規模化豬場主要疫病抗體監測與免疫效果分析

覃軍　梁珠民　李軍成

摘要：為了解某規模化豬場豬瘟、口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒2型感染等豬場主要疫病的免疫效果，采集該豬場不同豬群80份血清樣品，用間接血凝試驗方法檢測豬瘟和口蹄疫的抗體水平，用ELISA方法檢測豬繁殖與呼吸綜合征和豬圓環病毒2型感染的陽性率。檢測結果，該場豬瘟抗體合格率達100.0%，口蹄疫抗體合格率達83.8%，豬繁殖與呼吸綜合征陽性率為46.0%，豬圓環病毒2型感染陽性率為40.0%。表明該豬場現行的豬瘟、口蹄疫免疫程序是可行的，而豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒2型感染免疫程序需要進一步優化。

關鍵詞：主要疫病；抗體監測；免疫效果；規模化豬場；豬

中圖分類號： S858.28 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2015）10-0264-03

豬瘟（CSF）、口蹄疫（FMD）、豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）、豬圓環病毒2型感染（PCV-2）是目前養豬生產上非常嚴重的病毒性傳染病，這4種傳染病中的任何一種一旦發生，都會給豬場造成很大的經濟損失。因此，在養豬生產上必須做好CSF、FMD、PRRS、PCV-2這4種傳染病的防疫工作，而免疫接種是目前預防這4種傳染病最主要的防疫措施。但是，生產上的免疫效果受多種因素的影響，如免疫程序是否合理、疫苗的質量及類型的選擇是否合理、疫苗保存及運輸的條件是否符合要求、動物的個體差異、飼養管理、動物的健康狀況等，實際的免疫效果存在不確定性，生產上有必要進行抗體水平監測，以了解免疫效果，做好免疫接種工作。本研究應用間接血凝試驗方法檢測豬瘟和口蹄疫的抗體水平，用ELISA方法檢測豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒2型感染的陽性率，結合其免疫程序對免疫效果進行分析，以期為廣大養豬生產者做好疫病防控工作提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 疫苗 豬瘟疫苗由中牧集團成都藥械廠生產；口蹄疫O型合成肽疫苗由中牧實業股份有限公司生產；豬繁殖與呼吸綜合征疫苗、豬圓環病毒2型疫苗均為購自市場上的商品疫苗。

1.1.2 試劑 豬瘟、口蹄疫間接血凝試驗診斷液購自中國農業科學院蘭州獸醫研究所；豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒2型ELISA抗體檢測試劑盒購自武漢科前生物公司。

1.1.3 儀器設備 96孔110V型醫用血凝板、移液槍、振蕩器、水浴鍋、酶標儀、5 mL 1次性注射器、碘酊棉球、酒精棉球、離心機等由廣西農業職業技術學院基礎獸醫實驗室提供。

1.1.4 血清樣本來源 所有血清樣本來源于廣西某500頭基礎母豬規模化豬場，該豬場豬瘟、口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒2型感染等的免疫程序見表1。

1.1.5 血清制作 隨機抽取20頭育肥豬、20頭保育豬、20頭妊娠母豬、10頭哺乳母豬及其所哺乳仔豬（2頭/窩）的全血，育肥豬、保育豬和哺乳仔豬從前腔靜脈竇采全血，妊娠母豬和哺乳母豬從耳緣靜脈采全血，用離心機分離血清，備檢。

1.2 方法

1.2.1 抗體檢測方法 豬瘟、口蹄疫抗體水平采用間接血凝試驗方法；豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒2型抗體水平采用Elisa方法；具體操作方法按照試劑盒說明書進行。本次檢測豬瘟抗體和口蹄疫抗體最大稀釋度為1 ∶ 256。

1.2.2 結果判定 豬瘟間接血凝試驗抗體效價小豬≥1 ∶ 16（4log2），母豬≥1 ∶ 64（6log2）為合格，口蹄疫O型抗體效價≥1 ∶ 128（7log2）為合格；豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒2型血清D630 nm值>0.42，判為陽性，樣品D630 nm值介于038～0.42之間，判為可疑，樣品D630 nm值<0.38，判為陰性。

1.3 數據處理

用對數法將原始數據轉換為以2為底的對數的絕對值表示不同豬群的豬瘟、口蹄疫的抗體效價，采用SPSS 19.0統計分析軟件對數據進行t檢驗，結果以“平均值+標準誤”表示。

2 結果與分析

2.1 豬瘟抗體檢測結果

2.1.1 哺乳母豬、哺乳仔豬、保育豬、育肥豬和妊娠母豬的豬瘟血清抗體效價 所檢80份血清，豬瘟抗體100%合格（表2）。

2.1.3 母豬、哺乳仔豬、保育豬、育肥豬的豬瘟血清抗體效價差異顯著性檢驗 母豬與哺乳仔豬的豬瘟血清抗體效價差異不顯著；母豬與保育豬的豬瘟血清抗體效價差異極顯著；母豬與育肥豬的豬瘟血清抗體效價差異顯著；哺乳仔豬與保育豬的豬瘟血清抗體效價差異顯著；哺乳仔豬與育肥豬的豬瘟血清抗體效價差異不顯著；保育豬與育肥豬的豬瘟血清抗體效價差異不顯著；母豬與商品豬群（哺乳仔豬、保育豬、育肥豬）的豬瘟血清抗體效價差異顯著（表4）。

2.2 口蹄疫抗體檢測結果

2.2.1 哺乳母豬、哺乳仔豬、保育豬、育肥豬和妊娠母豬的口蹄疫血清抗體效價 所檢80份血清，口蹄疫血清抗體838%合格（表5）。

2.2.2 血清中口蹄疫抗體效價分布 所檢血清口蹄疫抗體效價呈正態分布（表6）。

2.2.3 母豬、哺乳仔豬、保育豬、育肥豬的口蹄疫血清抗體效價差異顯著性檢驗 母豬與哺乳仔豬的口蹄疫血清抗體效價差異極顯著；母豬與保育豬的口蹄疫血清抗體效價差異極顯著；母豬與育肥豬的口蹄疫血清抗體效價差異極顯著；哺乳仔豬與保育豬的口蹄疫血清抗體效價差異不顯著；哺乳仔豬與育肥豬的口蹄疫血清抗體效價差異極顯著；保育豬與育肥豬的口蹄疫血清抗體效價差異極顯著；母豬與商品豬群（哺乳仔豬、保育豬、育肥豬）的口蹄疫血清抗體效價差異顯著（表4）。

2.3 豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測結果

豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測結果見表7。

3 討論與結論

從檢測結果看，該規模豬場所檢血清豬瘟抗體效價100%合格（小豬達到1 ∶ 16，母豬達到1 ∶ 64以上為免疫合格），口蹄疫抗體效價83.8%合格，豬繁殖與呼吸綜合征抗體陽性率為46.3%，豬圓環病毒抗體陽性率為40%。結合實際生產情況來看，該場豬群能很好地抵御豬瘟野毒株的侵襲，基本能抵御口蹄疫野毒株的侵襲，該豬場現行的豬瘟、口蹄疫免疫程序是切實可行的，而比較難抵御豬繁殖與呼吸綜合征野毒株和豬圓環病毒野毒株的侵襲，豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒感染免疫程序需要進一步優化。endprint

所檢80份血清，母豬與哺乳仔豬的豬瘟血清抗體效價差異不顯著，說明哺乳仔豬能通過母乳有效地獲得豬瘟母源抗體，在哺乳期間不需要對哺乳仔豬進行免疫接種，做好母豬的免疫接種即可。母豬與哺乳仔豬的口蹄疫血清抗體效價差異極顯著，說明哺乳仔豬不能通過母乳有效地獲得口蹄疫母源抗體，哺乳仔豬受口蹄疫病毒感染的風險很大，在疫情壓力較大的情況下應考慮選擇應激性較小的口蹄疫疫苗對哺乳仔豬進行免疫接種，加強執行其他的防疫措施，以提高哺乳仔豬的抵抗口蹄疫的能力。隨著時間的推移，哺乳仔豬體內豬瘟和口蹄疫抗體水平都逐漸下降，在21～25日齡時，由于對哺乳仔豬進行了豬瘟免疫接種而沒有進行口蹄疫免疫接種，所以哺乳仔豬與保育豬的豬瘟血清抗體效價差異顯著，口蹄疫血清抗體效價差異不顯著。在70、120日齡對育肥豬進行口蹄疫免疫接種，豬體內產生口蹄疫抗體，所以保育豬與育肥豬的口蹄疫血清抗體效價差異極顯著。雖然在55～60日齡對保育豬進行了豬瘟免疫接種，但保育豬與育肥豬的豬瘟血清抗體效價差異不顯著，這可能是緣于二者的豬瘟抗體都維持在一個相對穩定的水平，本結果與何健海等報道的[1-3]一致。母豬與商品豬群（哺乳仔豬、保育豬、育肥豬）的豬瘟、口蹄疫抗體效價差異顯著，說明經過多次免疫接種，確實可以提高母豬的抗體水平。無論是豬瘟還是口蹄疫的抗體效價都呈正態分布。

檢測80份血清豬瘟抗體，育肥豬、母豬達到較高抗體水平，保育豬抗體滴度中等，可能和體內存在某些免疫抑制因素有關。目前，慢性豬瘟在某些豬場還持續存在，帶毒母豬傳播給胎豬，先天帶毒的仔豬對疫苗產生免疫效果不理想，不表現明顯臨床癥狀卻成為持續傳染源。目前，影響豬瘟免疫效果的因素有：豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒2型感染、支原體肺炎和豬附紅細胞體病等；缺乏維生素或微量元素導致免疫系統發育不健全、某些藥物和霉菌毒素引起免疫抑制等；疫苗運輸、保存和使用過程、稀釋液pH值是否符合要求等。

檢測80份血清口蹄疫抗體母豬達到較高水平，基本能抵御一般血清型野毒株的侵襲，但部分育肥豬和保育豬抗體滴度仍偏低，有待加強免疫，以便達到均衡水平。

檢測80份血清豬繁殖與呼吸綜合征抗體陽性率為463%，與韋顯凱等的調查結果[4]相近。根據王連想等調查研究結果，經免疫接種的臨床健康豬場PRRS陽性率應達到7914%[5]，該豬場已經免疫過豬繁殖與呼吸綜合征弱毒疫苗，但是陽性率只有463%，明顯偏低，應加強對豬群進行豬繁殖與呼吸綜合征的免疫接種工作。

檢測80份血清豬圓環病毒抗體陽性率為40%，少部分樣品抗體滴度高，說明該豬場感染豬圓環病毒的壓力較大。建議加強對豬群免疫豬圓環病毒。豬圓環病毒經常是造成斷奶仔豬消瘦、發病的病因，盡管圓環商品苗不能殺滅體內原有野毒，但可減少帶毒豬對外排毒，降低種豬群以及其他斷奶仔豬的感染壓力。近年來，圓環病毒引起與母豬繁殖障礙以及保育豬呼吸道綜合癥等有關的問題逐漸被重視，包括弱仔、死胎、母豬返情、配不上以及繼發細菌性或病毒性拉稀等，建議豬場選擇優質毒株以及良好免疫佐劑生產的圓環病毒疫苗對全群豬免疫并至少半年檢查疫苗抗體動態水平。

一般認為，在豬繁殖與呼吸綜合征和豬圓環病毒感染的情況下，會導致豬免疫抑制甚至失敗，在本次所檢測的項目中，口蹄疫和豬瘟的抗體都達到了較高的水平，說明通過加強飼養管理和保健等工作，是可以取得較好的防疫效果的。該規模豬場1年來沒有發生過豬瘟疫情，但受到豬口蹄疫的威脅，發生了嚴重的豬繁殖與呼吸綜合征和豬圓環病毒病。豬繁殖與呼吸綜合征的主要表現為妊娠母豬食欲廢絕，體溫41.5 ℃，呼吸困難，早產，產下死胎、木乃伊胎；產房哺乳仔豬體溫41 ℃，食欲不振，呼吸極度困難，耳朵發紺，被毛粗亂，下痢。采早產胎兒和發病哺乳仔豬的肺臟和淋巴結送到實驗室采用PCR方法檢測，確定所發生的疫病為豬繁殖與呼吸綜合征。豬圓環病毒病的主要表現為仔豬斷奶后1～2周發病，病豬食欲下降，逐漸消瘦，被毛粗亂，下痢；部分豬皮膚有紅色丘狀物，采病豬的淋巴結、腎臟和脾臟送到實驗室采用PCR方法檢測，確定所發生的疫病為豬圓環病毒2型感染。該豬場豬群的健康狀況與本次抗體水平檢測結果相吻合。

目前，在豬防疫方面缺乏全國統一的免疫程序，有實力的豬場應該定期抽取一定比例的血清樣品進行抗體水平監測[6]，評估免疫效果，不斷優化免疫程序，制定一份適合本場的免疫程序，同時也要加強飼養管理和保健等工作，以期取得更好的防疫效果。小規模豬場或個體散養戶應加強與大規模豬場的技術交流，盡可能優化自己的防疫措施。

參考文獻：

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[3]楊銘芬，黃 苑，陳極炳，等. 廣西部分規模化豬場豬瘟抗體監測及免疫效果分析[J]. 廣西農業科學，2009，40（12）：1615-1617.

[4]韋顯凱，鄒聯斌，屈素潔，等. 廣西部分地區豬群主要疫病免疫抗體監測和免疫效果分析[J]. 中國畜牧獸醫，2010，37（1）：161-163.

[5]王連想，任裕其，孫彥偉，等. 豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測結果與分析[C]//中國畜牧獸醫學動物傳染病學分會. 中國畜牧獸醫學會動物傳染病學分會第三屆豬病防控學術研討會論文集. 北京：中國畜牧獸醫學動物傳染病學分會，2008：156-158.

[6]呂立新，何孔旺，倪艷秀，等. 規模豬場不同日齡仔豬O型口蹄疫母源抗體消長規律及免疫試驗[J]. 江蘇農業科學，2011，39（5）：304-306. 木爾扎提·阿勒騰別克，王銀龍，加米拉，等. 理囊散對奶牛產后子宮復舊的影響[J]. 江蘇農業科學，2015，43（10）：267-271.endprint