罕見的B(A)亞型基因鑒定分析1例

·病例報道·

罕見的B(A)亞型基因鑒定分析1例*

**通信作者 E-mail:zengxiaojing@medmail.com.cn

網絡出版時間：2015-10-13網絡出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20151013.1256.032.html

祝麗麗1， 楊芳2， 曾小菁1**

(1.貴州醫科大學附院 輸血科, 貴州 貴陽550004； 2.貴州醫科大學 檢驗學院， 貴州 貴陽550004)

[關鍵詞]B(A)亞型； ABO血型； 序列分析； 基因

[基金項目]*貴州省科技廳

[中圖分類號]R446.6[文獻標識碼] B

ABO亞型是導致血型鑒定正反定型不符、血型誤判及配血不合的主要原因,是正常ABO抗原以外的抗原性較弱的亞型或變異型，如A2、A3、Ax、Ael、B2、B3、和CisAB等，多由糖基轉移酶基因的突變或單堿基缺失導致A或B抗原表達減弱。B(A)亞型是ABO血型系統中比較罕見的ABO亞型[1-2]。筆者工作中遇見經血型、血清學及分子生物學方法鑒定為B(A)亞型血型病例1例，報道如下。

1臨床資料

患者，男性，42歲，既往體健，因股骨頸骨折入院。查體：溫度36.5 ℃，血壓90/60 mmHg，無頸靜脈怒張，雙肺呼吸音清，未聞及干濕啰音，心率100次/min，肝肋下未及，雙下肢無水腫。心電圖正常，凝血功能正常，擬行股骨頸修復手術，進行術前備血檢查，發現血型正反定型不一致，導致手術備血困難；隨后利用人源血清和病人紅細胞及H抗原再次鑒定其血型，提取受檢測人血中白細胞DNA，設計B(A)01、B(A)02、 B(A)03、 B(A)04、B(A)05亞型、O型和及B型特異性引物，進行聚合酶鏈式反應(PCR)，采用1.5%瓊脂糖凝膠電泳，進一步鑒定該患者的基因型。

2結果

2.1　ABO正反定型

ABO血型鑒定發現患者血型正反定型不符合，疑似AB型，但僅正定型符合，而反定型B抗原

一二次離心鑒定結果均為陰性。見表1。

2．2　人源血清和病人紅細胞再次鑒定

采用抗-A、抗-B人源血清與病人紅細胞進行鑒定，推測此例標本為ABO亞型。見表2。

表1　ABO血型鑒定結果

表2　人源抗-A、抗-B血清與病人紅細胞反應

2.3　H抗原鑒定

抗-H抗體與病人紅細胞反應呈3+，與O型細胞反應呈3+，B型細胞反應呈1+，參照《ABO亞型對照表》，高度懷疑為B(A)亞型。

2.4　PCR結果

PCR結果顯示，在第5、7及8泳道出現目的條帶，說明該患者的基因型為B(A)04/0 ，見圖1。

注：1為mark，2為B(A)01,3為B(A)02,4為B(A)03， 5為B(A)04,6為B(A)05，7為B(A)04,8為O，9為B 圖1　B(A)04基因型PCR擴增產物電泳結果 Fig.1　Electrophoresis chart of PCR amplification products of B(A)04 genotype

3討論

B(A)是罕見的AB0亞型，其表現型于1985年被發現[3]。B(A)是遺傳學上的B型，其紅細胞膜上有少量A抗原和基本正常的B抗原。其H抗原含量較為豐富，幾乎與O型細胞上的含量持平。B(A)血清中含有的抗-A抗體,可以跟A1細胞、部分A2細胞發生凝聚反應，導致紅細胞抗原表型為AB型(A抗原較弱)，且血清中同時含有抗-A抗體[4]。文獻報道，B(A)亞型是B基因上的堿基發生突變,導致B基因產生變異，改變了部分功能活性酶的活性及效力[2]。所以，紅細胞膜血清學正定型除了有正常的B抗原以外,還會發現有少量A抗原，因而表現為紅細胞膜上H抗原增多[5]。本病例的血型經人源血清和病人紅細胞和H抗原再次鑒定高度懷疑為B(A)亞型，最后利用PCR方法鑒定該病例血型為B(A)04/O基因型，即為一個正常的O基因和一個發生突變的B基因組成，因此血清學除表現B特異性，還表現少許A特異性，血清學表現為AB血型。AB型血的人與O型的人不可能生出AB型子代，但這種罕見的B(A)型與O型人，卻能生出血清表現為AB型的子代，檢測時需高度注意，條件允許的情況下，最好開展家系調查。本病例ABO亞型為B(A)04/O,與李慧敏等[6]報道的B(A)亞型中絕大多數基因型為B(A)/O血型一致，目前國內還報道了B(A)/A1型[7]， B/B純合型也有見到報道[2]。但四川地區報道最多的是B(A)02/O等位基因[8]，與此次報

道的04型有所差別。該類病人輸血時多采用O型或B型洗滌紅細胞進行輸血治療。在輸血血清學實驗中要求嚴格正反定型，必要時借助對亞型分型更準確的基因分型檢測法分析紅細胞亞型，使血清學亞型實驗結果得到基因學準確驗證，確保結果真實可靠。臨床中遇到的疑難血型鑒定時，在非急診的情況下，可以用更準確的分子生物學技術來解決輸血治療問題。

4參考文獻

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(2015-08-25收稿，2015-09-30修回)

編輯： 吳昌學