中藥柔性脂質體的制備工藝研究

魏雪仙，張世川，劉玉璇，國大亮

(天津中醫藥大學，天津 300193)

柔性脂質體(flexible liposomes)又被稱為變形脂質體(deformable liposomes)，柔性脂質體的膜具有高度變形性和柔韌性，使其擁有更高的包封率和更小的粒徑，適合于包封成分復雜的中藥提取物。高質量的柔性脂質體應具備高度變形性的脂質膜、均勻的粒徑、較高的包封率、和良好的穩定性。本文對中藥柔性脂質體的制備工藝進行總結歸納，為中藥柔性脂質體制備工藝的優化提供有意參考。

1 柔性脂質體的分類

柔性脂質體主要包括傳遞體(transfersomes)和醇質體(ethosomes)兩種［1］。傳遞體是在一般脂質體的膜材中加入膽酸鈉、脫氧膽酸鈉、司盤或者吐溫等表面活性劑，表面活性劑可以起到邊緣活性劑(edge activator)的作用軟化磷脂膜，增加脂質體的變形性［2］。醇質體是由磷脂或類脂，乙醇，水組成的脂質小體，有時加入適量的丙二醇以提高其穩定性［3］。

2 柔性脂質體性能優勢

柔性脂質體膜具有優越的柔順性和變形性，更小的粒徑，易于通過皮膚上的微孔道而攜帶藥物穿過皮膚。其對藥物的包封率高于普通脂質體，穩定性也遠優于普通脂質體與非離子型囊泡［4］。有研究報道柔性脂質體能增強雙氯芬酸鈉的經皮滲透效果［5］。脂質體已被多次證明能夠提高各種藥物的治療指數［6］。通過腦源性神經營養因子柔性納米脂質體(BDNF－FNL)腦內透過率的研究證實了柔性納米脂質體可提高BDNF生物大分子藥物的腦內藥物濃度［7］。利用靶細胞特異性表達某些物質，將識別該物質的配體修飾在脂質體表面，就可以達到靶向定位的效果［8］。有研究顯示柔性脂質體，經修飾后其靶向性得到提高。

3 中藥柔性脂質體的制備工藝

3.1 薄膜蒸發法 將類脂與脂溶性藥物溶于氯仿等有機溶劑中，經旋轉蒸發使之在容器內壁上形成薄膜，然后加入含有水溶性藥物的磷酸鹽緩沖液，不斷振搖即可生成脂質體。胡玉佳等［9］采用薄膜分散法制備丹參酮傳遞體，丹參酮傳遞體球形圓整，大小較均勻，算術平均粒徑約為110 nm。柔性脂質體的粒徑比傳統的剛性脂質體粒徑小，可能是由于柔性脂質體膜的流動性更好，表面張力小，易于包裹成體積較小的脂質微粒。薄膜蒸發法操作簡單方便，適用于實驗室少量制備柔性脂質體，但有機溶劑常無法完全除盡，殘留的有機溶劑可能影響藥物的包封率。

3.2 薄膜超聲法 此法是在薄膜蒸發法的基礎上再經超聲波處理，制得均勻的單室脂質體。薄膜超聲法制備柔性脂質體，粒徑更小，更均勻，擁有較高包封率，透皮效果良好。許明旺等［10］采用薄膜超聲法制備威靈仙柔性脂質體，并用改進Franz擴散池研究其對離體大鼠皮膚的透皮效果，威靈仙柔性脂質包封率達到60%以上，其體外透皮擴散能力是威靈仙醇提液的2.35倍。劉廣等［11］采用薄膜超聲法制備延胡索乙素柔性脂質體，測得包封率為82.7%，粒徑達到110 nm左右，透皮率和皮內滯留率明顯高于酊劑。

3.3 逆向薄膜蒸發法 此法是將一定比例的磷脂、膽固醇、表面活性劑溶于有機溶劑，脂溶性藥物一并溶入有機溶劑，將水溶性藥物溶于水相中，超聲使之成為穩定W/O乳劑，減壓旋轉蒸發除去有機溶劑形成反膠束，再水化、超聲制得柔性脂質體。禤智東［12］采用逆向薄膜蒸發法制備了茶多酚柔性脂質體，通過單因素實驗和響應平面法優化茶多酚柔性脂質體的制備工藝，茶多酚柔性脂質體的形狀規則，呈球形，平均粒徑為171.2 nm，包封率為57.26%，體外經皮滲透實驗結果表明，添加了邊緣活性劑膽酸鈉的茶多酚柔性脂質體可提高透皮滲透性能。逆向薄膜蒸發法應在減壓蒸發有機溶劑時應盡量緩慢，使W/O內相的水充分擴散出來分散脂質，形成均勻的濃柔性脂質體。

3.4 逆向擠出凍干法 采用冷凍干燥法對脂質體混懸液進行凍干處理可有效防止脂質體氧化、水解、分層、聚集等影響質量現象發生，方便脂質體長期貯存或制成其他劑型。任艷等［13］采用逆向擠出凍干法制備了積雪苷柔性脂質體凍干制劑，積雪苷柔性脂質體為白色球狀，平均包封率為31.43%，粒徑可達70 nm，復溶后進行透皮實驗，結果顯示積雪苷柔性脂質體可顯著提升高活性成分在皮膚中的滯留量，相比于普通剛性脂質體有了較大進步。

3.5 乙醇注入超聲法 將磷脂與膽固醇等類脂質及脂溶性藥物溶于有機溶劑中，然后將此溶液經注射器緩緩注入預熱好的磷酸鹽緩沖液或藥物水溶液中，不斷攪拌至有機溶劑除盡為止。此方法制備的脂質體粒徑較大，可經超聲進一步減小粒徑，所得產品大多為單室脂質體，少數為多室脂質體。乙醇注入法制得的醇質體較其他方法制得的柔性脂質體平均粒徑小，有更強的透皮能力。劉星言等［14］采用乙醇注入超聲法制備川芎嗪醇質體，并以丙烯酸樹脂為主要成分，加入琥珀酸作為交聯劑，檸檬酸三乙酯作為增塑劑制備成了川芎嗪脂質體貼劑。制得的川芎嗪醇質體粒徑分布均勻，平均粒徑為78.71 nm，平均包封率為86.42%，貼劑透皮效果較好，達到了緩釋和提高生物利用度的目的。

4 柔性脂質體制備新技術

4.1 超臨界流體技術 超臨界流體技術常見于中藥材提取，可用于脂質體制備的有超臨界溶液快速膨脹法［15］(RESS)、超臨界反溶劑法［16］(SAS)和超臨界流體逆向蒸發法［17］(SCRPE)。張志麗等［18］采用超臨界CO2法制備姜黃素脂質體，超臨界CO2萃取釜壓力為25 MPa，溫度為40℃，制得姜黃素脂質體平均粒徑為98.56 nm，包封率為80.43%。超臨界流體技術應用于脂質體的制備可以減少或消除有機溶劑的殘留，有廣闊的發展前景。

4.2 雙不對稱離心技術 雙不對稱離心不同于傳統意義上的離心，除了基于中心的公轉之外，還有自身的自轉。雙不對稱離心技術要求樣品材料有足夠的黏性，使樣品和反應罐之間有足夠的黏附力。雙不對稱離心技術可用于無菌脂質體的制備，全程工藝在一個密封瓶中進行，脂質體的粒徑大小取決于離心速度、脂質濃度、均質時間和輔助混合的玻璃珠等。應用雙不對稱離心技術在優化條件下制得的鈣黃綠素脂質體平均粒徑為(60±5)nm，包封率為(56±3.3)%［19］。雙不對稱離心技術具有設備小巧、操作簡單、無有機溶劑，制備的脂質體粒徑小等優點，值得推廣應用。

4.3 膜接觸器技術 膜接觸器可有效混合兩種材料，很多種類的分散系統都可以用膜接觸器來制備。膜接觸器已經用來制備乳劑、沉淀、聚合物、脂質納米小體，最近用來制備柔性脂質體。膜接觸器技術制備的脂質體粒徑均勻，脂溶性藥物的包封率高，易于放大規模生產。基于乙醇注入法制備脂質體的理論優勢，Laouini等［20］使用中空纖維組件的膜接觸器提高了脂質膜接觸面積，增大了包封效率。Jaafar－Maalej等［21］使用了一種多孔玻璃膜制得了二丙酸氯地米松脂質體，脂質體平均粒徑約為100 nm，包封率為98%。

5 展望

中藥柔性脂質體的制備工藝還有待進一步優化，中藥成分復雜，多數選用復方，藥物滲漏問題比較凸出，選擇制備工藝時需要充分考慮中藥成分結構和理化性質。新技術的開發和應用使脂質體的質量和種類都有了很大的提高，合理運用這些新工藝和新方法，中藥柔性脂質體包封率、穩定性及釋藥性能必將進一步改善和提高。

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