冠心病患者血清中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白的表達及其臨床意義

賈 方，王彥軍，朱 琳，俞天虹，孫建輝

（常州市第一人民醫院心內科，江蘇常州213003）

冠心病患者血清中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白的表達及其臨床意義

賈 方，王彥軍，朱 琳，俞天虹，孫建輝

（常州市第一人民醫院心內科，江蘇常州213003）

目的：探討冠心病患者血清中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白（neutrophi1 ge1atinase-associated 1ipoca1in，NGAL）的表達及臨床意義。方法：選取因胸悶、胸痛入住心內科患者110例，根據冠脈造影結果及臨床表現分為急性冠脈綜合征（ACS）組33例、穩定型心絞痛（SAP）組32例和對照組45例。比較3組間的臨床資料、血清NGAL水平，分析NGAL與冠心病相關性，并觀察其與冠脈病變支數及Gensini積分的關系。結果：ACS組、SAP組血清NGAL水平均明顯高于對照組（P＜0.05），ACS組血清NGAL水平明顯高于SAP組（P＜0.05）。隨著冠脈病變支數增加，冠心病患者血清NGAL水平增高（F=17.468，P＜0.05），且與Gensini積分呈正相關（r=0.327，P＜0.01）。簡單及偏相關分析均顯示，血清NGAL水平與冠心病呈正相關性；多因素Logistic回歸分析顯示，NGAL是冠心病發生的獨立危險因素（0R=1.059，P＜0.01）。結論：NGAL不僅能對粥樣斑塊穩定性具有提示性，且與冠脈病變程度呈正相關，可作為冠心病發生的獨立危險因素。

中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白；冠心病；斑塊穩定性；Gensini積分

動脈粥樣硬化的慢性炎癥過程是冠心病的病理基礎，而中性粒細胞參與這一炎癥反應。中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白（neutrophi1 ge1atinaseassociated 1ipoca1in，NGAL）被認為是中性粒細胞活化和腎功能衰竭的標志物，并且與胰島素抵抗和動脈粥樣硬化有關［1］。基礎研究表明NGAL能調節炎癥反應，影響基質金屬蛋白酶活性，調節心肌細胞能量代謝，在冠心病的發生發展中起重要作用［2］。本研究擬通過測定不同類型冠心病患者的血清NGAL水平，探討NGAL水平與冠心病之間的關系，為其臨床應用提供理論依據。

1 對象與方法

1.1 病例及分組

選取本院2014年2月至11月因胸悶、胸痛住院并行冠脈造影患者110例，根據臨床表現和冠脈造影結果分為急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）組33例、穩定型心絞痛（stab1e angina pectoris，SAP）組32例和對照組（冠脈造影正常或冠脈狹窄＜50％）45例。同時，將65例冠心病患者根據冠脈造影結果再進一步分為1支病變組（27例）、2支病變組（16例）和3支病變組（22例）。冠心病診斷標準：嚴格按照2012年美國心臟協會/美國心臟病學會（AHA/ACC）關于冠心病的診斷標準篩選病例，并且冠脈造影證實至少有1支冠狀動脈的狹窄≥50％。SAP和ACS診斷標準：均符合美國心臟病學會（ACC）和美國心臟病協會（AHA）的標準。排除標準：感染性疾病、自身免疫性疾病、嚴重心力衰竭、腫瘤及肝腎疾病患者。

1.2 方法

1.2.1 一般資料的收集 所有入選患者均記錄性別、年齡、吸煙史、高血壓病史、糖尿病史，測量身高、體質量，計算體質量指數（BMI）。

1.2.2 血樣采集 入選患者均禁食8～10 h，次日清晨空腹抽取外周靜脈血進行三酰甘油、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、纖維蛋白原（Fg）及C-反應蛋白等指標檢測；同時收集2 mL靜脈血，室溫半小時后4 000 r/min離心3 min，吸取血清置于-80℃冰箱保存直至使用。血清NGAL通過ELISA（丹麥BioPorto公司產品）測定，檢出限為0.1 ng/mL。

1.2.3 冠脈血管病變程度評定 根據美國心臟病協會規定的冠狀動脈血管圖像積分分段評價標準，采用Gensini積分系統［3］對冠脈血管病變程度進行定量評定：狹窄≤25％為1分，26％～50％為2分，51％～75％為4分，76％～90％為8分，91％～99％為16分，100％為32分；將病變部位乘以相應系數：左主干病變×5；左前降支近段×2.5，中段得分× 1.5，遠段得分×1；第一對角支×1；第二對角支× 0.5；左回旋支近段×2.5，中段得分×1.5，遠段和后降支均×1，后側支×0.5；右冠狀動脈近、中、遠段和后降支均×1。將各分支積分相加得出每例患者冠脈病變程度的Gensini積分。

1.3 統計方法

應用SPSS 19.0軟件進行數據分析。符合正態分布的計量資料以±s表示，非正態分布的計量資料以中位數M（Q1，Q3）表示，計數資料以百分比表示。計量資料采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗，方差不齊性采用Kruska1-Wa11is H檢驗，計數資料采用χ2檢驗。兩變量間關系采用Spearman相關分析。二分類因變量回歸分析采用多因素Logistic回歸分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般臨床資料比較

各組間一般臨床資料比較顯示，對照組、SAP組和ACS組年齡、性別、BMI、吸煙、高血壓、糖尿病、三酰甘油、總膽固醇、HDL-C和Fg間差異無統計學意義（P＞0.05）；3組間LDL-C、C反應蛋白和Gensini積分差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

2.2 各組血清NGAL濃度的比較

對照組、SAP組和ACS組血清NGAL濃度分別為（26.92±10.67）ng/mL、（34.05±15.10）ng/mL和（41.72±15.44）ng/mL，3組間總體差異有統計學意義（F=11.372，P＜0.05）；ACS組、SAP組血清NGAL濃度均明顯高于對照組（t值分別為4.759和2.273，P＜0.05），ACS組血清NGAL濃度明顯高于SAP組（t=2.278，P＜0.05）。

2.3 冠脈病變程度與血清NGAL濃度的關系

按冠脈血管病變支數分組分析結果顯示，隨著血管病變支數增加，血清NGAL濃度增加，1支病變組血清NGAL濃度為（28.01±8.85）ng/mL，2支病變組為（38.74±15.09）ng/mL，3支病變組為（49.55±14.73）ng/mL，3組間總體差異有統計學意義（F=17.468，P＜0.05）；3支病變組、2支病變組血清NGAL濃度均明顯高于1支病變組（t值分別為5.904和2.677，P＜0.01），3支病變組血清NGAL濃度明顯高于2支病變組（t=2.590，P＜0. 05）。此外，血清NGAL濃度與Gensini積分呈正相關（r=0.327，P＜0.01）。

表1 各組患者臨床基本資料的比較

2.4 血清NGAL濃度與冠心病發生的簡單及偏相關分析

兩者之間的簡單相關分析顯示，血清NGAL濃度與冠心病發生呈正相關（r=0.361，P＜0.05）；并且在控制性別、年齡、高血壓、BMI、糖尿病、吸煙、三酰甘油、總膽固醇、LDL-C、HDL-C、Fg、C反應蛋白等入選因素后，兩者之間仍具有正相關性（r=0.293，P＜0.05）。

2.5 多因素Logistic回歸分析

以冠心病是否發生（1=是，0=否）為因變量，年齡、性別、BMI、吸煙、高血壓、糖尿病、三酰甘油、總膽固醇、HDL-C、LDL-C、Fg、C反應蛋白和NGAL為自變量，進行Logistic回歸分析。結果顯示NGAL可能是冠心病發生的獨立危險因素（0R=1.059，P＜0.01）。見表5。

表5 冠心病多重危險因素Logistic回歸分析

3 討論

炎癥參與介導了動脈粥樣硬化的發生和發展。急性冠脈綜合征的發生與斑塊的不穩定性和血栓形成密切相關，而炎癥反應在不穩定斑塊的形成、演變過程中具有至關重要的作用。研究表明NGAL可能在炎癥方面起調節作用［4］。NGAL正常表達于中性粒細胞、肝實質細胞、腎小管上皮細胞、血管內皮細胞、平滑肌細胞等。血清NGAL水平增加與動脈粥樣硬化、腦卒中、腎衰竭等系統性炎癥反應相關。Hemdah1等［5］通過低氧誘導動脈粥樣硬化模型，發現NGAL在動脈粥樣硬化斑塊尤其是高蛋白水解活性區域表達升高，表明NGAL可能對斑塊的發生、發展和斑塊的不穩定性具有重要作用。Soy1u等［6］對47例非ST段抬高型急性冠脈綜合征（NSTE-ACS）患者入院時的血清NGAL以及冠脈造影結果進行統計分析，發現與造影結果正常的對照組相比，NSTEACS患者血清NGAL水平與Gensini積分以及危險分層評估（Grace評分）呈正相關。在本研究中，我們對比了冠心病不同亞組（ACS組和SAP組）和對照組患者血清中NGAL濃度，結果發現ACS組血清NGAL水平較SAP組和對照組明顯升高，表明NGAL對粥樣斑塊不穩定性有一定的提示性。

NGAL對粥樣斑塊穩定性的影響主要與其對MMP-9活性的調節有關。粥樣斑塊結構的突然改變如斑塊內出血、低氧狀態等可誘導MMP-9表達的上調，現已證實，MMP-9是造成斑塊不穩定的主要酶，是影響斑塊穩定性的主要因素［7］。NGAL能以二硫鍵與MMP-9結合，降低金屬蛋白酶抑制劑1（TIMP-1）的抑制作用，防止MMP-9被降解，延長其蛋白水解時間，使斑塊內膠原分解過多［8］。NGAL、MMP-9的表達和形成復合物的調節影響細胞外基質的降解，繼而影響纖維帽的穩定性。持續的血管損傷、炎性刺激以及應激導致NGAL的大量表達［1］，使MMP-9的活性增強，造成斑塊不穩定性增加，從而導致不穩定心絞痛或心肌梗死等急性心血管事件的發生。

本研究中，我們還將冠心病患者按冠脈病變受累支數分組，發現隨著病變支數增加，血清NGAL濃度也相應增加，并且NGAL與評價冠脈病變程度的指標Gensini積分呈正相關。由此，我們可以認為NGAL不僅能對冠心病患者粥樣斑塊穩定性具有提示性，且與冠脈病變的嚴重程度呈正相關。Cheng等［9］對768例因急性冠脈綜合征或穩定型心絞痛行冠脈介入診療患者的一項隨訪研究發現，血漿NGAL/MMP-9水平與主要心血管不良事件呈正相關。Danie1s等［10］對1 393名無心血管疾病病史的社區居民進行平均11年的隨訪，結果表明NGAL水平與高致死率和高風險的心血管事件明顯相關，并且獨立于其他傳統的心血管疾病危險因素以及患者腎功能狀態。我們的研究對NGAL與冠心病的簡單和偏相關分析，均發現NGAL與冠心病發生密切相關；以冠心病發生為因變量，年齡、性別、吸煙、高血壓、糖尿病、BMI、三酰甘油、總膽固醇、HDL-C、LDLC、Fg、C反應蛋白和NGAL為自變量，行多因素Logistic回歸分析，結果顯示血清NGAL水平是冠心病發生的獨立危險因素。NGAL在心血管疾病發生發展過程中起著復雜的調節作用。現有實驗研究趨于支持NGAL具有負性調節炎癥細胞介導的免疫反應、穩定細胞能量代謝的功能［11-12］；而由于炎癥持續存在，NGAL和MMP-9復合物形成，可使膠原分解過多，引起斑塊的不穩定［8］。然而現有NGAL在心血管疾病發生發展中作用機制的研究仍較少，NGAL的功能與活性尚有待進一步證實。

綜上所述，血清NGAL水平與冠脈粥樣斑塊穩定性以及冠脈病變程度密切相關，且獨立于其他傳統的心血管疾病危險因素與冠心病發生呈正相關，可作為臨床冠心病以及高危患者病情評估和預測斑塊不穩定性的一個重要指標。

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Expression of serum NGAL in coronary heart disease patients and its clinical significance

JIA Fang，WANG Yan-jun，ZHU Lin，YU Tian-hong，SUN Jian-hui
（Department of Cardio1ogy，the First Peop1e′s Hospita1 of Changzhou，Changzhou Jiangsu 213003，China）

Objective：To investigate the expression of serum neutrophi1 ge1atinase-associated 1ipoca1in（NGAL）in patients with coronary heart disease（CHD），and to eva1uate its c1inica1 va1ue.Methods：A tota1 of 110 enro11ed patients were divided into acute coronary syndrome（ACS）group（33 cases），stab1e angina pectoris（SAP）group（32 cases）and contro1 group（45 cases）according to the c1inica1 manifestation and angiographic resu1ts.Serum NGAL 1eve1s measured by enzyme 1inked immunosorbent assay（ELISA）were compared among the groups.The corre1ation between serum NGAL 1eve1 and CHD was ana-1yzed.The association of NGAL with the number of diseased vesse1s and Gensini score were studied.Results：The serum NGAL 1eve1s in ACS group and SAP group were higher than that in contro1 group（P＜0.05）.And serum NGAL 1eve1 was significant1y higher in ACS group compared to SAP group（P＜0.05）. Statistica11y significant corre1ations were observed between NGAL 1eve1 and the number of diseased vesse1s（F=17.468，P＜0.05）and Gensini score（r=0.327，P＜0.01）. Simp1e and partia1 corre1ation ana1ysis showed that serum NGAL 1eve1 was positive1y corre1ated with CHD.In addition，mu1tivariate 1ogistic regression ana1ysis revea1ed that NGAL was an independent risk factor of CHD（0R=1.059，P＜0.01）. Conclusion：Serum NGAL 1eve1 was positive1y corre1ated with atherosc1erotic p1aque stabi1ity and coronary 1esions severity in patients with CHD.NGAL may serve as an independent risk factor of CHD.

neutrophi1 ge1atinase-associated 1ipoca1in；coronary heart disease；p1aque stabi1ity；Gensini score

R541.4

A

1671-7783（2015）06-0508-04

10.13312/j.issn.1671-7783.y150181

2015-08-14 ［編輯］ 何承志

賈方（1984—），女，河南平頂山人，主治醫師，博士，主要從事動脈粥樣硬化性疾病病理生理學機制及干預治療研究。