不同日齡豬偽狂犬抗體的檢測與分析

孫華偉+趙永前+茅愛華

摘要：應用豬偽狂犬病毒gpI抗體檢測試劑盒和豬偽狂犬病毒gB抗體檢測試劑盒對某規(guī)模豬場的2～22周齡11個階段的110份血清同時進行上述2種抗體檢測，以掌握不同日齡豬偽狂犬野毒的感染情況并制定適合本場的豬偽狂犬的免疫程序。結果顯示：該場不同日齡豬偽狂犬gpI抗體全部為陰性，仔豬偽狂犬的母源抗體可以維持到10周以上，說明目前場內采用10周齡進行豬偽狂犬疫苗的免疫接種方法是科學的。

關鍵詞：偽狂犬；gpI抗體；gB抗體；免疫接種

中圖分類號： S858.28 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2015）10-0262-02

偽狂犬病（pseudorabies）是由偽狂犬病病毒引起的發(fā)生在多種家畜、野生動物中的急性傳染病。偽狂犬病病毒感染豬可以引起種豬繁殖障礙、產(chǎn)弱仔，新生仔豬表現(xiàn)為共濟失調、抽搐、甚至突然死亡等。近年來，隨著我國養(yǎng)豬規(guī)模的不斷擴大，農(nóng)戶飼養(yǎng)管理水平參差不齊，豬偽狂犬在各地的發(fā)病率呈明顯上升趨勢。目前，偽狂犬病主要采用gpI缺失疫苗進行免疫，與之配套的檢測方法有gB抗體檢測試劑盒進行抗體檢測及gpI抗體檢測試劑盒進行野毒感染抗體檢測。通過檢測上述2種抗體水平來了解豬場的免疫水平、野毒感染情況，及時微調免疫程序，保證被檢豬群安全。2014年6月，在安徽省和縣某存欄300頭生產(chǎn)母豬的規(guī)模豬場，種豬群在5月的檢測中偽狂犬gpI抗體均為陰性，偽狂犬gB抗體水平良好。由于周圍豬場存在豬偽狂犬野毒感染，送檢不同日齡豬血清進行相關檢測，以及時發(fā)現(xiàn)現(xiàn)存問題及潛在風險，具體報道如下。

1 材料與方法

1.1 血清樣品

來自該規(guī)模化豬場2～22周齡（2周齡為1個階段，每階段采10頭）11個階段的110份血清。該豬場免疫某生物制品廠的偽狂犬基因缺失疫苗，偽狂犬免疫程序為：母豬采用“一刀切”的方式每年普免3次，商品豬在70日齡時按 1份/頭進行肌注免疫1次。

1.2 主要試劑及儀器

豬偽狂犬病毒gpI抗體檢測試劑盒（PRV gl Ab）和豬偽狂犬病毒gB抗體檢測試劑盒（PRV gB Ab）均購自美國IDEXX公司。寶特ExL 800酶標儀（美國寶特公司）、CentrifugpI 5424R離心機、各種規(guī)格移液器均購自德國 Eppendorf 公司恒溫箱水浴鍋等。

1.3 方法

嚴格按照試劑盒說明書要求進行操作。結果判定標準：被檢樣品S/N>0.70，樣品判為陰性；被檢樣品S/N≤060，樣品判為陽性；0.60

2 結果與分析

2.1 豬偽狂犬gpI抗體檢測結果

檢測的110份血清豬偽狂犬gpI抗體全部為陰性，即商品豬未感染豬偽狂犬野毒，這與母豬群5月的檢測結果一致，同時也說明檢測到的偽狂犬gB抗體為疫苗免疫所產(chǎn)生。

2.2 豬偽狂犬gB抗體檢測結果

不同周齡豬偽狂犬gB抗體的檢測數(shù)據(jù)見表1。由圖1可知，隨著仔豬周齡的增加，偽狂犬gB抗體陽性率逐漸下降，10周齡時達到最低值70%，仔豬在10周齡免疫后4周豬偽狂犬gB抗體陽性率上升至較高水平，并一直維持至20周齡。由圖2可知，隨著仔豬周齡增長，偽狂犬gB抗體平均值呈先上升后下降趨勢。12周齡后偽狂犬gB抗體平均值逐漸上升，14周齡時偽狂犬gB抗體達到較高水平，并一直維持到20周齡，說明仔豬在10周齡時進行豬偽狂犬疫苗免疫的時機是正確的。20周齡后抗體平均值又開始下降，此時已接近豬的出欄時間。由圖3可知，2～4周齡仔豬偽狂犬gB抗體水平和抗體均勻度相對較好；仔豬6周齡后偽狂犬gB抗體的離散度逐漸增加。10周齡疫苗免疫后，抗體水平逐漸上升，但抗體離散度仍然較大，說明豬只之間存在著個體差異，在相近的免疫條件下，不同豬反映不同的抗體水平。

3 結論與討論

選擇科學的時間點進行仔豬的免疫，是偽狂犬能否成功免疫的關鍵，因此，最大限度消除母源抗體的影響對免疫程序顯得尤為重要。本研究結果表明，仔豬在6周前抗體水平下降較慢，從第10周開始抗體水平下降明顯加快，10周齡疫苗免疫后偽狂犬gB抗體逐漸上升，并維持較長時間的高抗體水平，說明目前使用的偽狂犬免疫程序科學有效。由于該場管理正規(guī)，生物安全措施嚴格，所用疫苗質量穩(wěn)定，同時該場為偽狂犬野毒陰性場， 所以仔豬只免疫1次偽狂犬疫苗。這也表明只要綜合防治措施到位，定期檢測，保持全場豬群豬偽狂犬野毒抗體陰性是切實可行的，這也將大大提升規(guī)模豬場的生產(chǎn)效益、品牌效應。

3.1 量身定制適合本場的免疫程序

規(guī)模化豬場的免疫程序必須適合本場的實際情況，檢測本場不同周齡豬的抗體水平是量身定制適合本場的免疫程序的根本依據(jù)。曾強報道，母豬產(chǎn)前30 d免疫偽狂犬疫苗，仔豬30日齡時獲得母源抗體合格率為93.3%以上，且母源抗體可以維持到60日齡[1]。周小兵等報道，偽狂犬母源抗體在65～75日齡之間下降到最低[2]。劉明亞等報道，出生仔豬偽狂犬抗體水平較高，并呈緩慢下降趨勢，45日齡進行偽狂犬疫苗免疫，偽狂犬抗體呈加速下降趨勢[3]。童光志認為，母源抗體的半衰期應該在15 d左右[4]。本試驗豬場多批次統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，商品豬100 kg體質量的平均日齡小于160日齡，高于行業(yè)平均水平，也從另一方面驗證了本場目前使用的免疫程序是科學有效的。

3.2 偽狂犬凈化的思考

豬群的健康狀況是豬場能否持續(xù)經(jīng)營的關健，也是決定豬場生產(chǎn)成本的主要因素，近年來，豬偽狂犬病給我國的養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失，因此有計劃地開展豬偽狂犬病的凈化對于提高規(guī)模化豬場的經(jīng)濟效益具有重要意義[5]。（1）種豬群的凈化。偽狂犬病病毒可以通過精液進行傳播，種豬群的帶毒率直接影響整個豬群的偽狂犬病流行，通過監(jiān)測種豬群的感染與免疫狀態(tài)，淘汰感染種豬是有效控制仔豬發(fā)生偽狂犬病的有效途徑。（2）后備母豬的凈化。后備母豬在入群前應進行豬偽狂犬gpI抗體篩查，對抗體陽性者不予入群，保證入群后備母豬質量，進而達到控制、凈化種豬群的目的。（3）仔豬的免疫凈化。了解豬場仔豬偽狂犬母源抗體的消長規(guī)律，制定有效、個性化的免疫程序。（4）偽狂犬野毒陽性豬場。除對初生仔豬在1～3日齡進行滴鼻免疫外，還應在70、100日齡分別進行1次頸部接種，生產(chǎn)豬偽狂犬野毒抗體陰性后備豬。（5）技術依托。許多豬場尤其是中小規(guī)模豬場只注重免疫而不注重檢測，大規(guī)模豬場可以投資建設完備的檢測實驗室，技術人員及時對結果進行總結分析。中小規(guī)模豬場應找到可信任的技術依托平臺，進行免疫檢測、疫病咨詢，有疫情時及時溝通送診。

參考文獻：

[1]曾 強. 規(guī)模化豬場PRV感染檢測與免疫防制研究[D]. 廣州：華南農(nóng)業(yè)大學，2006.

[2]周小兵，吳桂鋒，顧愛民，等. 商品豬不同日齡偽狂犬（野毒）抗體跟蹤的體會[J]. 今日養(yǎng)豬業(yè)，2008（4）：27-28.

[3]劉明亞，陳 聞，李玉峰. 豬瘟和偽狂犬抗體水平對疫苗免疫的影響[J]. 畜牧與獸醫(yī)，2010，42（2）：68-70.

[4]童光志. 仔豬的免疫[J]. 國外獸醫(yī)學畜禽傳染病，1993，13（8）：30-32.

[5]孫圣福，陳 靜，馬慧玲，等. 不同日齡豬偽狂犬抗體跟蹤監(jiān)測與分析[J]. 中國畜牧獸醫(yī)，2011，38（4）：232-234.覃 軍，梁珠民，李軍成. 規(guī)模化豬場主要疫病抗體監(jiān)測與免疫效果分析 [J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學，2015，43（10）：264-266.