胃腺癌中細胞纖毛轉運蛋白20、組織蛋白酶B和D的表達及意義

胃腺癌中細胞纖毛轉運蛋白20、組織蛋白酶B和D的表達及意義

胡順成

(青海省仁濟醫院內科，青海西寧810021)

摘要〔〕目的檢測胃腺癌中細胞纖毛轉運蛋白(IFT20)、組織蛋白酶(Cath)-B和D的表達，分析三者在不同臨床特征中表達的差別。方法94例胃腺癌臨床資料及術后蠟塊組織作為觀察組，82例距腫物邊緣>5 cm的正常胃黏膜組織作為對照組，采用免疫組織化學技術檢測兩組中IFT20、Cath-B和D的表達。結果兩組中IFT20、Cath-B和D的表達差別有統計學意義。觀察組中IFT20、Cath-B和D的表達與腫瘤最大徑、淋巴結轉移和脈管浸潤具有相關性。觀察組中IFT20的表達與腫瘤的分化程度和Ki67的表達具有相關性。相關性分析顯示觀察組中IFT20和Cath-B、IFT20和Cath-D的表達具有正相關性。結論胃腺癌中IFT20、Cath-B和D高表達對腫瘤的發生和進展有促進作用，IFT20與Cath-B、D具有協同作用。

關鍵詞〔〕胃腺癌；細胞纖毛轉運蛋白(IFT)20；組織蛋白酶(Cath)-B；Cath-D；免疫組化

中圖分類號〔〕R735〔文獻標識碼〕A〔

第一作者：胡順成(1979-)，男，主治醫師，主要從事老年病研究。

胃腺癌是起源于上皮細胞的惡性腫瘤，基因和蛋白表達失調是重要的促進因素〔1〕。細胞纖毛轉運蛋白(IFT)20在正常機體中存在微量表達，而在腫瘤中的表達常增高，且具有雙向功能〔2〕。IFT20高表達可以把細胞的相關信息從高爾基細胞器傳送到細胞表達，使細胞周期加速，增殖活性增強，轉移潛能提高〔3〕。組織蛋白酶(Cath)-B、D是細胞半胱氨酸溶解酶體蛋白酶，在正常組織中的表達較少，在腫瘤進展過程中常表達升高，可以降解層黏連蛋白、纖維連接蛋白、彈力蛋白、Ⅳ型膠原等細胞外基質成分，破壞組織屏障，促進腫瘤浸潤和轉移〔4,5〕。本文關注胃腺癌中IFT20、Cath-B和Cath-D的表達，探討其相關性及臨床意義。

1資料與方法

1.1臨床資料2012年1月至2013年6月經病理證實為胃腺癌的手術根治標本作為觀察組，共94例，均符合WHO的診斷標準。男53例，女41例；年齡54～83歲，平均(65.4±7.3)歲。高分化17例，中分化17例，低分化60例。術前均未行任何放、化療。同時選取距腫物邊緣>5 cm的正常胃黏膜組織82例作為對照組。其中男41例，女41例；年齡55～79歲，平均(64.5±6.5)歲。兩組一般資料無明顯差異。

1.2免疫組化檢測IFT20、Cath-B和D蛋白的表達IFT20、Cath-B和D蛋白均為濃縮液。抗體按不同比例稀釋后進行預實驗，選擇最佳配比濃度進行正式實驗。采用免疫組化SP法檢測組織中IFT20、Cath-B和D蛋白的表達。操作嚴格按說明書完成，做好質控工作。

1.3IFT20、Cath-B和D的判定方法IFT20、Cath-B和D陽性的部位均為細胞質，出現棕黃色顆粒狀染色定為陽性細胞。選擇10個染色較為集中的、有代表性的高倍視野，計數總細胞數及總的陽性細胞數，計算陽性率。以≥5%定為陽性，<5%定為陰性。計算組間陽性率的差別。

1.4統計學方法采用SPSS13.0統計軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2結果

2.1兩組中IFT20、Cath-B和D表達陽性率的比較IFT20、Cath-B和Cath-D在兩組中表達陽性率差別顯著(P<0.001)。見表1。

2.2觀察組中不同臨床特征患者IFT20、Cath-B和D蛋白表達陽性率的比較觀察組中IFT20、Cath-B和D的表達與腫瘤最大徑、淋巴結轉移和脈管浸潤具有相關性。觀察組中IFT20的表達與腫瘤的分化程度和Ki67的表達具有相關性。見表2。

表1兩組中IFT20、Cath-B和D表達陽性率的比較〔n(%)〕

組別nIFT20Cath-BCath-D觀察組9457(60.64)64(68.09)50(53.19)對照組8210(12.20)16(19.51)20(24.39)χ2/P值43.5932/<0.000141.6756/<0.000115.1661/<0.0001

表2觀察組中不同臨床特征患者IFT20、Cath-B和D蛋白表達陽性率的比較〔n(%)〕

臨床特征nIFT20Cath-BCath-D腫瘤最大徑 ≤5cm4417(38.64)24(44.44)8(18.18) >5cm5040(80.00)40(80.00)42(84.00) χ2值 P值16.7769<0.000113.86670.000240.7211<0.0001淋巴結轉移 無4921(42.86)27(55.10)10(20.41) 有4536(80.00)37(82.22)40(88.89) χ2值 P值13.55850.00027.94000.004844.1825<0.0001脈管浸潤 無7439(52.70)46(62.16)32(43.24) 有2018(90.00)18(90.00)18(90.00) χ2值 P值9.17630.00255.61510.017813.82470.0002分化程度 高+中347(20.59)24(70.59)14(41.18) 低6050(83.33)40(66.67)36(60.00) χ2值 P值35.7965<0.00010.15360.69513.08840.0789Ki67表達 ≤25%3911(28.21)25(64.10)20(51.28) >25%5546(83.64)39(70.91)30(54.55) χ2值 P值29.3757<0.00010.48650.48550.09760.7547

2.3觀察組中IFT20、Cath-B和D表達的相關性IFT20和Cath-B的表達具有正相關性(r=0.47，P=0.041 3)，IFT20和Cath-D的表達具有正相關性(r=0.48，P=0.034 1)。

3討論

胃腺癌是發生于胃黏膜呈腺樣分化的惡性腫瘤，病因有多種因素，長期萎縮性胃炎、上皮內瘤變是重要的促進因素，其病變的潛伏期可達數十年〔6〕。胃癌及萎縮可以改變胃酸分泌，升高胃內pH值，改變菌株并允許厭氧菌移植到胃中生長，這種細菌產生活性還原酶，可以將食物中的硝酸鹽轉化為亞硝酸鹽，而亞硝酸鹽是一種活性分子，能同胺類反應產生致癌性N-亞硝基復合物，可以促進腫瘤的發生。而在此過程中，常伴隨著多種癌基因和轉移相關基因、蛋白的表達失調〔7〕。IFT微量存在于機體中，可以具有多種生物學功能。IFT20是家族的重要成員，可以促進多囊腎形成、視神經的功能異常等。IFT20蛋白定位在細胞質中，主要表達在核旁高爾基器分布區域，其功能與信號傳導有關，使細胞信號從高爾基器傳送到細胞有活性功能的細胞表面，也可以傳到有纖毛細胞的基底部，增加細胞的遷移功能〔8,9〕。姜容等〔10〕通過對人體不同腫瘤中IFT20的表達進行分析后，認為IFT20在卵巢癌中大量表達，在小腸癌、胃癌、乳腺癌中呈中等量表達，在胰腺癌、肺癌中低表達，在前列腺癌中未見表達，因此IFT20在不同腫瘤中的表達不同，其不僅與腫瘤的特異性有關，還可能在不同腫瘤中對腫瘤轉移潛能的影響程度不同。Cath-B和D均屬于細胞半胱氨酸溶解酶體蛋白酶，Cath-B催化作用由半胱氨酸和組氨酸實現，其水解位點為精氨酸，也能在羧基端按順序水解二肽〔11,12〕。正常情況下，Cath-B限于核周的泡囊且表達較少，而在腫瘤病變中，尤其是腫瘤進展過程中Cath-B表達明顯增高〔13,14〕。Cath-D作為蛋白水解酶，直接作用是引起基底膜的溶解，使腫瘤細胞轉移的通道打開，轉移潛能升高〔15,16〕。Cath-B和D均能激活蛋白水解級聯反應，生成能夠降解多種胞外基質成分的物質，促進腫瘤的侵襲和轉移〔17,18〕。其次，Cath-B和D在降解細胞外基質成分時，可以誘導間質血管生長，促進腫瘤的增殖〔19,20〕。

本實驗結果顯示觀察組中IFT20、Cath-B和Cath-D的表達升高是腫瘤發生的重要因素。IFT20、Cath-B和D高表達可以促進腫瘤的生長、淋巴道播散和脈管浸潤，以上因素均提示腫瘤處于進展狀態，因此IFT20、Cath-B和D表達升高是腫瘤進展的客觀指標。IFT20表達的升高可以使腫瘤處于更幼稚的分化階段，腫瘤的失控性增殖更活躍，異型性更大，惡性程度更高，腫瘤的生長速度加快，腫瘤的異質性更強。IFT20可以促進Cath-B和D的表達，使細胞外基底膜和細胞外基質降解更明顯，細胞轉移和播散的通道打開，出現遠隔器官的轉移。但是IFT20與Cath-B和D的協同作用并不是蛋白的典型通路〔21〕，其具體調節作用可能有中間橋接蛋白的作用，還需要更多基礎實驗證實。

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〔2014-07-17修回〕

(編輯苑云杰)