否具有“有益”作用，尚需進一步研究來證實。但由于關于Omentin-1與血壓的關系研究甚少，具體機制還不清楚，有待進一步研究。

研究〔16～18〕發現高水平的 TNF-α 參與了充血性心力衰竭(CHF)的發病機制。Eisw等〔16〕研究發現CHF患者血清TNF-α水平顯著高于對照組，且NYHA分級中Ⅳ級TNF-α水平顯著高于Ⅱ級或Ⅲ級的水平。Lee等〔19〕發現在人類氣管平滑肌細胞(HTSMCs)上，絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)通道、TNF-kB、p300的激活對在TNF-α誘導血管細胞間黏附分子(VCAM)-1的表達中必不可少。Savic-Radojevic等〔18〕研究發現CHF患者的TNF-α、細胞間黏附分子(ICAM)-1、VCAM-1水平較對照組均升高，且在NYHA心功能分級的IV級中升高更顯著。近來研究〔20，21〕發現Omentin可通過抑制 TNF-α 誘導的超氧化物或血管炎癥來發揮抗炎作用。Zhong等〔22〕研究結果發現Omentin可能通過阻斷細胞外信號調節激酶/細胞核轉錄因子-κB(ERK/NF-κB)通道來抑制 TNF-α 介導的 ICAM-1、VCAM-1 的表達。本研究結果表明隨著NYHA分級的升高，血漿Omentin-1水平逐漸降低，提示Omentin-1水平的降低可能與心衰患者的加重有關。從上述研究的結果我們推測Omentin-1可能通過阻斷ERK/NF-κB通路抑制TNF-α的產生及其介導的VCAM-1等炎癥因子的產生，而對冠心病心衰患者起到保護作用。既往研究發現VCAM-1對CHF患者的危險分層和篩選中起著重要作用，并可以用來識別與心衰相關的危險事件，推測Omentin-1或許也可作為心功能分級及心衰篩選的新的客觀指標因子，這將為心衰的治療可能提供了新的方向。

本研究為一個橫斷面研究，僅能夠表明血漿Omentin-1與冠心病有關系，不能夠表明血漿Omentin-1水平的下降是原發性的還是繼發性的;對冠心病的臨床分型及分級的界限沒有客觀指標，以患者的主觀癥狀為主;樣本量偏小，進一步研究尚需擴大樣本量。

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