1 764例血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析

孫 茜，王 聰，賈 曦，孫雅堃，陳妹紅

(1.河北省保定市第一中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北保定071000;2.河北省保定市第一中心醫(yī)院心電圖室，河北保定071000)

1 764例血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析

孫 茜1，王 聰1，賈 曦1，孫雅堃1，陳妹紅2*

(1.河北省保定市第一中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北保定071000;2.河北省保定市第一中心醫(yī)院心電圖室，河北保定071000)

目的了解血培養(yǎng)中常見(jiàn)病原菌的組成以及各類病原菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性，為臨床醫(yī)生合理選用抗菌藥物解決患者病痛提供依據(jù)。方法 收集臨床送檢的血培養(yǎng)標(biāo)本，應(yīng)用法國(guó)生物梅里埃公司BacT/Alert3D全自動(dòng)血培養(yǎng)儀、配套培養(yǎng)基、鑒定儀系統(tǒng)鑒定菌種及藥敏試驗(yàn)。結(jié)果1 764份血培養(yǎng)分離出病原菌179株，其陽(yáng)性率為10.1%，其中革蘭陽(yáng)性菌68株(38.0%)，革蘭陰性菌111株(62.0%);病原菌中占首位的是大腸埃希菌，其次是凝固酶陰性菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌。藥敏結(jié)果顯示絕大部分檢出的病原菌均有耐藥情況出現(xiàn)。結(jié)論臨床醫(yī)生應(yīng)重視患者早期的血培養(yǎng)檢驗(yàn)，并嚴(yán)格根據(jù)藥敏結(jié)果合理使用抗菌藥物。對(duì)血培養(yǎng)的檢測(cè)應(yīng)更加規(guī)范，從而提高病原菌的檢出率，并及時(shí)檢測(cè)病原菌變化及耐藥趨勢(shì)。

無(wú)菌培養(yǎng);抗藥性，細(xì)菌;微生物敏感性試驗(yàn)

隨著創(chuàng)傷性治療技術(shù)在醫(yī)院的應(yīng)用，治療中大量使用廣譜抗生素和激素使血流感染的發(fā)生率逐漸升高，耐藥菌株也隨之增加，給臨床治療患者感染帶來(lái)了一定困難。一般情況下由口腔手術(shù)或常規(guī)牙科操作，感染的下尿路插管、膿腫切塊引流及各種內(nèi)置器械的細(xì)菌生長(zhǎng)而使細(xì)菌一過(guò)性侵入血流，導(dǎo)致短暫的菌血癥對(duì)健康人影響不大，但對(duì)機(jī)體免疫力低下或伴有其他嚴(yán)重疾病的患者可產(chǎn)生嚴(yán)重后果［1］。血培養(yǎng)是檢測(cè)患者體內(nèi)是否有病原菌最常用的一種方法，也是最簡(jiǎn)單最快速的。血培養(yǎng)檢查病原菌對(duì)診斷菌血癥、感染性心內(nèi)膜炎、臨床不明原因感染、假體植入后感染或插管相關(guān)性菌血癥等疾病有一定的指導(dǎo)意義。陽(yáng)性的血培養(yǎng)結(jié)果不僅能確立而且證實(shí)患者的疾病是由感染病原菌引起的，更重要的是血培養(yǎng)還可以提供病原菌對(duì)于抗生素的敏感性試驗(yàn)，從而優(yōu)化抗生素治療指導(dǎo)醫(yī)生合理用藥。本研究旨在為了我院患者病原菌的組成和分布以及對(duì)常用抗菌藥物的耐藥情況。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 收集2012年4月—2013年2月我院患者血液標(biāo)本共1 764份，重復(fù)送檢者相同結(jié)果不予統(tǒng)計(jì)。

1.2 儀器與試劑 法國(guó)梅里埃BacT/Alert3D全自動(dòng)血培養(yǎng)儀，血培養(yǎng)瓶，VITEK-32全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)，配套藥敏卡及藥敏紙片。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本的采集與處理 患者高熱寒戰(zhàn)時(shí)及抗生素治療前或下一次使用抗生素前，在嚴(yán)格無(wú)菌的條件下抽取血液標(biāo)本。兒童采血3～5 mL注入兒童瓶，成人采血5～10 mL注入成人瓶，嬰幼兒采血量不應(yīng)超過(guò)其總血量的1%，混勻后立即送檢。血培養(yǎng)儀報(bào)告陽(yáng)性后，轉(zhuǎn)種血平板與麥康凱平板，并涂片革蘭染色鏡檢(鏡檢結(jié)果應(yīng)及時(shí)報(bào)告臨床醫(yī)生)，放入35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24 h。培養(yǎng)出細(xì)菌挑取單個(gè)菌落進(jìn)行涂片、革蘭染色、鏡檢。陰性標(biāo)本培養(yǎng)7 d后仍無(wú)微生物生長(zhǎng)，經(jīng)盲種后證實(shí)無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。

1.3.2 菌株鑒定及藥敏方法 使用VITEK全自動(dòng)鑒定系統(tǒng)，部分菌株采用K-B方法。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌 (ATCC25922)、銅綠假單胞菌(ATCC27853)、金黃色葡萄球菌(ATCC29213)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 將藥敏結(jié)果輸入WHONET 5.6中進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，同一患者的相同菌株只作一次分析。

2 結(jié) 果

2.1 病原菌分布情況 從標(biāo)本中分離出病原菌株共179株，陽(yáng)性率為10.1%。其中革蘭陽(yáng)性菌68株(38.0%)，革蘭陰性菌111株(62.0%)。

2.2 病原菌的藥敏分析

2.2.1 革蘭陽(yáng)性菌的藥敏分布 葡萄球菌61株是檢出率最多的革蘭陽(yáng)性菌，占檢出菌的34.0%，鏈球菌與腸球菌所占比例相對(duì)較少。葡萄球菌中凝固酶陰性菌占大多數(shù)，金黃色葡萄球菌8株，僅占葡萄球菌屬的13.1%。主要革蘭陽(yáng)性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥情況，見(jiàn)表1。

2.2.2 革蘭陰性菌的藥敏分布 在革蘭陰性菌中大腸埃希菌63株為首要致病菌，占總檢出菌的35.2%，其次為肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、沙雷菌。主要革蘭陰性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥情況，見(jiàn)表2。

表2 主要革蘭陰性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率Table2 Main gram-negative bacteria to antimicrobial drugs (株數(shù)，%)

3 討 論

血流感染已經(jīng)成為臨床常見(jiàn)且嚴(yán)重的感染性疾病，了解血流感染的病原菌及耐藥性，對(duì)臨床診斷和指導(dǎo)用藥，提高治愈率，降低病死率有重要意義［2］。本研究臨床送檢標(biāo)本共1 764份，分離出病原菌179株，陽(yáng)性率為10.1%，與報(bào)道接近［3］，其中革蘭陽(yáng)性菌68株(38.0%)，革蘭陰性菌111株(62.0%);大腸埃希菌、凝固酶陰性菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌是血培養(yǎng)陽(yáng)性主要致病菌。

隨著近年來(lái)醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展進(jìn)步，侵入性治療和檢查的增多破壞了人體正常防御機(jī)制，凝固酶陰性葡萄球菌成為血流感染第一位的病原菌［4］。該菌可產(chǎn)生大量的細(xì)胞間脂多糖黏附素與細(xì)胞外黏液樣物質(zhì)，可通過(guò)不同途徑吸附在導(dǎo)管表面，因此也可引起導(dǎo)管相關(guān)感染［5］。有資料顯示，血培養(yǎng)中分離凝固酶陰性葡萄球菌被認(rèn)為污染或者可疑污染比例可達(dá)44.1%［6］。所以，應(yīng)結(jié)合患者是否具有菌血癥的癥狀(如白細(xì)胞計(jì)數(shù)是否升高等)綜合判斷［7］。

本研究革蘭陰性菌的感染以大腸埃希菌居多，其次為肺炎克雷伯菌和銅綠假單胞菌，這與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致［8］。革蘭陰性桿菌的耐藥機(jī)制種類繁多，產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌的檢出率為34.63%，產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯菌的檢出率為12.85%。產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)亞胺培南、美洛培南、頭孢替坦、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌藥敏感，可作為治療性藥物。但大多數(shù)的革蘭陰性菌對(duì)青霉素類和一、二代頭孢菌素的耐藥率較高均在30%以上，對(duì)氨芐西林的耐藥率最高，在75%以上。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶腸桿菌耐藥性高于非產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶［9］。

由于各類侵入性治療、廣譜抗生素的廣泛使用，血流感染中的細(xì)菌耐藥率也在上升，給臨床治療帶來(lái)很大的困難［10］。臨床醫(yī)生應(yīng)高度重視細(xì)菌的培養(yǎng)和藥敏結(jié)果，仔細(xì)研究病原菌的耐藥率和藥敏結(jié)果，了解病原菌的耐藥規(guī)律結(jié)合患者的自身情況合理使用抗菌藥物，以減少?gòu)V譜抗生素的使用，使耐藥菌株產(chǎn)生的幅度降低，尤其是多重耐藥菌株的產(chǎn)生。

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(本文編輯:劉斯靜)

Distribution and drug resistance of pathogenic bacteria in 1 764 blood samples by culture

SUN Qian1，WANG Cong1，JIA Xi1，SUN Ya-kun1，CHEN Mei-hong2*
( 1． Department of Laboratory，the First Central Hospital of Baoding City，Hebei Province， Baoding 071000，China; 2． Department of Electrocardiographic Room，the First Central Hospital of Baoding City Hebei Province，Baoding 071000，China)

Objective To understand the composition of the common pathogens in blood culture and a variety of pathogens to antimicrobial agents in the hospital.To offer the basis for the rational use of antimicrobial drugs to solve the patients＇pain.MethodsThe collection involved 1 764 blood samples. France bioMérieux BacT/Alert3D fully automatic blood culture instrument，supporting medium，identification system were used to identify the pathogens and susceptibility test.ResultsA total of1 764 blood samples showed the culture positive rate 10.1%，and there were 179 isolated positive bacteria，among which gram-positive bacteria were 68(38.0%)，gram-negative bacteria 111(62.0%)，at the first place of pathogens as E.coli followed by coagulase-negative bacteria，Klebsiella pneumonia，Pseudomonas aeruginosa.The susceptibility results showed that most of the detected pathogens were resistant to different anti-bacteria agents.ConclusionClinicians should pay attention to early blood culture of patients，and strictly stick to the rational use of antimicrobial agents based on susceptibility results.

axenic culture;drug resistance，bacterial;microbial sensitivity tests

R37

A

1007-3205(2015)02-0177-04

2014-04-02;

2014-05-19

孫茜(1972-)，女，河北保定人，河北省保定市第一中心醫(yī)院副主任檢驗(yàn)師，醫(yī)學(xué)碩士，從事臨床檢驗(yàn)學(xué)研究。

*通訊作者

10.3969/j.issn.1007-3205.2015.02.020