UFLC法測定蛇足石杉不同部位的石杉堿甲含量

張方方，鄭雅媗，黃小強，諶賽男，吳水生

（福建中醫藥大學藥學院，福建 福州350122）

石杉堿甲是20世紀80年代我國學者從蛇足石杉中分離得到的一種新型石松類生物堿，被廣泛用于治療阿爾茨海默癥、重癥肌無力，同時又能促智、提高青春期學生的學習記憶功能［1］。目前測定蛇足石杉不同部位提取物中生物堿含量的方法主要為反相高效液相色譜法（R P－HP L C）［2］，尚無超高效液相或超快速液相檢測蛇足石杉中石杉堿甲含量的報道。超快速液相色譜（ultrafastliquidchromatography，UFLC）是一種新型液相色譜技術，被廣泛應用于快速分析生物制品和中藥材中目標化合物的分離［3］。我們用島津超快速液相色譜儀，通過選用低濃度的乙酸銨緩沖鹽溶液作為流動相，以建立一種快速定量分析石杉堿甲含量的方法。

1 儀器與試藥

ProminenceUFLCXR超快速液相色譜儀（日本島津公司）；AcquityuplcbehC18色譜柱（美國Waters公司）；Milli－Q純水系統（美國Millipore公司）；十萬分之一電子天平（美國Ohaus公司）；真空干燥箱（上海森信實驗儀器有限公司）；KQ5200DE超聲儀（江蘇省昆山市超聲儀器有限公司）。石杉堿甲（長沙中仁生物科技有限公司，批號：2012120301）；甲醇（德國默克公司）；水為超純水；其它試劑為分析純。

蛇足石杉，2012年7月采自福建省連城縣冠豸山，經福建中醫藥大學藥學院中藥鑒定教研室楊成梓副教授鑒定為蛇足石杉Huperziaserrata（Thumb.）Trey.

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱：AcquityuplcbehC18色譜柱（2.1mmx100mm，1.7μm）；流動相：甲醇（A）和5mmol／L乙酸銨溶液（B，用冰醋酸調pH至6.0）；洗脫程序：0～1min，28%A，1～4.5min，40%A，4.5～10min，28%A；流速：0.15mL／min；檢測波長：309nm；柱溫：30℃；進樣量：5μL。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取石杉堿甲對照品10m g，置10m L瓶中加入甲醇使之溶解，并稀釋到刻度，搖勻，作為貯備液，置4℃冰箱中保存，備用。……