探討時間分辨免疫技術在乙型肝炎五項測定中的應用效果

白艷麗

（沈陽市第一人民醫院檢驗科，遼寧 沈陽 110041）

探討時間分辨免疫技術在乙型肝炎五項測定中的應用效果

白艷麗

（沈陽市第一人民醫院檢驗科，遼寧 沈陽 110041）

目的探討時間分辨免疫技術在乙型肝炎五項測定中的應用效果。方法選取我院2012年8月至2014年8月432例乙型肝炎患者的血清標本進行TRFIA法檢測，并與ELISA法檢測的結果對比分析。結果TRFIA法檢測乙型肝炎五項指標，質控血清五項指標的變異系數（CV%）均在20%范圍內，標準品C和E的五項指標均值與靶值的比值均在0.90～1.10。ELISA法和TRFIA法分別檢測血清樣品的乙型肝炎五項指標經統計學分析，差異不顯著（P＞0.05），除HBsAb外其他四項指標陽性符合率均較高。結論TRFIA法在能保證高重復性和準確性的同時，其靈敏度明顯高于ELISA法。

時間分辨免疫技術；乙型肝炎五項測定；乙型肝炎病毒

我國為乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染高發區，臨床上為了有效預防和治療HBV感染，早期、準確的檢測HBV病毒血清標志物能為其提供重要的依據。HBV病毒血清標志物檢測主要包括乙型肝炎的五項指標，即乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎表面抗體（HBsAb）、e抗原（HBeAg）、e抗體（HBeAb）和核心抗原（HBcAb）[1]。臨床上用于檢測HBV病毒血清標志物的免疫技術有很多，發展也比較快。時間分辨熒光免疫技術（time resolved fluoro immune assay，TRFIA）是近十年發展最快的一種高靈敏度的定量檢測方法[2]。為了探討TRFIA在乙型肝炎五項測定中的應用效果，本文選取了我院2012年8月至2014年8月432例乙型肝炎患者的血清標本進行檢測，并與酶免疫吸附試驗（enzyme linked immune sorbent assay，ELISA）檢測的結果對比，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 標本來源：血清標本來自我院在2012年8月至2014年8月接受的432例乙型肝炎患者，男性275例，女性157例，年齡為15～65歲，平均年齡（36.8年齡男性）歲。空腹靜脈采血，保存在促凝分離膠密封試管內，37 ℃放置待凝固后離心收集血清，-20 ℃保存。

1.2 儀器和試劑：使用北京普朗新技術公司酶免儀進行ELISA法檢測，相應試劑由成都奧克生物技術公司提供，質量均達標。使用上海新波生物技術有限公司生產的Anytest 2000型時間分辨熒光檢測儀進行TRFIA法檢測，相應試劑成都奧克生物技術公司提供，質量均達標。乙型肝炎兩對半質控血清由衛生部臨床檢驗中心提供，質量達標。

1.3 檢測方法

1.3.1 TRFIA法檢測乙型肝炎五項的重復性實驗：采用TRFIA法檢測乙型肝炎兩對半質控血清五項指標，連續測定20 d，每天1次，分別求得五項指標的均值（），標準差（S），變異系數（CV%）。變異系數在20%內為重復性良好。

1.3.2 TRFIA法檢測乙型肝炎五項的準確性實驗：采用TRFIA法檢測標準品C和E的五項指標，各重復3次，將平均值與靶值對比，比值在0.90～1.10為準確性好。

1.3.3 ELISA法和TRFIA法分別檢測血清樣品的乙型肝炎五項實驗：由固定檢測技師嚴格按照說明書分別采用ELISA法和TRFIA法進行檢測。

1.3.4 統計學方法：采用SPSS 19.0統計學軟件進行統計學分析，行卡方分析，P＜0.05具有統計學意義。

2 結 果

表3 ELISA法和TRFIA法分別檢測血清樣品的乙型肝炎五項指標

2.1 TRFIA法檢測乙型肝炎五項指標的重復性實驗結果：質控血清五項指標的變異系數（CV%）均在20%范圍內，見表1。

表1 TRFIA法檢測乙型肝炎五項的重復性

2.2 TRFIA法檢測乙型肝炎五項指標的準確性實驗結果：標準品C和E的五項指標均值與靶值的比值均在0.90～1.10，見表2。

表2 TRFIA法檢測乙型肝炎五項的準確性

2.3 ELISA法和TRFIA法分別檢測血清樣品的乙型肝炎五項指標實驗結果：兩種方法分別檢測血清樣品的乙型肝炎五項指標經統計學分析，差異不顯著（P＞0.05），除HBsAb外其他四項指標陽性符合率均較高。

3 討 論

ELISA法在臨床上用于檢測乙型肝炎血清五項指標具有操作簡單快捷、成本低廉和適于大批量樣品檢測等優勢，使其成為目前應用較多的一種方法。但是由于其靈敏度受到多種外界因素的影響，時常出現假陽性或者假陰性，致使出現誤診或者漏診[3]。該方法也只能用于定性而不能定量，制約了其應用范圍。TRFIA法是一種新型的標記免疫檢測方法，采用鑭系稀土元素及其螯合物作為標志物[4]，利用時間分辨熒光分析儀進行信號檢測，排除了非特異性熒光的干擾，提高了檢測的特異性，保證了被檢測物質的穩定性，因此具備了靈敏度高、抗干擾能力強和穩定性好等優點。

本文中，質控血清五項指標的變異系數（CV%）均在20%范圍內，標準品C和E的五項指標均值與靶值的比值均在0.90～1.10，說明TRFIA法檢測乙型肝炎五項指標的重復性和準確性均能帶到要求。ELISA法和TRFIA法分別檢測血清樣品的乙型肝炎五項指標，實驗結果經統計學分析差異不顯著（P＞0.05），兩種方法陽性符合率除了HBsAb外，其他四項指標均在95%以上。HBsAb的陽性符合率為77.78%，可能是血清樣品中HBsAb為陽性的比例較少造成。TRFIA法檢測血清樣品乙型肝炎五項指標陽性比例均高于ELISA法檢測的陽性比例。可見，TRFIA法在能保證高重復性和準確性的同時，其靈敏度明顯高于ELISA法。

綜上所述，ELISA法和TRFIA法對乙型肝炎五項指標的檢測均有較高的特異性和靈敏度。ELISA法方便快捷，成本低廉，但其穩定性差，易出現假陽性或者假陰性，適合普通檢測使用。TRFIA法特異性好，靈敏度高，能夠精確定量，比ELISA法更適合用于臨床上精確的檢測。

[1]朱天禮,張葵.時間分辨熒光免疫技術在乙肝病毒標志物檢測中的應用[J].臨床輸血與檢驗,2008,10(1):23-26.

[2]徐艷霞,謝金玲.時間分辨熒光免疫技術在乙肝兩對半測定中的應用[J].臨床合理用藥,2010,3(22):39-42.

[3]田玉峰,王家安.乙肝五項時間分辨免疫熒光分析與PCR-HBV定量的關系[J].中外醫療,2008,34(34):18-20.

[4]趙治鳳,賈秋龍.乙肝五項指標兩種常用檢測方法的比較分析[J].醫學檢驗,2012,19(8):78-80.

R512.6+2

B

1671-8194（2015）01-0085-02