乙型肝炎表面抗原膠體金免疫層析法血清快速測定性能研究

摘要：目的 通膠體金免疫層析法血塊快速對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）進行相關性能的測定，并評價測定結果。方法 對每年固定時間段內相關調查及反饋作出客觀準確的描述性分析。結果 通過分析510例臨床患者樣本檢測情況，可知膠體金免疫層析法血塊快速檢測乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的檢測靈敏度為5.0IU/ml，在實驗過程中最突出的問題就是陽性漏檢。通過將ELISA試劑檢測方法同本次試驗中的膠體金免疫層析法進行比較，可知其一致性較高。結論 在臨床應用方面，ELISA試劑檢測方法和膠體金免疫層析法對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的檢測結果一致性均比較高，但是在篩選乙型肝炎表面抗原（HBsAg）時應該選用更為敏感的試劑檢測方法代替膠體金免疫層析法。

關鍵詞：膠體金免疫層析法；快速檢測；乙型肝炎表面抗原

在醫學免疫檢測領域，免疫膠體金標記方法因為其操作起來比較方便而被人們廣泛使用，成為一種重要的免疫檢測手段。本文將對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）進行膠體金免疫層析測定，并進行相關評價。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取在2010年1月～2014年12月某綜合醫院門診和住院患者以及該市臨床檢驗中心的檢測標本共510例。將收集到了臨床檢測樣本通過ELISA法對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）進行檢測，隨后放置于零下2℃的環境中等待進一步檢測。

1.2方法 根據我國臨床檢測的相關規章制度和程序對臨床試驗標本進行科學合理的處理。

1.3指標評估 將已知濃度為10IU/ml的乙型肝炎表面抗原定值血清稀釋成不同的濃度，如3IU/ml、4IU/ml、5IU/ml、6IU/ml、7IU/ml、8IU/ml、9IU/ml等。通過20份試紙條對不同稀釋濃度的乙型肝炎表面抗原的檢測靈敏度，即根據檢測的特異度（真陰性率）和靈敏度（真陽性率）將選出的患者判為非患者（實際無病）和患者（實際患病）；通過誤診率（假陽性率）和漏診率（假陰性率）確定非患者中檢查異常和呈陽性的人數比例以及患者中檢查正常和呈陰性的人數比例。

1.4統計學方法 在本次檢測試驗中，對相關結果的陰性預測值、陽性預測值、特異度以及靈敏度等數據資料采用Microsoft Excel表格計算軟件進行處理。

2 結果

2.1臨床檢測評價 在對本次510例臨床檢測標本的數據資料進行統計分析后，得出其一般性描述特征，將采用兩種ELISA試劑檢測法同膠體金免疫層析法對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的結果進行比較，可知一致性均比較高。其中一共有15例結果不一致的樣本，見表1。

2.2中和確認實驗 本次檢測實驗中共出現結果不一致的標本15例，應該進一步對這15例檢測標本進行中和確認實驗。通過對實驗結果數據計算分析可知，B試劑的NEUT（%）值大于50%，且B試劑的（S/N）值均大于1.5，表明中和實驗確認了試驗結果為陽性。

3 討論

乙型肝炎表面抗原（HBsAg）常常出現在人體的血液中，是一種具有代表性的病毒血清學標志物。人體感染乙型肝炎病毒后的第一個出現的病毒血清學標志物就是乙型肝炎表面抗原（HBsAg）。我國是乙型肝炎的高發病區以及高感染區，應該努力提高檢出乙型肝炎病毒的能力[1-3]。目前實驗最常用的檢測乙型肝炎表面抗原（HBsAg）方法是酶聯免疫吸附法，塔重復性、特異性以及靈敏度都能很好地滿足檢測要求，但是其操作繁瑣，且檢測時間達3h左右。而膠體金免疫層析法檢測乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的方法是一種現代醫學即時檢驗（全稱Point of Care Testng，簡稱POCT）方法。它不僅能有效減少標本周轉時間，提高功效比，而且操作起來比較方便。

在本次檢測試驗中，主要評價了膠體金免疫層析法對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的檢測考核系統。檢測試劑的實際靈敏度為5 IU/ml，因為膠體金需要較高濃度的標記物才能顯示其變色結果，因此在檢測標記物濃度較低時，其檢測靈敏度受到了一定的影響。除了這個缺陷以外，總體而言，膠體金免疫層析法對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的檢測還是比較方便和快速的。

膠體金免疫層析法因其檢測試劑穩定、設備儀器簡便易于操作、快速顯效、特異性高、隨到隨測等優勢。但是通過本次試驗表明，在檢測過程中，陰性結果基數較大，而且標本的檢測量越大，兩種ELISA試劑和膠體金免疫層析法檢測乙型肝炎表面抗原（HBsAg）結果的一致性就越大。可見，對于高濃度膠體金試紙，其檢測結果會因出現單一性和特異性而導致差異。膠體金免疫層析法的一致性要低于ELISA試劑檢測法的一致性。但酶聯免疫吸附法明顯高于HBV-M試劑的靈敏度。

通過本次臨床檢測樣本試驗可知，通過膠體金免疫層析法檢測乙型肝炎表面抗原（HBsAg）能夠及時為乙型肝炎病毒感染的早期診斷及治療提供有價值的依據，是乙型肝炎早期診斷的有效手段。但是在大量檢測和篩選乙型肝炎表面抗原（HBsAg）時應該選用更為敏感的試劑檢測方法。

參考文獻：

[1]馬光.乙型肝炎表面抗原膠體金免疫層析法血清快速測定的性能評估[J].中國實用醫藥.2014.9（9）26：142-143.

[2]張茂海，吳建業，陸玲娜，等.膠體金與酶聯免疫法檢測乙肝表面抗原結果分析[J].中國醫學創新，2011，9（32）：14.

[3]李伶俐，孫俊聰.400例乙肝表面抗原膠體金試紙條與ELISA法檢測結果分析[J].中國醫學創新，2011，9（28）：35-36.

編輯/哈濤