阿莫西林與紅霉素對肺炎鏈球菌的體外抗菌效果

摘要：目的 研究阿莫西林和紅霉素對肺炎鏈球菌的殺菌效果以及聯合應用體外對肺炎鏈球菌的相互作用。方法 選用肺炎鏈球菌標準菌和藥物試劑（阿莫西林含量為86.2%，紅霉素含量為923 u/mg），采用瓊脂平皿二倍稀釋法測定MIC，采用影印培養法測定MBC，采用棋盤微量稀釋法和時間-殺菌曲線測定兩種藥物溶液對肺炎鏈球菌的聯合應用效果。結果 大部分菌株的藥物MIC值與單劑相比，均相同或略有下降，阿莫西林、紅霉素的單劑用藥和二者聯合應用殺菌效果均隨著時間的推移而不斷增加，紅霉素對肺炎鏈球菌也存在體外殺菌作用，與阿莫西林聯合應用使活菌減少較阿莫西林單劑的FIC指數為1～2，表明阿莫西林與紅霉素之間為無關作用。結論 紅霉素在體外對肺炎鏈球菌具有殺菌作用，與阿莫西林聯合應用時，藥物的殺菌效果均不會被減弱。

關鍵詞：肺炎鏈球菌；阿莫西林；紅霉素；抗菌效果

肺炎鏈球菌是肺炎較為常見的致病菌，聯合應用β-內酰胺和大環內酯類藥物是目前應用最為廣泛的治療方法，本研究通過對臨床分離的肺炎鏈球菌的聯合抑菌實驗來驗證阿莫西林和紅霉素聯合應用對肺炎鏈球菌的相互作用以及紅霉素對其產生的殺菌作用，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 選用符合ATCC49679肺炎鏈球菌標準菌株作為質控株，將菌株接種至哥倫比亞血瓊脂平板，培養備用。選用的阿莫西林含量為86.2%，紅霉素含量為923 u/mg，試劑包括乙醇、磷酸鹽緩沖液、滅菌生理鹽水和滅菌蒸餾水，器材包括恒溫水浴箱、培養箱、分析天平、微量加樣器等。

1.2方法

1.2.1 MIC測定 阿莫西林和紅霉素對肺炎鏈球菌的最小抑菌濃度，采用瓊脂平皿二倍稀釋法來測定，將培養物取出稀釋，將其點種在各抗菌藥物濃度培養基上，接種量為1×104 CFU；根據菌株對阿莫西林和紅霉素的不同敏感性，將其分組，計算和測定MIC。

1.2.2 MBC測定 對于最小殺菌濃度的測定，采用影印培養法，影印戳先輕落在接種點上，再將其移開輕落到不含抗菌藥物平皿上，以菌落計數并統計MBC值，計算其與MIC的比值，以其比值>4作為判斷標準[1]。

1.2.3聯合藥敏試驗 藥物對肺炎鏈球菌菌株的聯合作用的測定，采用棋盤微量稀釋法，將菌株接種到哥倫比亞血平板上，培養完成后，將其用MH肉湯制成菌懸液，濃度為1×107 CFU/ml，然后在微孔板上分別加入MH肉湯和菌懸液，以此作為飛揚鏈球菌生產的陽性和陰性對照；將兩種溶液各接入MH肉湯，進行二倍稀釋，加入菌量放入培養箱，培養20h后，觀察并記錄其結果；根據聯合抑菌指數公式，計算FIC指數，以此作為判斷兩種藥物對肺炎鏈球菌所起到的體外抗菌作用，判斷標準為：FIC指數<0.5，表示協同作用；<1，表示累加作用；<2表示無關作用；>2，表示拮抗作用[2]。

1.2.4時間-殺菌曲線 將標準菌株、兩種溶液敏感株和耐藥株培養20 h后，然后將獲得的培養物加入MH肉湯中，進行振蕩培養，為確保細菌能夠呈指數生長，在1 h后加入適當抗生素，各菌株濃度約為1.5×106 CFU/ml，藥物單劑和聯合應用于菌懸液中，對加入藥物前和加入藥物后的細菌原液進行定點取樣，計算活菌數量，繪制時間-殺菌曲線，判定藥物素單劑和聯合作用對肺炎鏈球菌產生的體外抗菌效果[3]。

2結果

最低抑菌濃度及殺菌效果，分別計算阿莫西林和紅霉素兩種溶液耐藥不同菌株的MIC50和MIC90值，阿莫西林和紅霉素菌敏感株有16株，與耐藥株共有30株，其中，阿莫西林和紅霉素菌耐藥株最多。聯合藥敏試驗結果顯示，大部分菌株的藥物MIC值與單劑相比，均相同或略有下降，阿莫西林、紅霉素的單劑用藥和二者聯合應用殺菌效果均隨著時間的推移而不斷增加，紅霉素對肺炎鏈球菌也存在體外殺菌作用，但是殺菌效果不如阿莫西林單劑和聯合應用，而聯合應用使活菌減少較阿莫西林單劑的FIC指數為1～2，表明阿莫西林與紅霉素之間為無關作用，見表1。

3討論

肺炎鏈球菌是化膿性球菌中致病力較高的一種病原菌，此菌會引發大葉性肺炎、腦膜炎、支氣管炎等疾病，5%～10%正常人上呼吸道中攜帶此菌，多見于兒童和老年人，其對青霉素類抗生素極少會產生耐藥性，這也是耐藥肺炎鏈球菌在全世界范圍內得以持續流行并增長的主要原因，該菌對青霉素、大環內酯類抗生素的敏感性正在衰退，而在體外實驗中與之相關的用藥對肺炎鏈球菌的抗菌效果的研究則引起了廣泛的關注[4]。本研究結果證實，阿莫西林、紅霉素的單劑用藥和二者聯合應用殺菌效果均隨著時間的推移而不斷增加，紅霉素對肺炎鏈球菌存在體外殺菌作用，與阿莫西林聯合應用時，藥物的殺菌效果不僅不會被減弱，而且還會有所增強，值得在臨床上推廣。

參考文獻：

[1]劉建華，劉勇，孫繼梅，等.阿莫西林與紅霉素對肺炎鏈球菌的體外抗菌效果[J].中國臨床藥理學雜志，2007，12（5）：372-375.

[2]宋秀杰，劉又寧，梁蓓蓓，等.20種抗菌藥物對肺炎鏈球菌的體外抗菌活性研究[J].中國藥物應用與監測，2010，10（1）：20-23.

[3]張樹敬.青霉素耐藥肺炎鏈球菌的分子流行病學與適應性研究[D].復旦大學，2012.

[4]劉洋.泰樂菌素-阿莫西林聯用對豬鏈球菌體外藥效學及MSW的研究[D].東北農業大學，2010.

編輯/張燕