培氟沙星對鰱、鳙魚的急性毒性試驗

劉慧吉++劉艷輝++李改娟++祖岫杰

摘要 研究了培氟沙星對白鰱和鳙魚的急性毒性，在室內(nèi)水簇箱，水溫控制在（22±1）℃，以平均體重（2±0.1）g白鰱和平均體重（2±0.1）g鳙魚為試驗對象，采用改進寇氏法計算試驗白鰱和鳙魚的半數(shù)致死濃度（LC50）和安全濃度（SC）。結(jié)果表明：培氟沙星對白鰱48 h的LC50為384.6 mg/L，SC為98.3 mg/L，對鳙魚48 h的LC50為436.5 mg/L，SC為114.1 mg/L。該研究為培氟沙星在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應(yīng)用提供了理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞 培氟沙星；白鰱；鳙魚；急性毒性；半致死濃度；安全濃度

中圖分類號 S941.91 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2015）18-0268-02

作為第3代喹諾酮類藥物，培氟沙星高效、低毒，不易產(chǎn)生耐藥性，比第一、二代喹諾酮類的抗菌譜廣，抗菌活性明顯增強，是當(dāng)今唯一能抑制細菌DNA 促旋酶的藥物[1-2]。培氟沙星吸收良好，半衰期長，生物利用度高，可進入如心肌、腦脊液及骨組織，又稱長效沙星[1，3]。魚類急性毒性試驗一般是測定24、48、96 h的LC50值。但是由于培氟沙星對鰱、鳙魚的毒性研究未見報道，對其進行急性毒性初步研究很有必要。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗用魚。試驗用鰱、鳙魚選自前郭縣庫里漁場，鰱魚苗平均體重1.3 g，體長4.0～4.5 cm，魚苗規(guī)格整齊，魚體健康，鱗片完整，游動活潑，無畸形。魚苗室內(nèi)水簇箱暫養(yǎng)1周備用。暫養(yǎng)期間準確記錄魚苗死亡情況，死亡率小于5%，符合急性試驗標準[4]后進行預(yù)備性試驗和正式試驗。

1.1.2 供試藥物。試驗藥物為甲黃酸培氟沙星，純度99.9%，批號20120812。試驗前將試驗藥物配成一定濃度的母液，正式試驗時按適當(dāng)比例稀釋為所需濃度，試驗魚苗從低濃度向高濃度逐漸放入[1]。

1.1.3 試驗條件。試驗用水為經(jīng)過濾消毒后充氧24 h以上的自來水，試驗期間水溫為（22±1）℃，DO>5 mg/L，pH值7.2。試驗容器為長方體玻璃水簇箱，容積為20 L，加試驗液15 L。

1.2 試驗方法

試驗前先進行24 h的預(yù)試驗，確定0～100%死亡的藥物濃度范圍[5-6]。正式試驗按照改良寇氏法進行，設(shè)置6個濃度梯度（218.8、275.4、346.7、436.5、549.5、691.8 mg/L），以空白作對照（CK），每個濃度設(shè)2個平行組，取平均值。試驗開始后連續(xù)觀察中毒癥狀、死亡時間、數(shù)量，并及時用吸管撈出死魚，記錄24、48 h各濃度魚苗的存活和死亡情況。試驗期間不投餌，每24 h更換1次試驗液，換水量100%[1]。死魚的判斷標準：鰓蓋完全停止活動，用玻璃棒輕輕刺激魚體5 min無反應(yīng)[7-8]。

根據(jù)試驗結(jié)果，采用改良寇氏法計算得出培氟沙星對鰱、鳙魚24、48 h的半數(shù)致死濃度（LC50）[9]和安全濃度（SC）[7]，計算公式如下：

LC50=log-1[Xm-d（∑p-0.5）]

SC=48 h LC50×0.3/（24 h LC50/48 h LC50）2

式中，Xm為最大死亡率組劑量對數(shù)；d為組間距（相鄰2組劑量對數(shù)值之差）；p為各組死亡率，∑p為各組死亡率總和[1]。

2 結(jié)果與分析

急性毒性試驗結(jié)果表明（表1），白鰱、鳙魚對培氟沙星均較不敏感，但因魚的種類不同其敏感程度也有一定差異。白鰱在藥物濃度275.4 mg/L時即發(fā)生死亡，藥物濃度691.8 mg/L時死亡率為100%；而鳙魚在藥物濃度346.7 mg/L時才開始死亡，藥物濃度691.8 mg/L時全部死亡。雖然全部死亡的濃度相同，但鳙魚開始死亡的藥物濃度遠大于白鰱，說明鳙魚對培氟沙星的耐受性比白鰱強。白鰱、鳙魚的24 h和48 h半數(shù)致死濃度（LC50）分別為416.7、467.7 mg/L和384.6、436.5 mg/L，安全濃度分別為98.3、114.1 mg/L。

3 結(jié)論與討論

培氟沙星除具有廣譜、高效、低毒、吸收快等特點外，對致病菌嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌的抑制和殺滅效果較好，對這2種菌的最小抑菌濃度、最小殺菌濃度分別為0.009、0.018 μg/mL[11-12]。培氟沙星的抑菌和殺菌效果分別是氟苯尼考、左氧氟沙星、慶大霉素的1 000倍以上、100倍以上、近300倍[10]。該試驗結(jié)果表明：培氟沙星對白鰱48 h的LC50為384.6 mg/L，SC為98.3 mg/L，對鳙魚48 h的LC50為436.5 mg/L，SC為114.1 mg/L。因此，培氟沙星防治魚類細菌性疾病可以放心使用[13-14]。

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