CD4、CD8及FOXP3T淋巴細胞在子宮頸癌中的表達及意義

栗 嬋，韓麗萍（鄭州大學第一附屬醫院，河南 鄭州 450003）

CD4、CD8及FOXP3T淋巴細胞在子宮頸癌中的表達及意義

栗 嬋，韓麗萍
（鄭州大學第一附屬醫院，河南 鄭州 450003）

目的 探討CD4、CD8及Foxp3T淋巴細胞在宮頸癌中的表達及意義。方法 應用免疫組化法檢測，選取2012年7月～2014年7月我院婦科手術切除或活檢的宮頸組織石蠟標本75例，其中宮頸癌患者63例，年齡40～60歲，平均年齡50歲。檢測CD4、CD8及Foxp3T淋巴細胞在宮頸癌組織中的表達，從而進一步了解CD4、CD8及Foxp3T淋巴細胞在宮頸癌中意義。結果 CD4T淋巴細胞在宮頸癌中的陽性表達率為46%（29/63）；CD8T淋巴細胞在宮頸癌中的陽性表達率為35%（22/63）；Foxp3T淋巴細胞在宮頸癌中的陽性表達率為78%（49/63）。結論 CD4、CD8分子在宮頸癌組織中表達顯著減少或無表達，Foxp3則升高。說明宮頸局部微環境變化和免疫調節系統狀態的改變與宮頸癌的發生發展有著密切關系。

CD4；CD8；Foxp3；宮頸微環境；子宮頸癌

隨著對免疫調節系統對腫瘤影響的關注度逐年提高，人們對CD4、CD8及Foxp3T淋巴細胞在腫瘤細胞免疫中的作用也越來越重視。故此，研究CD4，CD8及Foxp3T淋巴細胞在宮頸癌中的表達及意義對了解宮頸癌時子宮微環境的變化及宮頸癌的診斷及治療有明確的臨床意義[1]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年7月～2014年7月我院婦科手術切除或活檢的宮頸組織石蠟標本75例，其中宮頸癌患者63例，年齡40～60歲，平均年齡50歲。依據2009年國際婦產科聯盟（FIGO）的臨床分期標準：宮頸鱗癌I期21例；II期17例；III期11例；IV期14例；其中發生淋巴結轉移9例，宮頸炎12例。

1.2 主要試劑和儀器

CD8mAb：兔抗人CD8單克隆抗體，工作濃度為1:500；CD4mAb：兔抗人CD4單克隆抗體，工作濃度為1:250；Foxp3 mAb：鼠抗人Foxp3單克隆抗體，工作濃度為1:100；攤片機，烤片機（新苗DHG-914385-III電熱恒溫干燥箱）；CHS型光學顯微鏡（01ympus光學有限公司）。

1.3 試驗方法

將選好的石蠟標本連續切片，制成4 μm厚的切片。依次經過脫蠟和水化。行蘇木精-伊紅染色（HE）和免疫組化染色，高溫高壓抗壓修復，二氨基聯苯胺（DAB）顯色，最后進行鏡檢和拍照。

1.4 統計學方法

應用SPSS 17.0統計學軟件對數據進行分析，計量資料采用t檢驗，計數資料采用x2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

CD4陽性產物呈棕黃色顆粒狀，主要分布于CD4+T細胞的細胞質及細胞膜中。CD4T淋巴細胞在宮頸癌中的陽性表達率為46%，宮頸癌Ⅰ期（-）5例，（+）11例，（++）5例；宮頸癌Ⅱ期（-）7例，（+）7例，（++）3例；宮頸癌Ⅲ期（-）9例，（+）2例；宮頸癌Ⅳ期（-）13例，（+）1例。CD8分子表達于T淋巴細胞的細胞膜和細胞漿，染色從淺黃到棕褐色。多分布于宮頸上皮層及基底層的間質組織，在癌灶組織亦有少量表達。CD8T淋巴細胞在宮頸癌中的陽性表達率為35%，宮頸癌Ⅰ期（-）8例，（+）10例，（++）3例；宮頸癌Ⅱ期（-）9例，（+）6例，（++）2例；宮頸癌Ⅲ期（-）10例，（+）1例；宮頸癌Ⅳ期（-）13例，（+）1例。Foxp3陽性染色主要位于細胞核內，少數在細胞膜中顯色。其陽性表達表現為淺黃色、棕黃色、棕褐色顆粒，逐漸加深。Foxp3T淋巴細胞在宮頸癌中的陽性表達率為78%，宮頸癌I期（-）1例，（+）20例；宮頸癌Ⅱ期（-）3例，（+）6例，（++）8例；宮頸癌Ⅲ期（-）4例，（+）3例，（++）4例；宮頸癌Ⅳ期（-）6例，（+）2例，（++）3例，（+++）3例。

CD4、CD8分子在宮頸癌組的陽性表達率明顯低于宮頸炎組（P＜0.05）；Foxp3在宮頸癌組的陽性表達率明顯高于宮頸炎組（P＜0.05）。見圖1、圖2、圖3。

圖1 CD4在不同宮頸病變組織中的表達情況

圖2 CD8在不同宮頸病變組織中的表達情況

圖3 Foxp3在不同宮頸病變組織中的表達情況

3 討 論

3.1 CD4+T淋巴細胞與宮頸癌的關系

CD4+T淋巴細胞主要識別腫瘤細胞分泌的可溶性抗原，同時，CD4+T淋巴細胞還能釋放多種細胞因子參與機體的抗腫瘤免疫應答[2]。因此，CD4+T淋巴細胞減少為腫瘤細胞的免疫逃避提供了條件。

3.2 CD8+T淋巴細胞與宮頸癌的關系

CD8分子是T淋巴細胞表面的糖蛋白，T淋巴細胞活化并分化為細胞毒性T淋巴細胞（CTL），從而發揮殺傷靶細胞的作用[3]，當腫瘤細胞HLA-I類抗原表達降低時，被激活的CTL數量減少，機體清除腫瘤細胞的能力相應減弱，從而使腫瘤細胞在體內繼續生存。由此可見CD4+T淋巴細胞和CD8+T 淋巴細胞在抗腫瘤反應中雖然發揮了不同作用，但它們一旦改變，就能夠使腫瘤細胞逃避機體的免疫系統的監視和清除，為腫瘤細胞的發展、侵潤和轉移提供了必要條件。

3.3 Foxp3與宮頸癌的關系

有研究發現，持續的HPV感染與Foxp3的表達高度相關，Foxp3+淋巴細胞的數量及功能的增加主要與機體對腫瘤抗原免疫反應差以及機體免疫系統功能紊亂有關[4]。

4 結 語

本研究采用免疫組織化學SP法檢測宮頸癌、CIN及慢性宮頸炎中CD4、CD8和Foxp3分子的表達，結果如下。

1）CD4、CD8分子在宮頸癌組的表達率均明顯降低；而Foxp3則升高。2）CD4、CD8分子的表達存在正相關關系。3）在宮頸癌組中，CD4、CD8和Foxp3分子在宮頸癌的不同臨床分期表達比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

綜上所述，CD4、CD8分子在宮頸癌組織中表達減少及無表達，Foxp3則升高。提示宮頸的局部免疫狀態與宮頸病變的發生發展密切相關。

[1] 樂 杰.婦產科學[M].第7版.北京:人民衛生出版社,2011.

[2] RE. Pollock.臨床腫瘤學手冊[M].第7版.吉林:吉林科學出版社,2001.

[3] 曹澤毅.中華婦產科學[M].北京:人民衛生出版社,2010:565-577.

[4] 覃 燁,王紅麗,任 彤.宮頸癌及宮頸上皮內瘤病變與生殖道感染的相關性研究[J].中華醫院感染學雜志,2014,24(4):811-813.

本文編輯：吳玲麗

Expression and signifi cance of CD4, CD8and FOXP3T lymphocytes in cervical cancer

LI Chan, HAN Li-ping (The First Affi liated Hospital of Zhengzhou University, Henan Zhengzhou 450003, China)

R737.3

B

ISSN.2095-8803.2015.09.009.02