糖尿病腎病患者血清胱抑素C、β2-微球蛋白水平及其與eGFR的相關(guān)性

糖尿病腎病患者血清胱抑素C、β2-微球蛋白水平及其與eGFR的相關(guān)性

劉文花劉海霞1胡文博

(青海省人民醫(yī)院腎內(nèi)科，青海西寧810007)

摘要〔〕目的探討糖尿病腎病所致慢性腎臟病(CKD)患者不同時期血清胱抑素(Cys)C、β2-微球蛋白(β2-MG)的變化特點及臨床意義。方法應(yīng)用免疫比濁法分別檢測各受試對象血清Cys C、β2-MG濃度，采用苦味酸法檢測血清肌酐(Scr)。根據(jù)Scr水平推算腎小球濾過率(eGFR)，按NKF-K/DOQI分期分為5期。結(jié)果Ⅰ期患者血清Cys C、β2-MG及Scr水平與健康對照組相比均無統(tǒng)計學(xué)意義；Ⅱ期患者血清Cys C、β2-MG與健康對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，Scr水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，Cys C與CKDⅠ期相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。自Ⅲ期開始，各檢測指標與健康對照組及CKDⅠ期相比均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。患者血清Cys C、β2-MG與eGFR均呈負相關(guān)(r=-0.712、-0.692)。結(jié)論血清Cys C與β2-MG不僅可作為DN患者早期評價GFR的敏感指標，且血清Cys C與β2-MG的血液濃度水平對初步估計CKD患者腎損害的程度、指導(dǎo)臨床分期有一定臨床意義。

關(guān)鍵詞〔〕胱抑素C(Cys C)；β2-微球蛋白(β2 -MG)；糖尿病腎病；估算腎小球濾過率

中圖分類號〔〕R58〔文獻標識碼〕A〔

通訊作者：胡文博(1962-)，男，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，主要從事腎臟病學(xué)研究。

1青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院研究生

第一作者：劉文花(1977-)，女，副主任醫(yī)師，主要從事腎臟疾病臨床研究。

近年來，糖尿病引起的諸多并發(fā)癥越來越受到人們的普遍關(guān)注，糖尿病的慢性并發(fā)癥可引起全身重要臟器的損傷，主要危險靶器官是心、腦、腎。而糖尿病腎病(DN)則是糖尿病所致微血管病變中極其重要、危險的疾病。DN是糖尿病所致嚴重微血管病變，是以腎小球硬化為主要特征，主要表現(xiàn)為蛋白尿、高血糖、水腫、漸進性腎損害，晚期引起腎衰竭，其嚴重性僅次于心、腦血管病，是糖尿病患者的主要死因。研究已證明胱抑素(Cys)C、β2-微球蛋(β2-MG)是新的反映腎功能損害的內(nèi)源性標志物，與其他內(nèi)源性標志物相比具有顯著優(yōu)越性〔1，2〕。本實驗測定DN患者不同時期的CysC、β2-MG水平，觀察CysC、β2-MG在不同階段變化特點、研究其與DN不同階段估算腎小球濾過率(eGFR)的相關(guān)性。

1資料與方法

1.1研究對象納入標準：選取2012年10月至2013年12月期間在我院腎內(nèi)科住院明確診斷DN患者。排除標準：既往有腎臟病、高血壓、高脂血癥、甲狀腺功能異常，肝臟疾病，惡性腫瘤，結(jié)締組織疾病，獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS) 的患者，應(yīng)用大劑量糖皮質(zhì)激素者及其他代謝性疾病的患者。入選對象：根據(jù)納入標準和排除標準，共獲取病例300例，男148例，女152例，年齡18～80〔平均(47.07±13.41)〕歲。另隨機抽取我院體檢中心健康體檢者110例作為對照組，男62例，女48例，平均年齡(44.45±13.56)歲，既往無特殊病史，此次體檢無明顯異常者。分期依據(jù)：研究對象臨床分期采用美國NKF-K/DOQI指南CKD分期〔3〕：Ⅰ期：腎損害伴GFR正常或升高，eGFR≥90 ml·min-1·1.73 m-2；Ⅱ期：腎損害伴GFR輕度降低，eGFR為60～89 ml·min-1·1.73 m-2；Ⅲ期：腎損害，GFR中度降低，eGFR為30～59 ml·min-1·1.73 m-2；Ⅳ期：GFR重度降低，為15～29 ml·min-1·1.73 m-2；Ⅴ期：終末期腎病(ESRD)，eGFR<15 ml·min-1·1.73 m-2。

1.2樣本獲取①測量記錄臨床資料。②血清標本采集：被檢者禁食8～10 h，晨起抽取肘靜脈血5 ml立即加入預(yù)冷的EDTA促凝管，靜置2 h，以3 000 r/min離心10 min后分離血清，-70℃恒溫保存待測。

1.3相關(guān)指標檢測

1.3.1血清CysC的測定采用北京豪邁生物工程有限公司提供的CysC測定試劑盒，操作方法：將3 μl樣本和250 μl R1混合，37℃孵育5 min，再加入R2 50 μl混勻后，立即在570 nm波長下讀第一次吸光度值(A1)，37℃孵育5 min，570 nm波長下讀第二次吸光度值(A2)，計算ΔA=A2-A1。與同樣處理的標準進行比較，求出樣本中CysC含量。

1.3.2血清β2-MG測定采用北京豪邁生物工程有限公司提供的β2-MG測定試劑盒，操作方法：將3 μl樣本和240 μl R1混合，37℃孵育5 min，再加入R2 60 μl混勻后，立即在570 nm波長下讀第一次吸光度值(A1)，37℃孵育5 min，540 nm波長下讀第二次吸光度值(A2)，計算ΔA=A2-A1。與同樣處理的標準進行比較，求出樣本中β2-MG含量。

1.3.3血清肌酐檢測采用德國羅氏診斷有限公司生產(chǎn)的肌酐診斷試劑盒，由我院檢驗科應(yīng)用羅氏Cobas C8000全自動生化分析儀采用苦味酸法檢測。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行one-wayANOVA分析和LSD-t檢驗，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析法。

2結(jié)果

2.1各指標檢測結(jié)果Ⅰ期患者各檢測指標與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.01)；Ⅱ期患者血清CysC和β2-MG與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，肌酐無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.01)，CysC與CKDⅠ期比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；自CKDⅢ期開始，患者各檢測指標與對照組及CKDⅠ期比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

2.2CysC、β2-MG與eGFR的相關(guān)性分析300例DN患者血清CysC(r=-0.712,P<0.01)、β2-MG(r=-0.092,P<0.01)與eGFR呈中度負相關(guān)。

表1　各組檢測指標結(jié)果比較( ± s)

與對照組比較：1)P<0.01；與CKDⅠ期比較：2)P<0.01；與CKDⅡ期比較：3)P<0.01；與CKDⅢ期比較：4)P<0.01；與CKDⅣ期比較：5)P<0.01

3討論

近年來隨著糖尿病發(fā)病率的不斷升高，DN也隨之逐漸攀升，不僅嚴重威脅到患者的生命和生存質(zhì)量，也給整個社會的發(fā)展帶來了沉重的經(jīng)濟負擔(dān)。因此，能夠早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷DN，做到早預(yù)防、早干預(yù)、早治療顯得尤為重要。

一直以來eGFR是評價腎功能損害的金標準，但是目前臨床尚不能直接測定eGFR〔1〕，且DN在Ⅲ期以前GFR基本正常，這給臨床上早期發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病帶來了困難。而CysC和β2-MG是新的能夠反映eGFR的內(nèi)源性標志物，與其他內(nèi)源性標志物相比有顯著優(yōu)越性，對腎損害的診斷有重要價值〔2，3〕。李莉等〔4〕研究證實，在腎小球濾過功能輕度受損的患者中，血清CysC水平比尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)更能早期反映腎小球濾過功能的損害，是更為敏感的指標。血β2-MG 是一種小分子球蛋白，不易于血漿蛋白結(jié)合，合成穩(wěn)定，不受性別、年齡、肌肉量影響〔5〕，因其可自由通過腎小球，然后在近曲小管內(nèi)幾乎全部被重吸收，故當(dāng)腎小球濾過功能受損時其血中濃度即可升高，成為目前測定腎小球濾過功能最靈敏的指標之一〔6〕。

本研究結(jié)果顯示，CKDⅠ期患者血清CysC、β2-MG及Scr水平與對照組相比均無明顯差異。CKDⅡ期患者血清CysC與健康對照組及CKDⅠ期相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，β2-MG與健康對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，Scr水平差異則無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。即CKD患者腎功能輕度損傷(eGFR>60 ml·min-1·1.73 m-2)時，患者血清CysC與β2-MG水平即可升高，而Scr水平與腎功能正常者無顯著差異，提示Scr水平無法有效的反映早期糖尿病腎病患者腎損害，而CysC與β2-MG更為有效。結(jié)果中顯示，自CKDⅢ期開始，患者血清CysC、β2-MG和Scr水平均升高，與報道一致〔7～12〕。 相關(guān)性分析顯示，患者血清CysC和β2-MG水平均為反映腎小球濾過功能的良好指標，與腎功能損害程度密切相關(guān)，提示患者CysC和β2-MG水平越高，腎功能越差。而且，本研究結(jié)果顯示，血清CysC與eGFR的相關(guān)系數(shù)較β2-MG高，提示患者血清CysC比β2-MG更能敏感準確地反映患者腎臟損傷的程度。

綜上所述，CysC和β2-MG是反映DN患者腎損害的敏感指標，在DN患者中，CysC和β2-MG比Scr更能早期、準確地反映出腎功能損害程度。尤其是CKD2期Scr尚處于代償狀態(tài)或肌肉量少等不宜應(yīng)用Scr評價腎損害的患者，彌補了Scr的不足。但據(jù)報道，甲狀腺功能異常患者及應(yīng)用大量糖皮質(zhì)激素的患者可影響機體CysC的水平〔13〕，而惡性腫瘤、肝炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等可影響β2-MG水平，故排除上述因素的影響后，檢測CysC和β2-MG對于早期發(fā)現(xiàn)腎功能損害和準確評價糖尿病引起腎功能不全各期腎損害程度有一定的指導(dǎo)意義。

4參考文獻

1孫倩倩，談敏，常虹.腎小球濾過率在糖尿病患者腎功能評估中的臨床價值〔J〕.安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2011；46(1)：91-4.

2李云生，曾愛平，戴再友，等.240例腎臟疾病患者血清胱抑素C的變化及臨床相關(guān)研究〔J〕.中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2004；5(10) ：598-9.

3Dharnidharka VR，Kwon C，Stevens G.Serum cystatin C is superior to serum creatinine as a marker of kidney function；a meta-analysis〔J〕.Am J Kidney Dis，2002；40(2)：221-6.

4李莉，劉凌云，趙元明，等.測定血清胱抑素C在腎臟疾病中的診斷價值〔J〕.中華全科醫(yī)學(xué)，2011；9(3)：457-8.

5陳愛珍，孫秀麗.CystatinC和β2微球蛋白檢測在腎臟病中的應(yīng)用〔J〕.醫(yī)學(xué)綜述，2009；15(17)：2583-6.

6伍松姣，顧國龍.糖尿病腎病早期診斷的實驗室指標〔J〕.內(nèi)科，2007；2(4)：532-4.

7王海燕，王梅，左力，等.慢性腎臟病及透析的臨床實踐指南〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：7-8.

8Hoek FJ，Kemperman FA，Krediet RT.A comparison between cystatin C，plasma creatinine and the cockcroft and gault formula for the estimation of glomerular filtration rate〔J〕.Nephrol Dial Transplant，2003；18(10)：2024-33.

9Oyabu C，Hayashi N，Sugiyama D，etal.Usefulness of serum cystatin C for the diagnosis of impaired renal function〔J〕.Rinsho Byori，2006；54(12)：1204-8.

10Adeyemi EO，Obineche EN，Abdulle AS，etal.Evaluation of plasma Beta-2-microglobulin in patients with the nephrotic syndrome〔J〕.Saudi J Kidney Dis Transpl，2001；12(2)：151-6.

11Kazama JJ，Kutsuwada K，Ataka K，etal.Serum cystatin C reliably detects renal dysfunction in patients with various renal diseases〔J〕.Nephron，2002；91(1)：13-20.

12Bokenkamp A，van Wijk JA，Lentze MJ，etal.Effect of corticosteroid therapy on serum cystatin C and beta2-microglobulin concentrations〔J〕.Clin Chem，2002；48(7)：1123-6.

13Wiesli P，Schwegler B，Spinas GA，etal.Serum cystatin C is sensitive to small changes in thyroid function〔J〕.Clin Chim Acta，2003；338(1-2)：87-90.

〔2014-06-17修回〕

(編輯曹夢園)