苦參素抗腎臟纖維化作用的臨床觀察

李立 范妮娜 馮彬 楊紅麗 房星星

苦參素抗腎臟纖維化作用的臨床觀察

李立 范妮娜 馮彬 楊紅麗 房星星

目的 探討苦參素在慢性腎臟病（CKD）進展中抗腎臟纖維化的作用。方法 選取63例CKDII期或Ⅲ期患者，隨機分成觀察組35例、對照組28例。對照組采取保護腎功能、控制高血壓、減少蛋白尿、糾正酸中毒等治療措施。觀察組在對照組基礎(chǔ)上每天靜脈滴注苦參素注射液1.2g，療程14d。檢測兩組患者治療14 d前后外周血纖維化及微炎癥指標。結(jié)果 觀察組治療14d后血清中透明質(zhì)酸（HA）、Ⅲ型前膠原（PⅢNP）、Ⅳ型膠原（Ⅳ-CA）、層粘連蛋白（LN）含量均低于治療前（P＜0.05），與同期對照組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。觀察組治療14d后超敏C反應蛋白（hs-CRP）、白細胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等微炎癥指標與治療前比較顯著降低（P＜0.05），與同期對照組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結(jié)論 苦參素可能通過降低血清中HA、PⅢNP、Ⅳ-CA、LN水平及抑制微炎癥因子表達來抗腎臟纖維化。

苦參素 腎間質(zhì)纖維化 慢性腎臟病 微炎癥

腎間質(zhì)纖維化（renal interstitial fibrosis，RIF）是各種腎臟疾病進展到終末期腎功能衰竭的共同途徑［1］。其中，大量單核巨噬細胞的浸潤在腎小管損傷和腎間質(zhì)纖維化的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用［2］。苦參素主要成分為氧化苦參堿（oxymatrine），具有抗炎、免疫調(diào)控、抗纖維化、降酶、退黃等藥理作用和臨床功能［3］。有資料顯示，在單側(cè)輸尿管結(jié)扎（UUO）模型大鼠中，苦參素有抑制腎間質(zhì)成纖維細胞增殖及膠原合成，抑制腎小管上皮細胞表型轉(zhuǎn)化（EMT），減輕炎性浸潤等作用［4］。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2010年10月至2014年9月住院治療的慢性腎臟病（CKD）患者，臨床診斷均符合K/DOQI臨床實踐指南中CKD（II、Ⅲ期）診斷標準［5］，內(nèi)生肌酐清除率（creatinine clearance，Ccr）為30～89 ml/min。觀察組男19例，女16例；平均年齡（45.7±13.5）歲。平均病程（17.6±12.3）個月。對照組男16例，女12例；平均年齡（47.6±15.4）歲。平均病程（19.7±14.2）個月。兩組年齡、例數(shù)、病程等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 排除標準 糖尿病、紅斑狼瘡、肝炎及腫瘤相關(guān)性腎病；近1個月內(nèi)的急性感染、輸血、手術(shù)史；有慢性感染、活動性自身免疫性疾病；近1個月內(nèi)接受免疫抑制劑、維生素C及維生素E治療。

1.3 方法 （1）治療方法：對照組采取保護腎功能、降壓、降蛋白尿、糾正酸中毒等治療措施，觀察組在上述治療基礎(chǔ)上加用苦參素注射液1.2g于5%葡萄糖250ml中靜脈滴注（天晴復欣，Marine Injection，江蘇正大天晴藥業(yè)股份有限公司），1次/d，療程14d。所有患者均簽署知情同意書。檢測患者治療14d前后外周血纖維化及微炎癥指標。（2）檢測指標及方法：兩組患者分別在開始治療前第1天和治療后第14天空腹靜脈采血，血清纖維化指標通過放射免疫分析法檢測血清中透明質(zhì)酸（HA）、Ⅲ型前膠原（PⅢNP）、Ⅳ型膠原（Ⅳ-CA）、層粘連蛋白（LN）的含量。微炎癥指標通過酶聯(lián)免疫分析法（試劑盒由上海西唐生物科技有限公司提供）檢測超敏C反應蛋白（hs-CRP）、白細胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等炎癥因子的表達水平。

1.4 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件。計量資料以（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者纖維化指標 加藥治療后腎臟纖維化各項指標顯著性下降（P＜0.05），與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），提示苦參素可降低CKD患者外周血纖維化各項指標的含量。見表1。

表1 兩組患者治療前后血清纖維化指標比較［μg/L，（x±s）］

2.2 兩組患者微炎癥指標 加藥治療后，微炎癥指標與治療前及對照組比較均顯著下降，提示苦參素可改善CKD患者微炎癥狀態(tài)。見表2。

表2 兩組患者治療前后微炎癥指標比較（x±s）

3 討論

腎臟纖維化的病理表現(xiàn)主要包括腎小球硬化和腎小管間質(zhì)的纖維化，其中以腎小管間質(zhì)纖維化尤為突出［6］。腎小管間質(zhì)細胞活化、炎癥細胞浸潤、血管活性物質(zhì)以及纖維化細胞因子、多種生長因子過度表達等因素相互作用導致細胞外基質(zhì)合成增多、降解減少，從而形成腎間質(zhì)纖維化［7，8］。血清纖維化指標如透明質(zhì)酸（HA）、Ⅲ型前膠原（PⅢNP）、Ⅳ型膠原（Ⅳ-CA）、層粘連蛋白（LN）與腎間質(zhì)纖維化程度有良好相關(guān)性，通過檢測血清纖維化指標，可客觀地判斷腎臟損傷及腎間質(zhì)纖維化的發(fā)展程度。

IL-1β、TNF-α、hs-CRP為臨床常用反映微炎癥狀態(tài)的指標［9，10］。這些炎癥因子能作用于血管內(nèi)皮細胞和系膜細胞，促進各種炎癥因子表達，加重炎癥，從而導致組織損傷，加重腎間質(zhì)纖維化［11］。

苦參素具有抗炎、降酶、退黃等藥理作用和臨床功能［3］。現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，苦參素在抗菌、抗炎、抗纖維化、抗風濕、抗腫瘤、抗心律失常、消腫利尿及免疫調(diào)節(jié)方面有廣闊的臨床應用前景［12，13］。有資料顯示，苦參素可通過影響轉(zhuǎn)化生成因子-β1（TGF-β1）mRNA的表達，從而抑制免疫性肝纖維化膠原纖維合成，發(fā)揮抗肝臟纖維化的作用［14］。林文等［10］研究發(fā)現(xiàn)苦參素可以抑制巨噬細胞胞漿、胞膜蛋白激酶C的活性，從而降低炎癥因子TNF-α、IL-6的釋放。周文祥等［15］亦觀察到苦參素能改善維持性血液透析患者的微炎癥狀態(tài)。

本文CKD患者經(jīng)苦參素靜脈滴注治療后，血清纖維化指標HA、PⅢNP、Ⅳ-CA、LN水平明顯降低，微炎癥因子hs-CRP、IL-1β、TNF-α表達量顯著下降，表明苦參素具有抗腎臟纖維化、改善微炎癥狀態(tài)的作用，為臨床上治療腎臟纖維化探索出新的治療措施。但由于本資料病例數(shù)較少，觀察時間短，觀察指標不多，故仍需進一步對苦參素的臨床療效進行觀察，對其治療機制進行深入探討，從而為苦參素的臨床應用提供良好的理論支持。

1 Okada H,Kalluri R. Cellular and molecular pathways that lead to progression and regression of renal fibrogenesis. Curr Mol Med,2005,5(5): 467～474.

2 Iwano M,Neilson EG. Mechanism of tubulointerstitial fibrosis. Curr Opin Nephrol Hypertens,2004,13(3): 279～284.

3 李丹,王平全,張楠森. 苦參堿類生物堿的研究進展及臨床應用. 中草藥,1996,27(5): 308～311.

4 高紅宇,易艷,黃曉麗,等. 苦參素對單側(cè)輸尿管梗阻大鼠腎間質(zhì)纖維化的保護作用. 中國組織化學與細胞化學雜志,2006,15(2): 190～194.

5 National Kidney Foundation. K/DOQI clinical practice guidelines for chronic disease: evaluation,classification,and stratification. Am J Kidney Dis,2002,39(2 Suppl 1): S1～S266.

6 Schieppati A,Remuzzi G. Chronic renal diseases as a public health problem: Epidemiology,social,and economic implications. Kidney Int, 2005, 68(Suppl 98): S7～S10.

7 Isaka Y,Takahara S,Imai E. Chronic deteriorating renal function and renal fibrosis. Contrib Nephrol,2008,159: 109～121.

8 Razzaque MS,Taguchi T. Cellular and molecular events leading to renal tubulointerstitial fibrosis. Med Electron Microse,2002,35(2): 68～ 80.

9 孫永年,龔守軍,黃祝青.苦參素對慢性乙型肝炎血清腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-6、白細胞介素-8的影響.中國綜合臨床,2003,19(10): 908～909.

10 林文,張俊平,胡振林,等.苦參堿對細菌脂多糖誘導大鼠枯否細胞釋放腫瘤壞死因子及白細胞介素～6的影響. 藥學學報,1997,32(2): 93～96.

11 Haupt W,Zirngibl H,Stehr A,et al. Tumor necrosis factor-alpha and interleukin-10 production in septic patients and the regulatory effect of plasma. Eur J Surg,1999,165(2): 95～100.

12 張紅梅,陳曉明.苦參素的藥學研究進展.中國藥業(yè).2007,16(16): 63～64.

13 葉友,李國煒,胡萍. 苦參素的臨床及藥理研究進展. 湖南中醫(yī)雜志. 2007,23(3): 102～103.

14 成扣,張敏,劉華珍,等.氧化苦參堿對免疫性肝纖維化的膠原纖維合成和TGF-β1 mRNA的影響. 華消化雜志. 2003, 11(4): 210～212.

15 周文祥,鄭文彬,黃小妹,等.苦參素對維持性血液透析患者微炎癥狀態(tài)的影響: 隨機對照試驗. 中西醫(yī)結(jié)合學報,2009,7(8): 736～740.

Objective To investigate the mechanism of therapeutic effect of oxymatrine on renal fi brosis in chronic kidney disease（CKD）. Methods Sixty-three CKD（stage 2-3）patients were selected and randomly divided into oxymatrine treatment（A）group（n=35）and control treatment（B）group（n=28）. Group B treatment methods are including protection of renal function，control blood pressure，lowering proteinuria，correction of acidosis and other symptomatic treatments. Group A treatment methods are based on the above treatment，then additional use of oxymatrine 1.2 g in 250 mL of 5% glucose intravenously，once a day and continued 14 days. Indicators such as peripheral blood fi brosis and micro-infl ammation were detected in CKD patients before and after treatment. Results After 14 days of treatment，sera fi brosis markers in patients of group A，such as hyaluronic acid（HA），type Ⅲ procollagen（PⅢNP），type Ⅳ collagen（Ⅳ-CA），laminin（LN）were signifi cantly decreased than those before treatment（P＜0.05）and also group B the same time period（P＜0.05）. Micro-infl ammatory markers such as high-sensitivity C-reactive protein（hs-CRP），interleukin-1β（IL-1β），tumor necrosis factor-（TNF-）in patients of group A were also signifi cantly lower than those before treatment（P＜0.05），and had a more signifi cant difference（P＜0.05）compared with the same period in group B also. Conclusion The effect of oxymatrine anti-renal fi brosis is may be mediated by lowering the levels of serum HA，PⅢNP，Ⅳ-CA，LN and inhibition of micro-infl ammation in CKD patients.

Oxymatrine Renal interstitial fi brosis Chronic kidney disease Micro-infl ammation

226001 江蘇省南通市第一人民醫(yī)院腎臟科（李立 楊紅麗 房星星）

225001江蘇省揚州市第一人民醫(yī)院腎臟科（范妮娜馮彬）