黃蘑多糖對(duì)多器官衰老小鼠氧自由基水平的影響

黃蘑多糖對(duì)多器官衰老小鼠氧自由基水平的影響

陸艷娟李曉梅李曉林

(吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，吉林長(zhǎng)春130021)

摘要〔〕目的研究黃蘑多糖對(duì)多器官衰老小鼠腦、心、肝、腎組織中谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽還原酶(GR)的影響。方法比色分析法測(cè)GSH、 GR含量變化。結(jié)果黃蘑多糖小鼠腦、心、肝、腎GSH含量明顯高于對(duì)照組(P<0.01;P<0.05); 黃蘑多糖小鼠腦、心、肝、腎GR含量明顯高于對(duì)照組(P<0.01;P<0.05)。結(jié)論黃蘑多糖能提高衰老小鼠機(jī)體GSH、 GR活力，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。

關(guān)鍵詞〔〕黃蘑多糖；多器官衰老;谷胱甘肽；谷胱甘肽還原酶

中圖分類號(hào)〔〕R28〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

通訊作者：李曉梅(1959-)，女，研究員，主要從事生物化學(xué)與分子生物學(xué)教學(xué)與實(shí)驗(yàn)研究。

第一作者：陸艷娟(1963-)，女，高級(jí)工程師，主要從事生物化學(xué)與分子生物學(xué)教學(xué)與實(shí)驗(yàn)研究。

人體衰老及與之相關(guān)的老年疾病呈上升趨勢(shì)〔1〕。機(jī)體抗氧化酶活性隨著年齡的增長(zhǎng)不斷下降，氧自由基的清除能力不斷減弱，從而影響組織正常功能，成為衰老退行性變的重要因素〔2，3〕。本實(shí)驗(yàn)觀察多器官衰老小鼠谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽還原酶(GR)受黃蘑多糖的影響，探討黃蘑多糖組分抗衰老作用機(jī)制。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康雄性清潔級(jí)小鼠30只，12月齡，體重(50±5)g,本校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為對(duì)照組和堿溶液黃蘑多糖(Fb-2b)組、水溶性黃蘑多糖(Fw-2b)組，每組10只。黃蘑多糖組按40 mg·kg-1·d-1劑量灌服黃蘑多糖Fb-2b、黃蘑多糖Fw-2b，對(duì)照組灌服生理鹽水0.5 ml/只，連續(xù)6 w。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1試劑及儀器黃蘑多糖Fb-2b、Fw-2b由本校生物化學(xué)教研室提供。GSH、 GR試劑盒購于南京建成生物工程公司。冷凍高速離心機(jī)，德國產(chǎn)；722S型分光光度計(jì)，上海分析儀器廠。

1.2.2黃蘑多糖Fb-2b和Fw-2b的提取、分離和組成分析吉林省長(zhǎng)白山野生黃蘑子實(shí)體，70℃通風(fēng)干燥，100目粉碎。乙醇浸泡去除醇性低分子物質(zhì)，沸水浴提取水溶性多糖，DEAE纖維素離子交換層析分離堿性多糖，過濾法分離出不同分子量的多糖Fb-2b主峰，氣相色譜測(cè)定多組分構(gòu)成糖。用氨基酸分析儀對(duì)經(jīng)鹽酸處理的糖蛋白分解產(chǎn)物進(jìn)行氨基酸組分分析，用硫酸-酚法測(cè)定總糖含量，改良Lowry氏法測(cè)定總蛋白含量。

1.2.3GSH、 GR測(cè)定與取材各組動(dòng)物6 w實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死，迅速取所需的腦、心、肝、腎組織，生理鹽水漂洗，濾紙吸干殘液，制成10%組織勻漿，4℃，10 000 r/min離心15 min，上清液測(cè)定GSH、 GR，按試劑盒說明書操作，同時(shí)Lowry氏法測(cè)定蛋白質(zhì)含量。主要觀察指標(biāo)：各組小鼠腦、心、肝、腎組織GSH、 GR含量變化。

2結(jié)果

黃蘑多糖組小鼠腦、心、肝、腎GSH、GR含量明顯高于對(duì)照組(P<0.01，P<0.05)。見表1，表2。

表1各組小鼠腦、心、肝、腎GSH含量變化

組別腦心肝腎對(duì)照組11.89±1.368.76±0.447.53±0.2320.05±1.54Fb-2b組13.23±1.211)10.01±0.752)8.67±0.352)24.74±1.691)Fw-2b組15.80±0.982)9.98±0.602)7.95±0.212)23.21±1.011)

與對(duì)照組比較：1)P<0.05，2)P<0.01，下表同

表2各組小鼠腦、心、肝、腎GR含量變化

組別腦心肝腎對(duì)照組3.44±0.472.77±0.494.31±0.313.62±0.58Fb-2b組3.98±0.542)4.17±0.352)4.69±0.111)4.19±0.482)Fw-2b組3.86±0.281)3.18±0.361)4.59±0.211)4.14±0.292)

3討論

黃蘑又名金頂側(cè)耳、金頂蘑，主要產(chǎn)于長(zhǎng)白山及大興安嶺地區(qū)秋霜期之前，具有疏風(fēng)活絡(luò)、強(qiáng)筋壯骨作用。現(xiàn)今，黃蘑多糖研究日益受到關(guān)注，有學(xué)者甚至提出21世紀(jì)是多糖世紀(jì)。研究表明，黃蘑多糖具有生物活性，具有包括免疫調(diào)節(jié)、降血糖、降血脂、抗腫瘤、抗輻射、抗衰老作用〔4～6〕；又是細(xì)胞和細(xì)胞器結(jié)構(gòu)的重要部分，是人體細(xì)胞或器官維系正常功能不可缺少的重要成分。自由基的含量變化是人體系統(tǒng)衰老的重要指標(biāo)之一，老年人體內(nèi)抗氧化物酶均隨增齡而有所減少〔7〕。研究認(rèn)為，在正常情況下，機(jī)體自由基的產(chǎn)生和消失處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，即自由基在不斷產(chǎn)生，同時(shí)也不斷被消除，以維持機(jī)體正常代謝〔8〕。黃蘑多糖是含葡萄糖，為主要構(gòu)成糖的β-D-葡聚糖，具有提高抗氧化酶活性的作用，本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)多糖Fb-2b 、多糖Fw-2b能夠明顯提高衰老小鼠重要組織中GSH、GR含量。

多糖Fb-2b 、多糖Fw-2b具有多種生理功能，是黃蘑中重要的生物活性物質(zhì)，這種多糖表現(xiàn)出明顯的抗氧化性，即對(duì)氧自由基(·O2-、·O2、H2O2)的清除能力。本實(shí)驗(yàn)證明，黃蘑多糖能明顯增強(qiáng)老齡小鼠腦、心、肝、腎組織抗氧化能力，提高GSH、 GR活性，具有延緩細(xì)胞衰老的作用。

4參考文獻(xiàn)

1沈明花，李巍，金梅花.小黃蘑多糖對(duì)H22小鼠的抗腫瘤作用研究〔J〕.中草藥，2013;44(17):2433-6.

2黃月，李巍，王昱嬌，等.小黃蘑多糖的抗氧化作用〔J〕.延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào),2012;35(2):91-3.

3唐曉丹，張偉，叢景香，等.黃蘑多糖提取工藝及純化研究〔J〕.食品科技,2011;36(3)：155-8.

4馬巖，張銳，于小風(fēng)，等. 黃蘑多糖提取物的抗肝癌作用及其機(jī)制〔J〕.吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2005;31(6)：886-9.

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6李曉林，孫國光，馬巖. 黃蘑多糖不同組分對(duì)D-半乳糖致衰老模型小鼠SOD、MDA的影響〔J〕.中國老年學(xué)雜志,2006;26(1)：86-8.

7沈明花，崔海丹，王欣彤.榛黃多糖的抗氧化作用研究〔J〕.食品科技，2010；35(5)：77-9.

8馬巖，馬影喆，張家穎，等.黃蘑多糖Fb對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用〔J〕.吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2005;31(5)：692-5.

〔2015-06-07修回〕

(編輯曲莉/滕欣航)