肺鱗癌術后組織中轉移相關蛋白2、上皮型黏附素和組織蛋白酶K表達及意義

肺鱗癌術后組織中轉移相關蛋白2、上皮型黏附素和組織蛋白酶K表達及意義

顧澤鑫趙微微1

(齊齊哈爾醫學院第二附屬醫院呼吸二科，黑龍江齊齊哈爾161000)

摘要〔〕目的分析肺鱗癌術后組織中轉移相關蛋白(MTA)2、上皮型黏附素(E-cad)、組織蛋白酶(Cath)-K的表達及臨床意義。方法89例肺鱗癌患者的臨床資料和術后蠟塊組織作為觀察組，70例距腫物邊緣>1 cm的正常支氣管黏膜組織作為對照組，應用免疫組化法檢測兩組中MTA2、E-cad和Cath-K的表達。結果兩組中MTA2、E-cad和Cath-K表達的陽性率差異顯著。觀察組中MTA2、E-cad和Cath-K表達的陽性率與伴有壞死、脈管浸潤、淋巴結轉移和臨床分期均密切相關。觀察組中MTA2和E-cad呈負相關，MTA2和Cath-K呈正相關。結論肺鱗癌術后組織中MTA2和Cath-K高表達、E-cad低表達均可以促進腫瘤發生和進展。MTA2在對肺鱗癌作用過程中可能與對E-cad和Cath-K的調節有關。

關鍵詞〔〕肺鱗癌；轉移相關蛋白2；組織蛋白酶K；上皮型黏附素；免疫組化

中圖分類號〔〕R734.2〔文獻標識碼〕A〔

1呼吸一科

第一作者：顧澤鑫(1981-)，男，主治醫師，主要從事呼吸疾病研究。

蛋白表達失調和信號傳導失調是腫瘤進展的重要調節因素，越來越多的因子可能與肺鱗癌生物學行為有關〔1，2〕。轉移相關蛋白(MTA)2是促癌基因和轉移促進基因，高表達可以促進腫瘤進展〔3，4〕。上皮型黏附素(E-cad)是重要黏附蛋白，其低表達與腫瘤的轉移密切相關〔5，6〕。組織蛋白酶(Cath)-K是Cath家族的重要成員，除了表達在特定的細胞外，在部分腫瘤中也有表達，并被認為對腫瘤的進展有作用〔7，8〕。本文關注肺鱗癌術后組織中MTA2、E-cad和Cath-K的表達及其臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料2010年8月至2013年12月我院肺鱗癌患者的術后組織89例作為觀察組，均符合WHO中關于肺鱗癌的診斷標準。其中男55例，女34例；年齡45～80歲，平均65.4歲。其中高分化40例，中分化31例，低分化18例。70例距腫物邊緣>1 cm的正常支氣管黏膜組織作為對照組，其中男35例，女35例；年齡47～76(平均63.8歲)。兩組一般資料差別無顯著性。

1.2MTA2、E-cad和Cath-K表達的檢測方法MTA2、E-cad和Cath-K均為濃縮液，應用免疫組化方法檢測蛋白的表達。首先按不同比例稀釋后行預實驗，選擇染色最佳的比例進行蛋白的批量檢測，DAB染色。操作嚴格按說明書操作，嚴格質控。

1.3MTA2、E-cad和Cath-K判定方法MTA2和Cath-K于細胞質表達，E-cad于細胞膜表達，選取5個上皮細胞集中的區域，計算陽性細胞百分率，以≥5%定為陽性，<5%定為陰性。

1.4統計學方法應用SAS6.12軟件行χ2檢驗及線性相關分析。

2結果

2.1兩組MTA2、E-cad和Cath-K陽性率的比較觀察組MTA2和Cath-K表達的陽性率明顯高于對照組，E-cad表達陽性率明顯低于對照組。見表1。

2.2觀察組不同臨床特征中MTA2、E-cad和Cath-K表達的比較觀察組中MTA2、E-cad和Cath-K表達的陽性率與伴有壞死、脈管浸潤、淋巴結轉移和臨床分期均密切相關。見表2。

2.3觀察組中MTA2、E-cad和Cath-K的相關性分析MTA2和E-cad呈負相關(r=-0.48，P=0.031 3)，MTA2和Cath-K呈正相關(r=0.44，P=0.049 8)。

表1兩組MTA2、E-cad和Cath-K蛋白陽性表達率〔n(%)〕

組別nMTA2E-cadCath-K觀察組8944(49.44)30(33.71)32(35.96)對照組701(1.43)66(94.29)0(0)χ2值55.506660.103731.5102P值<0.0001<0.0001<0.0001

表2觀察組不同臨床特征中MTA2、E-cad和Cath-K陽性表達的比較〔n(%)〕

臨床特征nMTA2E-cadCath-K壞死 無5923(38.98)27(45.76)15(25.42) 有3021(70.00)3(10.00)17(56.67) χ2值7.654111.38288.4303 P值0.00570.00070.0037脈管浸潤 無6930(43.48)28(40.58)18(26.09) 有2014(70.00)2(10.00)14(70.00) χ2值4.36326.488812.9847 P值0.03670.01090.0003淋巴結轉移 無6425(39.06)27(42.19)13(20.31) 有2519(76.00)3(12.00)19(76.00) χ2值9.81257.331524.2103 P值0.00170.0068<0.0001臨床分期 Ⅰ+Ⅱ5316(30.19)25(47.17)8(15.09) Ⅲ+Ⅳ3628(77.78)5(13.89)24(66.67) χ2值19.423110.626424.7615 P值<0.00010.0011<0.0001

3討論

惡性上皮性腫瘤的發生、發展是一個多步驟、多階段分子遺傳改變不斷累積的過程，此過程中涉及癌基因的改變、轉移相關基因的改變等〔9〕。肺鱗癌是臨床行為、組織結構和細胞遺傳學改變均不相同的腫瘤，學者也發現了若干與肺鱗癌發生、發展相關聯的基因和蛋白，但是由于腫瘤的高度復雜性和腫瘤間差異，對其轉移有關的影響蛋白研究較少〔10〕。MTA2基因定位在染色體11q1213.1上，其表達的蛋白含有668個氨基酸，分子量是70 kD〔11，12〕。有觀點認為MTA2是促癌基因，也有研究認為其具有核小體重塑活性的NuRD的亞基，與個體發育及腫瘤的轉移密切相關〔13，14〕。黏附素是細胞連接的重要蛋白，在正常上皮中高表達，使細胞間的結構和功能維持穩定。E-cad是最重要的一種，除了在特定腫瘤中的鑒別意義外，在多數腫瘤中的表達下調或丟失，并認為其參與腫瘤的轉移進程〔15〕。Cath是一類在酸性環境中被活化的溶酶體蛋白酶，包括B、C、D、F、H、K、L、S、V和W等，由于其底物的特異性，可以參與細胞外基質的降解、血管形成、細胞遷移和凋亡等過程。Cath-K 是家族中的重要成員，由一個15-殘基N-端信號肽、一個99-殘基前肽和一個成熟的含215個氨基酸的蛋白質組成的復合物。近來的研究顯示Cath-K的異常表達與心血管系統疾病和骨質疏松等病變有關〔16，17〕。Cath-K 在腫瘤中表達升高，有研究認為其是血管平滑肌脂肪瘤較為特異性的標志物〔18，19〕。也有觀點認為Cath-K 在上皮性腫瘤中有不穩定的表達，其可能參與腫瘤的多種生物學過程〔20，21〕。

本實驗結果提示MTA2、E-cad和Cath-K異常表達提示腫瘤處于進展狀態。MTA2與E-cad、Cath-K可能具有協同作用。MTA2是轉移相關的重要蛋白，當MTA2在腫瘤中表達升高時，伴隨著E-cad的表達下降，使細胞間的連接松動，腫瘤細胞易于離開原發灶并呈現高度侵襲性的狀態，同時易于透過基底膜形成轉移灶，也提高腫瘤處于高度惡性的級別和高增殖狀態〔22〕。但是相關文獻并未直接證實MTA2與E-cad或Cath-K的相關性〔23，24〕。因此，三者的具體調節過程和通路有待更多實驗證實。

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〔2014-06-19修回〕

(編輯苑云杰)