麥冬提取物中總黃酮的含量測定

魏 明

河南省寧陵縣中醫院傳染科，河南寧陵 476700

麥冬提取物中總黃酮的含量測定

魏 明

河南省寧陵縣中醫院傳染科，河南寧陵 476700

目的 建立麥冬中總黃酮的含量測定方法。 方法 采用紫外分光光度法，以橙皮苷為對照品，在283nm對麥冬總黃酮進行含量測定。 結果 橙皮苷在 3.1～18.6μg/mL范圍內線性關系良好，R2=0.9992，平均回收率為99.69%，RSD 為0.87% 。所測3批麥冬中總黃酮的平均含量分別為4.19%（RSD=1.85%）、4.31%（RSD=2.16%）、4.26%（RSD=2.39%）。 結論 所建立的麥冬總黃酮測定方法操作簡便，結果快速、準確、重復性好，可作為麥冬總黃酮含量測定方法。

麥冬；總黃酮；紫外分光光度法；含量測定

麥冬為百合科植物麥冬Ophiopogon japonicus（L.f） Ker-Gawl.的干燥塊根。其味甘、微苦，性微寒，歸心、肺、胃經[1]，具有養陰生津，清心潤肺的功效。麥冬主要化學成分為甾體皂苷、黃酮、多糖等。現代藥理學表明，麥冬具有抗心肌缺血、降血糖、抗衰老、抑制腫瘤、免疫調節、耐缺氧等活性[2-7]。麥冬中黃酮類成分主要為高異黃酮，具有良好的抗自由基、抗氧化、抗炎、抗應激、抗組胺、心血管保護功能和磷酸化抑制等作用[8]。本研究對麥冬中總黃酮進行了含量測定，為進一步開發利用這一藥材資源和對該藥材進行質量控制提供了參考。

1　儀器與試藥

1.1儀器

JHBE-50閃式提取器（河南金鼎科技發展有限公司）；XS105型電子分析天平（瑞士梅特勒儀器有限公司）；SHE-D（III）循環水式真空泵（鞏義市予華儀器有限責任公司）；數顯電熱恒溫水浴鍋（常州國華電器有限公司）；KH2200DB型超聲波清洗器（江蘇省昆山市超聲儀器有限公司）；UV-7540紫外-可見分光光度計（上海精科實業有限公司）。

1.2試藥

橙皮苷對照品（批號：110721-201014）購于中國藥品生物制品檢定所；麥冬藥材購于張仲景大藥房，經鑒定為百合科植物麥冬Ophiopogon japonicus（L.f）的干燥塊根；甲醇、乙醇、乙醚等均為分析純；水為超純水。

2　方法與結果

2.1麥冬總黃酮粗粉的制備

取麥冬飲片，加6倍量75%乙醇于閃式提取器提取2次，每次8min，提取液過濾，濾液濃縮至無醇味，浸膏加水混懸，冷凍干燥，即得麥冬總黃酮粗粉。

2.2對照品溶液的制備

稱取干燥至恒重的橙皮苷對照品約3mg，精密稱定，置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并補充至刻度，搖勻，即得（濃度為0.31mg/mL）。

2.3供試品溶液的制備

稱取麥冬總黃酮粗粉5mg，精密稱定，加甲醇溶解并定容于10mL的容量瓶中，搖勻。用0.45μm微孔濾膜過濾，即得供試品溶液。

表1　麥冬總黃酮加樣回收率試驗結果（n=9）

2.4最大吸收波長的選擇

精密吸取對照品溶液和供試品溶液1.0mL，置于10mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。以相應試劑為空白對照，取稀釋后的對照品溶液和供試品溶液在波長200 ～ 400nm范圍內掃描，結果顯示供試品與對照品在283nm附近均有最大吸收峰，故確定測定波長為283nm。

2.5標準曲線的制備

精密吸取對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.5、0.6、0.8mL，分別置于10mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。以不含對照品溶液作為空白，采用紫外分光光度法，在283nm處測定其吸收度，以吸光度A對對照品濃度C（μg/mL）進行線性回歸，得回歸方程為：A=0.029C-0.005（R2=0.9992），表明橙皮苷在3.1～18.6μg/mL范圍內呈良好的線性關系。

2.6精密度試驗

精密量取對照品溶液1.0mL，按標準曲線制備項下方法操作，于283nm波長處連續測定吸光度6次，RSD為1.30%，說明精密度良好。

2.7穩定性試驗

取供試品溶液，按標準曲線制備項下方法操作，分別在0、30、60、90、120、180、240min測定吸光度，RSD為1.33%，結果顯示供試品溶液在240min內其吸光度基本穩定。

2.8重復性試驗

平行稱取麥冬總黃酮粗粉5mg共6份，按“2.3”項下制備供試品溶液，按標準曲線制備項下方法操作，結果麥冬總黃酮含量的RSD為1.44%，說明重復性符合含量測定的要求。

2.9加樣回收率試驗

稱取已知含量的同一批樣品9份，精密稱定，分別精密加入不同量的對照品溶液，按供試品溶液制備方法制備，測定，計算回收率，平均回收率為99.69%，RSD為0.87%，結果見表1。

2.10樣品含量測定

精密稱取3批麥冬總黃酮粗粉各2.5mg（各5份），按“2.3”項下方法制備供試品溶液，照標準曲線制備項下操作。以不含供試品溶液為空白，測定吸收度，代入標準曲線。計算樣品中總黃酮的平均含量分別為4.19%（RSD=1.85%）、4.31%（RSD=2.16%）、4.26%（RSD=2.39%）。

3　討論

本實驗采用紫外分光光度法對麥冬總黃酮進行測定，以橙皮苷標準品為對照品，經全波長掃描確定其最大吸收波長為283nm。總黃酮在檢測濃度范圍內線性良好，回收率符合要求。紫外可見分光光度法測定麥冬中總黃酮，具有準確、簡便的特點，為中藥麥冬的定量分析和品質評價及含量測定提供了快速、準確、有效的分析方法。黃酮類化合物的提取方法有水提法、有機溶劑提取法、超聲波法、超濾法、超臨界提取法、微波法等[9-13]。本研究采用閃式提取方法提取麥冬總黃酮，具有操作迅速、提取完全等特點。且含量測定過程不需要顯色，操作簡便、穩定性好，為從麥冬中提取總黃酮提供了簡便的實驗方法。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京：中國醫藥科技出版社，2010：144-145.

[2] 程金波，衛洪昌，章忱，等.麥冬提取物抗犬心肌缺血的藥效學實驗研究[J].中國病理生理雜志，2001，17（8）：810.

[3] 黃琦，許家鸞.麥冬多糖對2型糖尿病血糖及胰島素抵抗的影響[J].浙江中西醫結合雜志，2002，12（2）：81-82.

[4] 陶站華，白書閣，白晶.麥冬對D半乳糖衰老模型大鼠的抗衰老作用研究[J].黑龍江醫藥科學，1999，22（4）：36-37.

[5] 岳珊珊，蘇穎.麥冬抗腫瘤作用的研究進展[J].海峽藥學，2014，26（1）：11-13.

[6] 蔣鳳榮，張旭，范俊，等.麥冬藥理作用研究進展[J].中醫藥學刊，2006，24（2）：236-237.

[7] 李秀挺，廖惠芳，李學慧，等.麥冬三種粗提物對耐缺氧及心血管系統藥理作用的研究[J].廣州中醫學院學報，1985，2（1）：39-45.

[8] 江洪波，黃靜，郭明娟，等.天然高異黃酮的研究進展[J].藥學學報，2007，42（2）：118-126.

[9] 趙子龍，薛培鳳，倪佩東，等.天然藥物中總黃酮的提取工藝研究進展[J].內蒙古醫學院學報，2012，34（6）：512-516.

[10] 雷雪梅，鄭玉蘭，蘭衛，等.策勒縣有機山藥總黃酮含量測定[J].新疆醫科大學學報，2015，15（2）：184-186.

[11] 劉曉丹，張克勤，劉連，等.烏腺金絲桃愈傷組織中總黃酮及金絲桃素含量測定[J].生物技術通報，2015，17（1）：98-103.

[12] 匡菊香，安丹丹.舌蓮胃康膠囊總黃酮的含量測定[J].遵義醫學院學報，2014，37（5）：504-507.

[13] 溫愛平，張秀艷，鄔衛東，等.蒙藥參竹精片中總黃酮的含量測定[J].中國醫藥導報，2014,11（32）：87-90.

Content determination of total flavonoids in radix ophiopogonis extracts

WEI Ming
Department of Contagious, Ningling County TCM Hospital, Ningling 476700, China

Objective To establish the determination methods of total flavonoids in Radix Ophiopogonis extracts. Methods To determine the total flavonoids in Radix Ophiopogonis extracts in UV of 283nm adopt UV spectrophotometry and use hesperidin as control sample. Results The linear relationship of hesperidin in (3.1～18.6) μg/mL was better, R2=0.9992, the average recovery rate was 99.69%, RSD was 0.87%. The average content of total flavonoids of the 3 batchs of Radix Ophiopogonis were 4.19%（RSD=1.85%）, 4.31%（RSD=2.16%）, 4.26%（RSD=2.39%）. Conclusion The determination methods of total flavonoids in Radix Ophiopogonis has simple operation, has fast and accurate result, has good reproducibility, could be used as the determination methods of total flavonoids in Radix Ophiopogonis.

Radix ophiopogonis; Total flavonoids; UV spectrophotometry; Content determination

R284.2

B

2095-0616（2015）09-58-03

（2015-02-02）