厄貝沙坦緩釋微丸的制備及體外釋藥特性的考察

葉星辰 呂竹芬 陳燕忠

廣東藥學院藥物研究所 廣東省藥物新劑型重點實驗室，廣東廣州510006

厄貝沙坦緩釋微丸的制備及體外釋藥特性的考察

葉星辰 呂竹芬 陳燕忠▲

廣東藥學院藥物研究所 廣東省藥物新劑型重點實驗室，廣東廣州510006

目的 制備厄貝沙坦緩釋微丸，并對其體外釋放度進行考察。 方法 采用流化床包衣技術，以丙烯酸樹脂類Eudragit NE30D和Eudragit L30D-55混合水分散體為包衣材料，制備緩釋微丸。考察不同釋放介質﹑轉速對其體外釋藥行為的影響。 結果 優化后的包衣處方為Eudragit NE30D/Eudragit L30D-55的比例為4︰1，抗粘劑和致孔劑的用量分別為聚合物干重的75%及20%，增重10%，熟化24h，釋放介質的pH值對微丸釋藥的影響最明顯，其體外釋藥過程符合一級釋藥模型。 結論 成功制備了厄貝沙坦緩釋微丸，經考察其釋放度符合要求。

厄貝沙坦；緩釋微丸；體外釋放

高血壓主要表現為體循環動脈血壓的增高，可直接導致腦﹑腎臟﹑心臟等多個臟器的并發癥。時辰藥理學研究表明人類的血壓變化存在一定的晝夜節律性，凌晨覺醒前后血壓迅速上升，是高血壓患者心腦血管事件發生的高峰段[1-2]。厄貝沙坦是新一代的高選擇性血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑，降壓作用平穩而持久，較其他同類藥物副作用少，同時也是被歐盟首次批準的高血壓﹑2型糖尿病早期及腎病晚期患者的主要降壓藥[3]。微丸劑可通過不同的處方工藝，使藥物達到不同的釋藥速率，以實現藥物的定時﹑定位和定速釋放[4]。將厄貝沙坦制成緩釋微丸可使藥物在體內緩慢釋放，產生持續而穩定的降壓作用，防止清晨血壓驟升[5]。

1 儀器與材料

Aeromatic型流化床（NIRO，德國），ZR-4型智能溶出試驗儀（天津大學無線電廠），高效液相色譜儀（Dionex Corp），BS224S型精密分析天平（Sartorius儀器有限公司），CP225D型精密分析天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司），GZX-9246MBE型干燥箱（上海博訊實業有限公司醫療設備廠）。

厄貝沙坦含藥丸芯（自制），厄貝沙坦對照品（深圳邁瑞爾化學技術有限公司，含量99.75%）Eudragit（NE30D﹑L30D-55，德固賽），聚乙二醇6000（PEG6000，卡樂康輔料公司），滑石粉（廣州杰輔），其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 分析方法的建立

2.1.1 色 譜 條 件[6]色 譜 柱：Diamonsil C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈︰0.02mol/L磷酸二氫鉀水溶液（用磷酸調節pH值至3.0）=45︰55；流速：1mL/min；檢測波長：245nm；柱溫30℃；進樣量：10μL。

2.1.2 標準曲線的建立 精密稱取厄貝沙坦對照品適量，加甲醇配制成250μg/mL的儲備液。精密吸取儲備液0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0mL，分別置于10mL容量瓶中，以甲醇定容，用0.45μm濾膜濾過，取續濾液。將制得的系列溶液分別進樣測定，并以峰面積A對濃度做線性回歸，得回歸方程Y=0.380X-0.113（r=0.9993），厄貝沙坦在12.5～200μg/mL范圍內線性關系良好。

2.1.3 精密度實驗 吸取同一對照品溶液（100μg/mL），按2.1.1項下的色譜條件連續進樣5次。結果峰面積A的RSD為0.63%，表明儀器精密度良好。

2.1.4 穩定性試驗 取同一對照品溶液（100μg/mL），分別于0﹑2﹑4﹑6﹑8﹑10﹑12﹑24h時各測定峰面積A一次，計算得峰面積的RSD為1.02%，表明樣品在24h內穩定。

2.2 體外釋放度方法的建立

采用轉籃法進行測定。具體方法參考《中國藥典》2010 版第二部附錄XD中釋放度測定法第一法中之操作。開始2h的釋放介質采用0.1mol/L HCl溶液，水浴溫度為（37±0.5）℃，轉速100r/min。2h后取樣，并棄去HCl溶液；立即轉入pH6.8 磷酸鹽（pH6.8 PBS）緩沖溶液作為釋放介質，于4﹑6﹑8﹑10﹑12﹑24h各取樣5mL，同時補加同溫pH6.8 PBS緩沖溶液5mL；樣品用0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液稀釋至適宜濃度，測定峰面積A，并計算累積釋藥率。

2.3 厄貝沙坦緩釋微丸的制備

2.3.1 包 衣 液 的 配 制 取Eudragit NE30D﹑Eudragit L30D-55及PEG 6000適量，緩慢加入適量純化水中，攪拌均勻，制得溶液A。將滑石粉邊攪拌邊加入純化水中后勻化5min，制得溶液B。將溶液A與溶液B均勻混合后過80目篩，即得包衣液。

2.3.2 緩釋微丸的制備 將厄貝沙坦含藥丸芯置于流化床中，以底噴方式進行包衣。調整出風溫度為22～28℃，噴液速率為1.5～2.0mL/min，噴霧壓力為4bar。包衣完成后繼續流化干燥10min，結束后置于烘箱中40℃熟化24h。

2.4 處方與工藝因素對釋藥的影響

2.4.1 包衣增重 按2.3.1項下方法制備包衣液，對同一批含藥丸芯包衣，包衣增重分別為5%﹑10%和15%，測定其釋放度。結果如圖1。由結果可知，當包衣增重為5%時，藥物過快釋放，于12h時左右已釋放約藥物總量的90%；當增重15%時，藥物釋放不完全；當增重為10%時釋放效果最佳。所以選擇增重10%。2.4.2 Eudragit NE30D 和Eudragit L30D-55的比例 分別以Eudragit NE30D/Eudragit L30D-55=1︰1﹑4︰1﹑ 8︰1，配制三份不同的包衣液，制備緩釋微丸，增重10%，測定其釋放度。結果見圖2。由圖可知，當兩種材料之比為1︰1及8︰1時，藥物釋放均較緩慢，釋放不夠完全，且當配比為1︰1時，包衣液黏度過大，極易造成噴口堵塞。當配比為4︰1時，釋放度基本符合要求。因此，選擇Eudragit NE30D/ Eudragit L30D-55為4︰1。

圖1 包衣增重對藥物釋放的影響

圖2 Eudragit NE30D與Eudragit L30D-55之比對微丸釋放的影響

2.4.3 抗粘劑用量 在包衣液中加入超細滑石粉作為抗粘劑。分別配制三份不同的包衣液，其中抗粘劑分別占聚合物干重的25%﹑50%﹑75%，制備緩釋微丸，測定其釋放度。結果見圖3。由圖可知，當抗粘劑的用量為聚合物干重的50%或75%時對釋放度并無顯著影響。但當滑石粉的用量為25%時，流化包衣時微丸粘連嚴重，使包衣無法繼續進行；用量為50%時，仍會出現微丸相互粘連的現象；故最終確定滑石粉的用量為75%。

2.4.4 致孔劑用量 選擇PEG 6000為作為致孔劑。以致孔劑的用量分別為聚合物干重的10%﹑20%﹑30%，配制成三份不同的包衣液，制備緩釋微丸，測定其釋放度。結果見圖4。由圖中可知，PEG6000用量對微丸的釋放度影響較大。用量過大或過小都難以使微丸獲得理想的緩釋效果。根據結果選擇致孔劑的用量為聚合物干重的20%。

圖3 抗粘劑用量對微丸釋放的影響

圖4 致孔劑用量對微丸釋放的影響

2.4.5 熟化時間 包衣完成后，微丸需經過熟化使衣膜才能完全聚結。將同一批微丸置于烘箱中，以40℃進行熟化，熟化時間分別為5﹑10﹑24﹑48h，測定其釋放度，結果見圖5。由結果可知，微丸的釋藥速率最初隨熟化時間的增加而逐漸降低；而24h和48h微丸的釋放曲線并無顯著差異，說明當釋藥速率隨熟化時間增加而降低到一定的程度后，熟化時間對藥物釋放的影響已不顯著。考慮緩釋效果和時間成本，確定熟化時間為24h。

圖5 熟化時間對微丸釋放的影響

2.4.6 工藝結果驗證 按前文中確定的最佳處方制備緩釋微丸3批，并分別測定其釋放度。結果見圖6。由圖中可知，所得3批緩釋微丸的釋放曲線間并無顯著性差異，且達到緩釋要求，該制備工藝重現性好。

圖6 3批微丸樣品的釋放度考察

2.5 釋放度影響因素考察

2.5.1 釋放介質 分別選用水﹑0.1mol/L HCl和pH6.8 PBS緩沖液作為釋放介質，考察不同釋放介質對微丸釋放度的影響，結果見圖7。發現緩釋微丸在3 種介質中的釋放度曲線存在明顯差別，以水和pH6.8 PBS緩沖液為釋放介質時，藥物釋放緩慢且釋放不完全。在0.1mol/L HCl中，藥物基本釋放完全，且10h藥物累積釋放超過90%。

圖7 釋放介質pH對微丸釋放的影響

2.5.2 轉速 調整轉速為50﹑75﹑100r/min，分別考察不同轉速對微丸釋放度的影響，結果見圖8。由圖可知，不同轉速對微丸的釋放并無明顯影響。

圖8 轉速對微丸釋放的影響

2.6 釋藥模型的擬合

分別采用幾種常用的數學模型對微丸的釋放曲線進行線性擬合[7-10]。擬合結果見表1，其中Q為累積釋藥率，t為取樣時間。由表中的擬合方程可知，所得微丸的釋放曲線與一級釋放模型最為吻合。

3 討論

厄貝沙坦作為高血壓治療的一線藥物，需長期服藥，制備成緩釋制劑可減少用藥次數，維持穩定的血藥濃度。微丸劑由多個單元組成，相較于一個單元構成的劑型具有分散均勻，局部刺激性小，生物利用度高，載藥范圍較寬，釋藥穩定的特點。可以避免因個別單元的制備失誤而對釋藥行為產生嚴重影響，使制劑的釋藥行為重復性良好[11]。

本實驗采用噴霧干燥法，以PEG 6000為致孔劑，滑石粉為抗粘劑，采用Eudragit NE30D和Eudragit L30D-55水分散體為包衣材料，制備了厄貝沙坦緩釋微丸，通過調整兩種包衣材料的比例調節藥物釋放速率。Eudragit NE30D為pH非依賴型成膜材料，成膜溫度低，抗張強度良好，滲透性適中[12]，不溶于水和消化液； Eudragit L30D-55是腸溶性的包衣材料，當pH≥5.5時即可溶解[13]，加快藥物釋放；因此通過適當調節兩種材料的配比，即可有效控制緩控釋制劑的釋藥速率[14]。水分散體包衣膜須經過熟化，使膜完全愈合[15]。熟化時間過短，衣膜不夠致密；時間過長則會使衣膜變脆。結果發現40℃干燥24h能達到較好的緩釋效果。

微丸的釋藥不僅受包衣材料的影響，也受到胃腸道環境因素的影響，本實驗考察了不同pH值及轉速對藥物釋放度的影響[16]。通過釋放度影響因素考察實驗可知，微丸的釋藥行為受釋放介質的pH值影響較大，說明該緩釋微丸的釋放對外界的pH環境有較大的依賴性。最終確定以轉籃法作為釋放度的測定方法，轉速100r/min，前2h以0.1 mol/L HCl溶液為釋放介質，2h后以pH6.8 PBS緩沖溶液為釋放介質，以模擬人體內環境。

本實驗制備的緩釋微丸釋藥平穩，能降低藥物不良反應，提高治療效果。模型擬合結果表明，藥物的整個釋放過程表現為一級釋藥過程。

[1] Millar Craig MW，Bishop CN，Raftery EB. Circatian variation of blood pressure [J]. Lancet，1978，1：795.

[2] William B，White MD.Importance of aggressive blood pressure lowering when it may matter most[J].Am J Cardiol，2007，100（3A）：10-16.

[3] 陳盛君，朱家壁.緩控釋微丸制劑的研究進展[J].國外醫學（藥學分冊），2004，31（3）：177.

[4] Huang JJ，Xie J，Huang CY，et al.Study and research application of membrane control pellets[J].Pharm Clin Res，2011，19（1）：42-46.

[5] Gosse P，Schumacher H. Early morning blood pressure surge[J].J Clin Hypertens（greenwich），2006，8（8）：584-589.

[6] 熊思敏，呂竹芬，謝青春.高效液相色譜法測定厄貝沙坦緩釋片的含量[J].中國藥師，2008，11（2）：205.

[7] Korsmeyer RW，Gurny R，Doelker E，et al.Mechanisms of solute release from porous hydrophilic polymers [J].Int J Pharm，1983，15（1）：25-35.

[8] Schwartz JB，Simonelli AP，Higuchi W I. Drug release from wax matrics I.Analysis of data with first-order kinetics and with diffusioncontrolled model[J].J Pharm Sci，1968，57（2）：274-277.

[9] Higuchi T.Mechanism of sustained-action medication. Theoretical analysis of rate of release of solid drugs dispersed in solid matrices[J].J Pharm Sci，1963，52（12）：1145-1149.

[10] Peppas NA.Analysis of fickian and non-fickian drug release from polymers[J].Pharm Acta Helv，1985，60（4）：110-111.

[11] 陸斌.藥物制劑新劑型與新技術[M].北京：人民衛生出版社，2005：448．

[12] Pan X，Liu Y，Xiao YJ，et al.Preparation and quality evaluation of a novel multi-unit dosage form by compaction of enteric pellets[J].Chin J New Drugs，2010，19（4）：313-318.

[13] Pan X，Chen M，Han K，et al.Novel compaction techniques with pellet-containing granules[J].Eur J Pharm Biopharm，2010，75（3）：436-442.

[14] 黃堅彤，陳玲.影響薄膜包衣的工藝因素[J].廣東藥學，2001，11（1）：25.

[15] Han K，Jiang SP，Chen B，et al.Preparation of doxycycline hyclate modified-release pellets[J].Chin J Antibiot，2009，34（4）：241-244.

[16] Xu LS，Lro YF，Jia F，et al.Preparation and in vitroin vivo evaluation of none gastric resident dipyridamole （DIP） sustained-release pellets with enhanced bioavailability[J].Int J Pharm，2012，422（1/2）：9-16.

Preparation of irbesartan sustained-release pellets and in vitro drug release investigation

YE Xingchen LV Zhufen CHEN Yanzhong
Institute of Pharmacology, Guangdong Pharmaceutical University，Key Laboratory of New Dosage Forms of Drugs, Guangzhou 510006, China

Objective To prepare irbesartan sustained-release pellets, and to investigate the in vitro release. Methods To prepare irbesartan sustained-release pellets by using of mini-fluidized bed spray coater with the aqueous dispersion coating material combined the acrylic resins of Eudragit NE30D and Eudragit L30D-55. To investigate the influence of different release medium and speed on drug release profile in vitro. Results The proportion of Eudragit NE30D/Eudragit L30D-55 in optimizational formula of coating was 4︰ 1, the amount of antisticking agent and pore-forming agent dry weight of polymer was respectively 75% and 20%, the weight had increased 10% with aging 24h. The pH of release medium has the most significantly influence, the process of in vitro release was accorded with first-order drug release model. Conclusion The preparation of irbesartan sustainedrelease pellets is successful, and the in vitro release of which is meet the requirement.

Irbesartan; Sustained-release pellets; In vitro release

R943

A

2095-0616（2015）16-44-04

2015-05-29）

▲通訊作者