RCAS1和CD105在胸腔積液中的表達(dá)及臨床意義

楊 榮李小芬黃 昕陳春霞江 亮黃 碧

1.廣東省湛江市結(jié)核病防治所結(jié)核病科，廣東湛江 524008；2.廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤中心，廣東湛江 524001

RCAS1和CD105在胸腔積液中的表達(dá)及臨床意義

楊 榮1李小芬1黃 昕2陳春霞1江 亮2黃 碧1

1.廣東省湛江市結(jié)核病防治所結(jié)核病科，廣東湛江 524008；2.廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤中心，廣東湛江 524001

目的 研究癌性胸水和結(jié)核性胸水患者血清及胸水中SiSo細(xì)胞表達(dá)的受體結(jié)合腫瘤抗原 （RCAS1）和CD105的表達(dá)水平和臨床意義。 方法 根據(jù)病理類型將76例胸腔積液患者分為惡性胸腔積液（癌性組）40例和結(jié)核性胸腔積液患者（結(jié)核組）36例，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELISA）分別對兩組血清及胸水中的RCAS1和CD105的水平進(jìn)行檢測，比較兩組血清和胸水中RCAS1和CD105表達(dá)水平的差異以及兩者與臨床之間的關(guān)系。 結(jié)果 40例惡性胸腔積液（癌性組）血清及胸水中RCAS1和CD105表達(dá)水平均高于36例結(jié)核性胸腔積液患者（結(jié)核組），癌性胸腔積液患者和結(jié)核性胸腔積液患者血清中RCAS1水平分別為（36.1988±5.6195） U/mL和（13.6022±3.2608）U/mL，癌性胸腔積液患者和結(jié)核性胸腔積液患者血清中CD105的水平分別為（6.2090±0.2608）μg/L和 （5.1536±0.1872） μg/L，癌性胸腔積液患者和結(jié)核性胸腔積液患者胸水中RCAS1水平分別為（50.3008±5.3298） U/mL和（21.1433±3.1365） U/mL，癌性胸腔積液患者和結(jié)核性胸腔積液患者胸水中CD105 的水平分別為（4.1133±0.1695） μg/L和 （3.2492±0.1305） μg/L，兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。 結(jié)論 監(jiān)測胸腔積液患者血清和胸水中RCAS1和CD105 的表達(dá)水平對惡性胸腔積液和結(jié)核性胸腔積液的鑒別診斷有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

RCAS1；CD105；胸腔積液

胸腔積液是由于局部或全身病變而引起胸膜腔液體濾過及吸收不平衡，導(dǎo)致其形成過快或吸收過慢形成，胸腔積液病因復(fù)雜多樣，臨床中以結(jié)核及惡性腫瘤引起的胸腔積液為大多數(shù)，兩者不易鑒別，不同性質(zhì)的胸腔積液治療方法截然不同，患者的預(yù)后相差亦甚大，目前主要依據(jù)胸膜組織病理活檢、胸水脫落細(xì)胞學(xué)等檢查確診，但敏感性不高，陽性率較低，臨床上大約有 20%～30%的胸腔積液患者雖然已經(jīng)過全面檢查，仍然難于給予確診，探討判斷胸腔積液良惡性的有效檢查方法，已成為臨床關(guān)注的熱點(diǎn)[1-2]；SiSo細(xì)胞表達(dá)的受體結(jié)合腫瘤抗 原 （receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells，RCAS1）是一種腫瘤的相關(guān)抗原，是存在于癌癥細(xì)胞中的一種抗原因子，一般情況下在癌癥細(xì)胞中有較高的表達(dá)，同時(shí)，RCAS1 蛋白具有特殊的分子結(jié)構(gòu)，使得其具有較強(qiáng)的分泌功能，研究發(fā)現(xiàn)RCAS1在多種腫瘤細(xì)胞膜上呈高表達(dá)，RCAS1表達(dá)與腫瘤的分化、侵襲、凋亡和惡性程度密切相關(guān)[3-4]；CD105又稱為Endoglin，研究表明CD105由腫瘤組織及其轉(zhuǎn)移灶中新生血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，是腫瘤血管生成的標(biāo)志物[5-6]；本研究通過檢測不同性質(zhì)的胸腔積液患者血清及積液中RCAS1和CD105的表達(dá)水平，以期為胸腔積液性質(zhì)的鑒別提供新的方法和思路。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2009年3月～2013年7月36例結(jié)核性胸腔積液患者（結(jié)核組），其中男25例，女11例，中位年齡45歲，經(jīng)臨床確診為結(jié)核性胸膜炎，予以抗結(jié)核治療后已治愈。40例同期惡性胸腔積液（癌性組），入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）初治患者，首次發(fā)現(xiàn)胸腔積液；（2）既往未行手術(shù)、放化療、內(nèi)分泌治療或基因靶向治療；（3）經(jīng)胸水細(xì)胞學(xué)、穿刺活檢或術(shù)后病理組織學(xué)等檢查確診；（4）排除嚴(yán)重心臟疾病或低蛋白血癥引起的胸腔積液；其中男27例，女13例，中位年齡46歲。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

早晨空腹時(shí)抽取靜脈血3mL，室溫下靜置3.5h后，3000r/min離心10min，分離出血清1.5mL，同時(shí)收集同一患者胸腔積液20mL，離心取上清液，放入-70℃冰箱保存，成批量采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELISA）檢測RCAS1和CD105水平，檢測試劑盒購自日本MBL公司，由專人按說明書要求嚴(yán)格進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，RCAS1和CD105的測定數(shù)據(jù)用表示，采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1兩組患者血清中RCAS1水平比較

36例結(jié)核性胸腔積液患者（結(jié)核組）患者與40例惡性胸腔積液（癌性組）之間血清中RCAS1水平比較：癌性組患者和結(jié)核組血清RCAS1水平分別為（36.1988±5.6195）U/mL、（13.6022±3.2608）U/mL，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=21.1286，P＜0.01）；提示惡性胸腔積液患者血清RCAS1水平明顯高于結(jié)核性胸腔積液患者血清RCAS1水平。見表1。

2.2兩組患者血清中CD105水平比較

36例結(jié)核性胸腔積液患者（結(jié)核組）患者與40例惡性胸腔積液（癌性組）之間血清中CD105水平比較：癌性組患者和結(jié)核組血清CD105水平分

表1　兩組患者之間血清中RCAS1水平比較

表1　兩組患者之間血清中RCAS1水平比較

注：兩組血清中RCAS1水平比較，t=21.1286，P＜0.01

組別　n　　血清中RCAS1水平癌性組結(jié)核組36.1988±5.6195 13.6022±3.2608 40 36

別為（6.2090±0.2608）μg/L、（5.1536±0.1872） μg/L，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=20.0642，P＜0.01）；提示惡性胸腔積液患者血清CD105水平明顯高于結(jié)核性胸腔積液患者血清CD105水平。見表2。2.3 兩組患者胸水中RCAS1水平比較

表2　兩組患者之間血清中CD105水平比較

表2　兩組患者之間血清中CD105水平比較

注：兩組血清中CD105水平比較，t=20.0642，P＜0.01

癌性組結(jié)核組6.2090±0.2608 5.1536±0.1872 40 36

36例結(jié)核性胸腔積液患者（結(jié)核組）患者與40例惡性胸腔積液（癌性組）之間胸水中RCAS1水平比較：癌性組患者和結(jié)核組胸水中RCAS1水平分別為（50.3008±5.3298）U/mL、（21.1433±3.1365）U/mL，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=28.6501，P＜0.01）；提示惡性胸腔積液患者胸水中RCAS1水平明顯高于結(jié)核性胸腔積液患者胸水中RCAS1水平。見表3。

表3　兩組患者之間胸水中RCAS1水平比較

表3　兩組患者之間胸水中RCAS1水平比較

注：兩組胸水中RCAS1水平比較，t= 28.6501，P＜0.01

組別　n　　胸水中RCAS1水平癌性組結(jié)核組50.3008±5.3298 21.1433±3.1365 40 36

2.4兩組患者胸水中CD105水平比較

36例結(jié)核性胸腔積液患者（結(jié)核組）患者與40例惡性胸腔積液（癌性組）之間胸水中CD105水平比較：癌性組患者和結(jié)核組胸水中CD105水平分別為（4.1133±0.1695）μg/L、（3.2492±0.1305）μg/L，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=24.6984，P＜0.01）；提示惡性胸腔積液患者胸水中CD105水平明顯高于結(jié)核性胸腔積液患者胸水中CD105水平。見表4。

3　討論

RCAS1蛋白為40kD的II型跨膜蛋白，由213個(gè)氨基酸組成，通過C端部分卷曲螺旋結(jié)構(gòu)形成同源寡聚體，研究發(fā)現(xiàn)RCAS1還以可溶性形式存在，并且真正能發(fā)揮其生物學(xué)功能的可能是其可溶性蛋白，研究表明RCAS1可誘導(dǎo)外周免疫細(xì)胞生長抑制、凋亡，腫瘤新生血管形成及結(jié)締組織重塑，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)移及逃避機(jī)體免疫監(jiān)測[7-8]；Sonoda等[9]應(yīng)用ELISA檢測75例正常對照組、36例良性卵巢腫瘤患者和61例卵巢癌患者血清RCAS1水平，研究發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者血清RCAS1水平明顯高于良性卵巢腫瘤患者和正常對照組血清RCAS1水平，提示血清RCAS1可能是卵巢癌生物學(xué)標(biāo)記物，其作用是通過抑制免疫的治療效果；RCAS1可通過促進(jìn)誘導(dǎo)腫瘤間質(zhì)重塑及促進(jìn)腫瘤新生血管形成，繼而促進(jìn)血管通透性升高，顯著增加胸膜間皮層的通透性，從而形成胸腔積液；Aoe等[10-11]報(bào)道胸腔積液中RCAS1濃度的檢測對鑒別良惡性胸腔積液具有一定的價(jià)值，惡性胸腔積液中RCAS1濃度顯著高于良性胸腔積液。

表4　兩組患者與40例癌性組患者之間胸水中CD105水平比較

表4　兩組患者與40例癌性組患者之間胸水中CD105水平比較

注：兩組胸水中CD105水平比較，t=24.6984，P＜0.01

組別　n　　胸水中CD105水平癌性組結(jié)核組4.1133±0.1695 3.2492±0.1305 40 36

腫瘤血管新生是導(dǎo)致腫瘤發(fā)生、進(jìn)展、浸潤和轉(zhuǎn)移的重要因素，為腫瘤組織的增殖提供了良好的條件[12-13]；CD105在大血管及小血管的內(nèi)皮細(xì)胞中呈高度表達(dá)，在有血管生成的組織，如愈合中的傷口、銀屑病、胚胎組織及腫瘤組織的內(nèi)皮細(xì)胞中呈特異性高表達(dá)，是內(nèi)皮細(xì)胞增殖的相關(guān)標(biāo)記物[14]；Kopczyńska等[15]研究發(fā)現(xiàn)， 37例Ⅰ期非小細(xì)胞肺癌患者手術(shù)后7d血漿可溶性Endoglin水平明顯低于手術(shù)前，而在隨后的30d又逐漸升高，提示血漿可溶性Endoglin 水平可作為非小細(xì)胞肺癌潛在的腫瘤標(biāo)志物；隨著腫瘤的發(fā)展，CD105水平亦呈逐漸增高之勢，CD105可通過促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增生，誘導(dǎo)血管的生成和促進(jìn)小靜脈、微靜脈通透性升高，使胸膜間皮層的通透性顯著增加，促使胸液的吸收少于生成，從而形成胸腔積液。

本研究通過對36例結(jié)核性胸腔積液患者患者與40例惡性胸腔積液患者的血清和胸水中RCAS1和CD105水平的監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)惡性胸腔積液患者血清和胸水中RCAS1和CD105的水平均明顯高于結(jié)核性胸腔積液患者，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），綜合以上得知RCAS1和CD105 在惡性及結(jié)核性胸腔積液血清和胸水中表達(dá)水平有明顯的差異性，監(jiān)測胸腔積液患者血清和胸水中RCAS1和CD105 的表達(dá)水平對惡性胸腔積液和結(jié)核性胸腔積液的鑒別診斷有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

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Expression of RCAS1 and CD105 in pleural effusion and clinical significance

YANG Rong1LI Xiaofen1HUANG Xin2CHEN Chunxia1JIANG Liang2HUANG Bi1
1.Department of Tuberculosis, Zhanjiang Tuberculosis Protective and Treatment Institution, Zhanjiang 524008, China;
2.Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524001, China

Objective To study the expression and clinical significance of receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells (RCAS1) and CD105 in different types of pleural effusion. Methods 76 cases of patients with pleural effusion were divided into malignant pleural effusion group (40 cases) and tuberculous pleural effusion group (36 cases) according to the pathological type. The level of RCAS1 and CD105 concentrations of serum and pleural fluid from patients with malignant pleural effusion and tuberculous pleural effusion were measured by the enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), the difference were analysed. Results The level of serum RCAS1 (36.1988±5.6195) U/mL and CD105 (6.2090±0.2608)μg/L of patients with malignant pleural effusion were higher than that of tuberculous pleural effusion[(13.6022±3.2608) U/mL, (5.1536±0.1872) μg/L]. The level of pleural effusion RCAS1(50.3008±5.3298) U/mL and CD105 (4.1133±0.1695) μg/L of patients with malignant pleural effusion were higher than that of tuberculous pleural effusion[(21.1433±3.1365) U/ml, (3.2492±0.1305) μg/L] (P＜0.01). Conclusion Examination of RCAS1 and CD105 in serum and pleural fluid has a certain clinical application value in differential diagnosis of patients with tuberculous pleurisy and malignant pleurisy.

RCAS1; Osteopontin; Pleural effusion

R561.3

A

2095-0616（2015）09-20-04

（2015-01-23）