摘要:目的 研究不同結核病患者群血清蛋白質譜分析與對比探討。方法 將2012年1月~2014年1月我院接診的99例結核病患者根據不同結核病類型分為兩組,其中包括54例菌陽肺結核患者(觀察組),45例菌陰肺結核患者(對照組),對比觀察二者的群血清蛋白質譜。結果 在兩組患者中均捕獲到102種相對分子質量在1011.42~9435.06的不同血清蛋白質,通過相關檢驗,在觀察組患者中有31種,對照組患者中有23種血清蛋白質呈正態分布;正態分布的血清蛋白質在不同結核病患者中無明顯差異(P>0.05);在非正態分布的血清蛋白質中,觀察組與對照組患者人群間其水平無明顯差異(P>0.05)。結論 對于不同結核病患者來講,其血清蛋白質譜具有同質性,這為普遍適用性結核病血清學診斷標志物的篩選提供了科學依據。
關鍵詞:結核病;血清蛋白質譜;菌陰肺結核;菌陰肺結核;非正態分布
本文就我院診治的99例不同結核病患者為研究對象,對比分析菌陰肺結核與菌陽肺結核患者的血清蛋白質譜差異,現報道如下。
1資料與方法
1.1一般資料 將2012年1月~2014年1月我院接診的99例結核病患者根據不同結核病類型分為兩組,其中包括54例菌陽肺結核患者(觀察組),其涂片或者培養陽性并鑒定為結核分支桿菌,45例菌陰肺結核患者(對照組),其分枝桿菌片和培養檢查均為陰性,但是符合肺結核診斷標準。觀察組包括男性患者34例,女性患者20例;年齡13~80歲,平均年齡(49.17±5.63)歲。對照組包括男性患者26例,女性患者19例;年齡16~74歲,平均年齡(47.26±5.02)歲。兩組患者在一般資料方面的差異較小,無統計學意義(P>0.05),具有可比性。
1.2方法
1.2.1采集血液樣本與保存 采集血液約5mL置于真空采血管,以2000r/min的離心放置于4℃的環境下24h,吸引上層血清約1.5mL分裝于3支凍存管中,保存于零下80℃以備用[1]。
1.2.2實驗方法 ①采用10μL WCX磁珠處理5μL血清,將血清蛋白質捕獲后獲得樣品,接著直接實施質譜分析或者保存于零下20℃,并在24h內實施質譜分析。②正式實施質譜分析之前,表現做好以下準備:備好標準品、基質、Anchorchip靶清潔、質譜參數調整等。③點樣及質譜儀檢測,首先將1μL的樣品與10μL的基質混勻,其次取出1μL點在600μm Anehorehip靶的樣品上,室溫干燥片刻,最后,將Anehorehip靶放人質譜儀。④利用ClinProTools分析軟件進行數據的采集和處理[2-4]。
1.3療效評定標準 對比分析兩組患者的血清蛋白質譜及各自血清蛋白質的平均豐度對比。
1.4統計學分析 采用ClinProTools分析軟件進行處理,采用Anderson-Darling檢驗兩組患者的各血清蛋白質的豐度在各人群中是否呈正態分布,以P>0.05為正態分布;組間比較中,若分析蛋白質在兩組人群中均呈正態分布,其平均豐度比較采用t檢驗,以P>0.05表示差異無統計學意義,以P<0.05表示差異有統計學意義;若分析蛋白質在兩組人群中不都或均不呈正態分布,其平均豐度比較采用Wilcoxon檢驗,以P>0.05表示差異無統計學意義,以P<0.05表示差異有統計學意義。
2結果
2.1在兩組患者中均捕獲到102種相對分子質量在1011.42~9435.06的不同血清蛋白質,觀察組患者的血清蛋白質豐度為1.61~1631.55,對照組患者的血清蛋白質豐度為3.16~1582.01。通過Anderson-Darling檢驗,在觀察組患者中有31種,對照組患者中有23種血清蛋白質呈正態分布;正態分布的血清蛋白質在不同結核病患者中無明顯差異(P>0.05);
2.2觀察組患者與對照組患者各血清蛋白質的平均豐度對比:在非正態分布的血清蛋白質中,觀察組與對照組患者人群間其水平無明顯差異(P>0.05)。
3討論
世界衛生組織提出,蛋白質標志物在感染性疾病的診斷、預示疾病狀態和明晰疾病進程等方面均可發揮重要作用,而應用表面增強激光解吸技術可以以其高通量和要求樣本量較少等優勢而被廣泛應用于蛋白質的篩選工作中[5,6]。本文研究中,采用表面增強激光解吸一電離飛行時間質譜蛋白質芯片系統對不同結核病患者的血清蛋白質譜進行的對比研究,就我院診治54例菌陰肺結核患者和45例菌陰肺結核患者為研究對象,回顧性分析其臨床資料,結果發現,在兩組患者中均捕獲到102種相對分子質量在1011.42~9435.06的不同血清蛋白質,通過相關檢驗,在觀察組患者中有31種,對照組患者中有23種血清蛋白質呈正態分布;正態分布的血清蛋白質在不同結核病患者中無明顯差異(P>0.05);在非正態分布的血清蛋白質中,觀察組與對照組患者人群間其水平無明顯差異(P>0.05)。
綜上所述,對于不同結核病患者來講,其血清蛋白質譜具有同質性,這為普遍適用性結核病血清學診斷標志物的篩選提供了科學依據。
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編輯/申磊