老年人群呼吸道感染病原體IgM檢測(cè)結(jié)果

·呼吸、消化系統(tǒng)疾病·

老年人群呼吸道感染病原體IgM檢測(cè)結(jié)果

陳克平1高天麗1李雅1時(shí)彥楊傳坤李麗1

(東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心，江蘇南京210009)

摘要〔〕目的了解本院老年人群呼吸道感染病原體的流行病學(xué)特點(diǎn)，為指導(dǎo)臨床診斷和治療、制定預(yù)防措施提供依據(jù)。方法借助呼吸道感染病原體IgM試劑，采用間接免疫熒光技術(shù)同時(shí)檢測(cè)呼吸道感染患者9種病原體：肺炎支原體(MP)、乙型流感病毒(INFB)、副流感病毒(PIVs)、嗜肺軍團(tuán)菌(LP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(INFA)、肺炎衣原體(CP)、腺病毒(ADV)以及Q熱立克次體(COX)觀察其季節(jié)性變化。結(jié)果1 063例老年人群中共檢出陽(yáng)性259例，陽(yáng)性率為24.34%。老年人群呼吸道感染的主要病原體為MP、INFB、PIVs、LP與RSV。MP的感染率最高，為15.90%；而INFB感染存在季節(jié)性差異(P<0.05)。3.5%的陽(yáng)性患者發(fā)生了混合感染，主要混合感染類型為MP與INFB。結(jié)論MP為老年人群呼吸道感染的主要病原體。老年人群呼吸道感染應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注MP的診斷與防治，并在INFB高發(fā)季節(jié)注意混合感染。

關(guān)鍵詞〔〕呼吸道感染；病原體；肺炎支原體；乙型流感病毒

中圖分類號(hào)〔〕R44〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)

1東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院

第一作者：陳克平(1977-)，男，博士，主管技師，主要從事臨床分子診斷、老年癡呆分子機(jī)制研究。

DetectionofIgMofpathogenscausingrespiratorytractinfectioninelderlypeople

CHENKe-Ping,GAOTian-Li,LIYa,et al.

DepartmentofClinicalLaboratory,ZhongdaHospital,SoutheastUniversity,Nanjing210009,Jiangsu,China

Abstract【】ObjectiveTo explore the epidemiology of respiratory tract pathogens in elderly people.MethodsSerum samples of elderly people with respiratory tract infection were tested with the Pneumoslide IgM kit.The Pneumoslide IgM technology could simultaneously diagnose 9 main viral and atypical pathogens:Mycoplasma pneumoniae(MP),Influenza B(INFB),Parainfluenza 1,2 and 3(PIVs),Legionella pneumophilaserogroup 1(LP1),Respiratory syncytial virus(RSV),Influenza A(INFA),Chlamydophila pneumonia(CP),Adenovirus(ADV),Coxiellaburnetii(COX).Results1 063 serum specimens tested 259 positive.MP was the dominant pathogen with the positive rate of 15.90%,the pathogens ranking the second place to the fifth place were INFB,PIVs,LP1,and RSV,the positive rates were 2.92%,2.35%,1.6%,and 1.41%,respectively.INFB infecction was associated with season(P<0.05).3.5% of positive patients suffered from mixed infection,especially MPand Influenza B.ConclusionsMP is the dominant pathogen of respiratory tract infection in elderly people.More attentions are paid to diagnosis and treatment of MP,and the mixed infection during peaking season of INFB.

【Keywords】Respiratorytractinfection;Pathogens;Mycoplasmapneumonia;InfluenzaB

呼吸道病毒是全球臨床發(fā)病率與死亡率的主要原因之一〔1，2〕；僅上個(gè)世紀(jì)，流感病毒就造成超過(guò)1億人的死亡，而受累的主要是兒童與老年人群〔2〕。老年人由于呼吸系統(tǒng)形態(tài)學(xué)變化，肺功能改變，免疫功能低下，對(duì)致病病原體缺少有效抵抗力，多數(shù)老年人成為呼吸道感染病毒的易感人群。隨實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)病毒以及非典型病原體在社區(qū)獲得性肺炎的作用被低估。有研究表明，有大約33.3%的社區(qū)獲得性肺炎是由病毒以及非典型性病原體引起的〔3〕。本文擬了解南京地區(qū)老年人群呼吸道感染病毒及非典型病原體感染情況。

1材料與方法

1.1研究對(duì)象選擇本院2012～2013年確診為呼吸道感染的成年患者1 514例，其中包含年齡>60歲的老年患者1 063例，18至60歲的成年患者451例作為對(duì)照。由專業(yè)人員無(wú)菌靜脈穿刺采集血液。血清樣本采集后8h內(nèi)檢測(cè)，2℃～8℃冷藏；如7d內(nèi)不檢測(cè)，則應(yīng)冷凍(-20℃)保存。不要反復(fù)凍融以防止免疫球蛋白滴度降低，特別是IgM。不使用高血脂或污染的血清。若樣本中含有微粒要離心使之澄清。

1.2主要儀器與試劑5415R與5414型Ependorf高速離心機(jī)(德國(guó)Eppendorf公司)；Axioskop40 型熒光顯微鏡(德國(guó)ZEISS公司)。9項(xiàng)呼吸道感染病原體IgM抗體檢測(cè)試劑盒(西班牙VIRCELL,S.L.公司)；試劑盒中的載玻片包被有9種病原體抗原，分別為嗜肺軍團(tuán)菌(LP1)、肺炎支原體(MP)、Q熱立克次體(COX)、肺炎衣原體(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(INFA)與乙型流感病毒(INFB)以及副流感病毒(PIVs)。除嗜肺軍團(tuán)菌，載玻片中的所有抗原均從細(xì)胞培養(yǎng)物中獲得。每一病毒類病原體載玻片孔均含有1%～15%甲醛滅活的感染細(xì)胞，丙酮固定。

1.3實(shí)驗(yàn)方法用抗人IgG吸附劑處理PBS稀釋后的血清，高速離心除去沉淀，以防類風(fēng)濕因子IgG等干擾檢測(cè)。處理后的血清加到載玻片后進(jìn)行溫育。洗滌晾干后加入抗人IgM的FITC結(jié)合物放入濕盒溫育。洗滌封片，用熒光顯微鏡400倍放大率下觀察結(jié)果。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析用SPSS19.0軟件行χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.19種呼吸道感染病原體檢測(cè)陽(yáng)性率及老年人群與成年人群的比較成年人群共檢出444株病毒，陽(yáng)性429例，患者總陽(yáng)性率為28.34%。其中老年人群共檢出268株病毒，陽(yáng)性例數(shù)為259例，陽(yáng)性率為24.37%；而18歲至60歲的451例成年人群陽(yáng)性率為37.69%，明顯高于老年人群(P<0.01)。在檢測(cè)的9種非細(xì)菌性病原體中，引起老年人群呼吸道感染的主要病原體為MP、INFB、PIVs、LP1與RSV，陽(yáng)性率分別為15.90%、2.92%、2.35%、1.60%、1.41%；在1 063例老年人群中沒(méi)有檢測(cè)到CP與COX。見(jiàn)表1。

老年人群與僅有MP檢測(cè)陽(yáng)性率差別顯著(P<0.01)；MP在老年人群中的陽(yáng)性率為15.90%，而陽(yáng)性率高達(dá)27.94%。其他病原體的陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.2老年人群呼吸道感染與季節(jié)的關(guān)系依據(jù)呼吸道感染發(fā)生的季節(jié)，把老年人群與18～60歲成年人群按春季(3月至5月)、夏季(6月到8月)、秋季(9月至11月)以及冬季(12月至次年2月)分成四組。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，老年人群INFB夏季感染率比其他季節(jié)低，感染率最高的季節(jié)發(fā)生在冬季，INFB感染具有季節(jié)性差異(P<0.05)(見(jiàn)表2)；老年人群無(wú)CP、COX感染；而18歲至60歲成年人群的INFB感染不具有季節(jié)性差異(P>0.05)(見(jiàn)表3)。其他8種病原體感染陽(yáng)性率未見(jiàn)明顯季節(jié)差異(P>0.05)，而MP在四季中均具有較高的感染陽(yáng)性率。

2.3老年人群呼吸道感染與性別的關(guān)系本研究中，老年女性399例，呼吸道感染病原體陽(yáng)性121例(30.33%)，老年男性664例，呼吸道感染病原體陽(yáng)性138例(20.78%)。女性與男性總體陽(yáng)性率具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P=0.003)。

2.4混合感染情況在檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性的259例老年人中，檢測(cè)到9例混合感染患者，占總體陽(yáng)性患者的3.5%。88.89%(8例)混合感染患者感染類型為MP合并INFB感染。MP感染的老年人群易合并INFB感染造成混合感染。

表1　老年人群與呼吸道感染病原體檢測(cè)結(jié)果〔n(%)〕

表2　老年人群呼吸道感染病原體陽(yáng)性率與

表3　18～60歲人群呼吸道感染病原體陽(yáng)性率與

3討論

老年人群免疫功能處于衰退期，呼吸道感染如不及時(shí)控制可引起嚴(yán)重的并發(fā)癥，甚至死亡。有些抗病毒治療僅在感染的早期治療有效，呼吸道感染病原體的早期診斷利于臨床及早采取正確的抗病毒治療。病原體的早期診斷還可以減少抗生素的濫用，避免耐藥菌株的產(chǎn)生〔4,5〕。另外，快速的病毒早期診斷可顯著減少住院周期以及不必要的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，減少醫(yī)療費(fèi)用，避免醫(yī)患糾紛〔4，6〕。病毒與非典型病原體的檢測(cè)方法包括病毒培養(yǎng)、血清學(xué)檢測(cè)和核酸檢測(cè)法。病毒培養(yǎng)為病原體檢測(cè)“金標(biāo)準(zhǔn)”，但技術(shù)要求較高，費(fèi)用高并且需要較長(zhǎng)的培養(yǎng)鑒定周期，同時(shí)培養(yǎng)陽(yáng)性率低〔3〕；核酸檢測(cè)需要提取病毒核酸并進(jìn)行擴(kuò)增，對(duì)人員素質(zhì)與實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備提出一定要求，可鑒別的病原體種類受到技術(shù)的嚴(yán)重制約〔7,8〕。機(jī)體感染病毒后以體液免疫為主，而IgM為機(jī)體在受到抗原刺激后最早產(chǎn)生的抗體，所以血清中特異性IgM含量增高提示有近期感染。9項(xiàng)呼吸道病原體IgM檢測(cè)，可同時(shí)檢測(cè)9種呼吸道病毒及非典型病原體。對(duì)于呼吸道感染病原體早期感染進(jìn)行快速診斷具有重要意義。

本研究中9種呼吸道感染病原體IgM抗體的陽(yáng)性率與國(guó)際及國(guó)內(nèi)使用同種方法的結(jié)果基本相同〔9,10〕。老年人群呼吸道感染病原體檢測(cè)陽(yáng)性率低，與通常所認(rèn)為的老年人群更易于感染的觀點(diǎn)不相符〔11〕；而與上海地區(qū)采用同樣檢測(cè)方法得到的結(jié)果相似〔10〕。老年人群認(rèn)識(shí)到自身較弱的免疫功能，形成較強(qiáng)的健康意識(shí)，注意個(gè)人防護(hù)而使總體感染率較低。不同性別呼吸道病原體總體陽(yáng)性率差別顯著，這主要由于女性MP感染率顯著高于男性；這與無(wú)錫地區(qū)的研究結(jié)果一致〔12〕。

引起老年人群呼吸道感染的病原體主要為MP、INFB、PIVs、LP1與RSV，MP的檢出率最高，因此老年人群呼吸道感染應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注MP的診斷與防治。MP主要通過(guò)呼吸道傳播，健康人吸入患者咳嗽、打噴嚏時(shí)噴出的口、鼻分泌物而感染〔13〕。因此，老年人群因退休等原因離開(kāi)人口密集的工作場(chǎng)所，以及較少參加聚會(huì)活動(dòng)從而減少了MP感染的機(jī)會(huì)。老年人群中沒(méi)有檢測(cè)到CP與COX感染。9種呼吸道病毒感染大部分病原體后，早期抗體IgM一般在感染1w左右出現(xiàn)，僅有CP與COX病原體IgM在感染后2～3w后出現(xiàn)〔14，15〕，因此造成兩種病原體未檢出可能與取樣時(shí)間有關(guān)；為提高此兩種病原體的檢出率可在初次檢測(cè)陰性后隔段時(shí)間重新取樣重新檢測(cè)。

包括INFB在內(nèi)的4種主要呼吸道感染病原體陽(yáng)性率均不具有季節(jié)性。因此，INFB感染在冬季、秋季及春季高發(fā)應(yīng)是老年人群呼吸道感染的一個(gè)特征。老年人群在INFB高發(fā)季節(jié)應(yīng)注意對(duì)此種病原體感染的防護(hù)。MP感染沒(méi)有明顯的季節(jié)特征，在4季中都具有較高的感染率。2010年在丹麥、英格蘭與威爾士，2011在挪威都相繼發(fā)生了MP的感染流行；并且感染率都有了很大的提高〔16～19〕。本研究還發(fā)現(xiàn)感染MP的老人易發(fā)生INFB混合感染。近期美國(guó)科研人員也檢測(cè)到MP與INF病毒共同感染具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔20〕。老年人群機(jī)體組織器官功能逐年衰退，常伴有高血壓、糖尿病等老年性疾病，MP的感染常引起嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)與心血管系統(tǒng)并發(fā)癥甚至導(dǎo)致死亡。因此老年人群四季都應(yīng)注意肺炎支原體感染防護(hù)，特別是INFB高發(fā)季節(jié)發(fā)生的混合感染。

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〔2015-05-07修回〕

(編輯曲莉)