速生高抗雄性楊的組織培養與快繁研究

劉廣卿　丁芳　孫喜云　孫鳳嶺

摘要：利用正交試驗研究不同基本培養基，不同濃度6-BA、NAA、IBN、ZT等5個因子對速生高抗雄性楊樹增殖及壯苗和生根的影響，結果表明：5個因素對于楊樹側芽增殖的影響由強到弱依次為：基本培養基>6-BA濃度>IBN濃度>ZT濃度>NAA濃度。5個因素對于楊樹生根的影響由強到弱依次為：基本培養基>6-BA濃度>ZT濃度>NAA濃度>IBN濃度。最適宜楊樹增殖的培養基為：1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+IBN 0.5 mg/L+ZT 0.15 mg/L，最適宜楊樹壯苗與生根的培養基為：WPM+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L+IBN 1.0 mg/L+ZT 0.05 mg/L。

關鍵詞：速生高抗雄性楊；增殖；壯苗；生根；培養基篩選；激素

中圖分類號： S792.110.5 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2015）10-0055-02

楊樹是華北、華東地區栽培量最大的樹種，其特點是生長迅速、高大挺拔、迅速成林，能防風沙、吸收廢氣。楊樹可廣泛用于生態防護林、 三北防護林、農林防護林、工業用材林。楊樹作為道路綠化、園林景觀也是非常優秀的樹種。目前，很多人摒棄原有生長速度稍緩的雄性楊，大量栽培速生的雌楊樹，以致每年四五月份楊絮漫天飛揚，近年來，楊絮已經成為污染環境、引發火災的重要原因之一。四五月份正趕上冬小麥灌漿期，大量楊絮包裹在小麥植株上，影響其光合作用，造成小麥大面積減產。近年來，三倍體楊等陸續問世，但由于其在材質、抗蟲性等方面存在一些問題，阻礙了三倍體楊的大面積推廣，速生高抗雄性楊具有材質優良、抗蟲、抗病、速生等特征，是取代現有楊樹品種的不二選擇[1]。為了盡快獲得大量速生高抗雄性楊幼苗，筆者采用正交試驗方法，對楊樹組培苗進行瓶內增殖與生根，篩選出最適宜的組培苗壯苗與增殖的培養基配方，旨在為促進楊樹產業化發展提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

速生高抗雄性楊。

1.2 方法

取當年生枝條，獲取無菌瓶苗，篩選出適合其增殖壯苗及生根的培養基。

1.2.1 試驗設計 采用MS、WPM、1/2MS、1/2 WPM培養基作為基本培養基，6-BA、NAA、IBN、ZT 4種植物激素各設4個梯度水平，采用正交試驗進行最佳培養基激素配比篩選（表1）。培養基中均加入蔗糖30 g/L、瓊脂6 g/L，pH值為5.8，每個培養基分裝8瓶，經高壓滅菌后待用。

1.2.2 材料處理 選擇生長健壯的植株，剪取當年生、半木質化腋芽飽滿的枝條5～10 cm，去掉可見葉，在流動的自來水中沖洗15～20 min，揩干水分。在無菌室內的超凈工作臺上用75%乙醇處理30 s，0.1%HgCl2滅菌 10 min，用無菌水沖洗5～7次，剪成長0.5～1.0 cm、含有1～2個腋芽的莖段，接種到基本培養基中，待腋芽長出1～2 cm再接種到增殖培養基中進行增殖培養，繼代增殖以后，轉入壯苗生根培養基中進行壯苗生根培養，培養溫度26 ℃，光照時間12 h/d，光照強度2 000 lx，每3 d記錄1次，共記錄45 d。采用正交試驗設計，共 16個處理，試驗因子見表1，每個處理8瓶，每瓶接種3～4個莖段。

1.2.3 統計方法 接種后30 d，觀察不同處理的生根數、側芽數，計算側芽率、生根率[2]，并對統計結果進行方差分析。

2 結果與分析

由表2、表3可知，不同培養基組合對楊樹側芽率影響不同，在基本培養基為1/2MS、6-BA濃度為1.0 mg/L、NAA濃度為1.0 mg/L、BN濃度為0.5 mg/L、ZT濃度為 0.15 mg/L 時增殖效果最佳。這5個因素對于楊樹側芽增殖的影響由強到弱依次為：基本培養基>6-BA濃度>IBN濃度>ZT濃度>NAA濃度。基本培養基對楊樹增殖的影響最為顯著。由表2、表4可知，不同培養基組合對楊樹壯苗率影響不同，其中在基本培養基為WPM、6-BA濃度為 1.0 mg/L、NAA濃度為1.5 mg/L、IBN濃度為1.0 mg/L、ZT濃度為0.05 mg/L時生根效果最佳。這5個因素對于楊樹生根的影響由強到弱依次為：基本培養基>6-BA濃度>ZT濃度>NAA濃度>IBN， 6-BA、NAA、IBN、 ZT 不同水平對速生楊樹的生根影響并不顯著，說明速生高抗雄性楊樹生根條件要求不高，屬于容易生根的植物。

3 結論與討論

實際生產過程中，除了培養基的種類和各類植物生長調節劑對器官的分化起重要作用外，外植體的消毒方式以及細胞分裂素和生長素配比等都是誘導器官發生的關鍵因素[3]。在組培過程中產生的污染、褐變等問題，將是今后重點研究方向。

參考文獻：

[1]尹偉倫. 中國楊樹栽培與利用研究[M]. 北京：中國林業出版社，2005.

[2]張小單，趙恒田，李 晶，等. 鉆天柳莖段腋芽誘導消毒方法與培養基的篩選[J]. 安徽農業科學，2013，41（33）：12894-12897，12932.

[3]康 冰，王關平，張小紅，等. 歐美黑楊離體再生途徑及影響因子的研究[J]. 西北植物學報，2004，24（12）：2355-2358.周曉燕，馬彥玲，楊 涓. 蘆葦組培快繁技術的研究[J]. 江蘇農業科學，2015，43（10）：57-58，327.