火龍果對衰老模型小鼠血清和肝臟中GSH—Px、SOD活性和MDA含量的影響

鄭守歡韋玉娜黎瑜霜魏海帆李朝敢

【摘要】目的探討火龍果對衰老模型小鼠血清和肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性以及對丙二醛（MDA）含量的影響。

方法設立衰老模型組、火龍果皮組、火龍果肉組和正常對照組，每組12只小鼠列入統計分析，衰老模型小鼠每天分別給予火龍果的果皮和果肉（100 g·kg1·d1）喂養，40 d后處死小鼠，取血清及肝臟測定GSHPx、SOD活性和MDA含量。

結果與衰老模型組比較，火龍果皮組、火龍果肉組小鼠血清中的GSHPx活性顯著增高（P<0.01），MDA含量顯著降低（P<0.05或P<0.01）；火龍果皮組、火龍果肉組小鼠肝臟中SOD的活性顯著增高（P<0.01），火龍果肉組MDA含量顯著降低（P<0.05）。

結論火龍果具有增強抗氧化酶活性而發揮抗氧化作用。

【關鍵詞】火龍果；GSHPx；SOD；MDA

中圖分類號：R285.5文獻標識碼：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2016.04.009

火龍果（Hylocereus undatus），又稱紅龍果、吉祥果和仙蜜果等，是仙人掌科（Cataceae）量天尺屬（Hylocere usundatus）植物果實，是近年來在我國備受關注的一種熱帶亞熱帶經濟植物[1]。目前在我國海南、福建、廣西、廣東和貴州省等地被大面積種植，具有極高的經濟價值?；瘕埞矶际菍?，火龍果果肉和果皮富含植物多糖、植物蛋白質及多種氨基酸、脂肪酸及礦物質等，此外，還含有多種生物活性物質，如多酚、黃酮類化合物、花青素等，而這些天然多酚、黃酮類化合物、花青素被實驗證實具有清除自由基和良好的抗氧化作用[2～3]。

衰老是一種生命過程的必然規律，是機體各種組織和器官功能的時間依賴性衰退，是各種生命成熟后都一定經歷的最后階段，衰老不能抗拒，但是可以通過藥物干預延緩衰老，如通過保持機體具有足夠的抗氧化物質，就能及時清除機體內過量的自由基，保持機體健康和抗衰老[4]。由于火龍果是天然抗氧化劑的良好來源，因此本實驗以火龍果果皮和果肉為原料，從抗氧化酶活性的角度探討火龍果的抗氧化作用?，F將實驗方法及結果報告如下。

1材料與方法

1.1藥物及試劑

新鮮火龍果，紅皮白肉，采購于廣西百色市；D半乳糖購于武漢博士德生物工程有限公司；谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）等測定試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

1.2實驗動物及動物分組

60只健康昆明種小白鼠，雌雄各半，體重（20±2）g，由右江民族醫學院實驗動物中心提供（許可證號：SYXK20110010）。小鼠被隨機分成4個實驗組：衰老模型組、火龍果皮組、火龍果肉組和正常對照組，每組15只。

1.3衰老模型的建立及給藥

采用皮下注射D半乳糖（150 mg/kg）建立衰老小鼠模型，正常對照組小鼠皮下注射等量生理鹽水。在造模的同時，火龍果皮組、火龍果肉組小鼠按體重劑量100 g·kg1·d1分別喂食火龍果皮和火龍果肉，連續注射和喂養40 d。

1.4血清GSHPx、SOD活性和MDA含量的測定

每只小鼠摘眼球取血液于1.5 ml EP管中，經過37℃恒溫水浴靜置30 min后，3000 rpm離心10 min獲得血清，根據相應試劑盒操作說明書分別測定GSHPx、SOD活性和MDA含量。

1.5肝臟GSHPx、SOD活性和MDA含量的測定

小鼠取血后，迅速斷椎處死，及時摘取肝臟，先用4℃預冷的生理鹽水清洗肝臟表面血液，再用干凈的濾紙吸干表面水分，稱重，用玻璃勻漿器于冰水浴中進行手工勻漿，再加入9倍體積的生理鹽水稀釋制成10%肝勻漿，以3000 rpm離心10 min，根據相應試劑盒操作說明書分別取上清液部分測定GSHPx、SOD活性和MDA含量。

1.6統計學方法

采用SPSS 19.0統計軟件進行統計學處理，實驗過程中每組小鼠因為種種原因均有意外死亡，因此以每組12只實驗數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差（±s）表示，多組間均數比較采用單因素方差分析，各組和對照組兩兩比較采用最小顯著差法（LSD法），檢驗水準：α=0.05。

2結果

2.1火龍果對小鼠血清GSHPx、SOD活性和MDA含量的影響

與正常對照組比較，火龍果肉組、火龍果皮組血清GSHPx活性均顯著升高（P<0.05或0.01）；而衰老模型組血清GSHPx活性顯著降低（P<0.05）；火龍果皮組血清MDA含量顯著降低（P<0.05）。與衰老模型組比較，火龍果肉組、火龍果皮組血清GSHPx活性均顯著升高（P<0.01），而MDA含量均顯著降低（P<0.05或0.01）。但火龍果肉組、火龍果皮組血清SOD活性與正常對照組比較以及與衰老模型組比較差異均無統計學意義（P>0.05）。見表1。

2.2火龍果對小鼠肝臟GSHPx、SOD活性和MDA含量的影響

與正常對照組相比，火龍果肉組、火龍果皮組和衰老模型組肝臟MDA含量均有顯著升高（P<0.01）；同時衰老模型組肝臟SOD活性顯著降低（P<0.01）。與衰老模型組相比，火龍果肉組、火龍果皮組肝臟SOD的活性顯著升高（P<0.01）；火龍果肉組MDA含量顯著降低（P<0.05）。但火龍果肉組、火龍果皮組肝臟GSHPx活性與正常對照組相比以及與衰老模型組相比差異均無統計學意義（P>0.05）。見表2。

3討論

在眾多研究抗衰老機制中，自由基學說被公認為是衰老發生發展的重要機制之一[5]。自由基學說認為，人體抗氧化防御體系中的各種抗氧化酶如GSHPx、SOD等和小分子非酶抗氧劑與機體自由基的產生在正常生理情況下是處于動態平衡狀態中，一旦這種平衡被打破，機體內包括氧自由基以及其活性衍生物就會產生過多，這類統稱為活性氧族（reactive oxygen species，ROS）物質產生過多會使機體發生一系列的氧化反應，使細胞脂質過氧化，產生脂質過氧化物如MDA等有害物質，結果使細胞質膜的生理功能遭受損害，細胞生命活力低下，導致組織器官功能減退，從而使機體進入衰老過程[6]。因此，通過保持機體內各種抗氧化酶活性，及時清除過量自由基，對于延緩衰老有著重要的意義。

火龍果的果肉和果皮中均含有豐富的營養物質，此外，還含有如黃酮類物質、三萜類化合物等生理活性藥用成分[7]?；瘕埞械亩喾宇惢衔铮哂星宄^量自由基危害的功效[8～9]。紅皮白肉火龍果以及紅皮紅肉火龍果的果肉和果皮中都含有豐富的花青素，其中火龍果中的甜菜花青素（betacyanines）既可以作為著色劑，又具有減少和清除自由基的能力[10～11]。本研究結果表明，火龍果肉、果皮能顯著增高血清GSHPx活性和肝臟SOD活性，同時能顯著降低血清和肝臟MDA含量，提示火龍果具有提高抗氧化酶活性、清除自由基、抑制脂質過氧化物產生等而發揮抗氧化作用。但在本次實驗中也發現，火龍果在提高血清SOD活性、肝臟GSHPx活性方面作用不明顯，這是否可能與產生SOD、GSHPx的組織器官有關，還有待進一步實驗研究。

綜上所述，火龍果具有一定抗氧化、延緩衰老的作用。其抗氧化和延緩衰老方面的有效成分和作用機制還有待進一步研究。

參考文獻

[1]鄧仁菊，范建新，蔡永強，等.國內外火龍果研究進展及產業發展現狀[J].貴州農業科學，2011，39（6）：188192.

[2]廖芳，王光銀，陳來平，等.火龍果果皮色素的提取及抗氧化活性的研究[J].凱里學院學報，2013，31（6）：6165.

[3]陳冠林，鄧曉婷，胡坤，等.火龍果的營養價值、生物學活性及其開發應用[J].現代預防醫學，2013，40（11）：20302033.

[4]楊翠榮.衰老的機理與藥物抗衰老作用的分析[J].北方藥學，2014，11（3）： 163，120.

[5]周文麗，張建鵬，馮偉華，等.腦衰老機制與腦疾病的關系[J].生命的化學，2008，28（4）：435438.

[6]黃麗娟，黃彥峰，王映，等.茴香提取液對糖尿病大鼠血清NO、MDA和SOD的影響[J].右江民族醫學院學報，2016，38（1）：1416.

[7]趙志平，楊春霞.火龍果的開發與發展前景[J].中國種業，2006，6（2）：1314.

[8] He X，Liu RH.Phytochemicals of apple peels：isolation，structure elucidation，and their antiproliferative and antioxidant activities[J].J Agric Food Chem，2008，56（21）：99059910.

[9] Lamperi L，Chiuminatto U，Cincinelli A，et al.Polyphenol levels and free radical scavenging activities of four apple cultivars from integrated and organic farming in different italian areas[J].J Agric Food Chem，2008，56（15）：65366546.

[10] Stintzing FC，Carle R.Functional properties of anthocyanins and betalains in plants，food，and in human nutrition[J].Trends FoodSci Tech，2004，15（1）：1938.

[11]Tenore GC，Novellino E，Basile A.Nutraceutical potential and antioxidant benefits of red pitaya（Hylocereus polyrhizus）extracts[J].J Funct Foods，2012，4（1）：129136.

（收稿日期：2016-05-25修回日期：2016-08-06）

（編輯：梁明佩）

鄭守歡 韋玉娜 黎瑜霜 魏海帆 李朝敢

【摘要】目的探討火龍果對衰老模型小鼠血清和肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性以及對丙二醛（MDA）含量的影響。

方法設立衰老模型組、火龍果皮組、火龍果肉組和正常對照組，每組12只小鼠列入統計分析，衰老模型小鼠每天分別給予火龍果的果皮和果肉（100 g·kg1·d1）喂養，40 d后處死小鼠，取血清及肝臟測定GSHPx、SOD活性和MDA含量。

結果與衰老模型組比較，火龍果皮組、火龍果肉組小鼠血清中的GSHPx活性顯著增高（P<0.01），MDA含量顯著降低（P<0.05或P<0.01）；火龍果皮組、火龍果肉組小鼠肝臟中SOD的活性顯著增高（P<0.01），火龍果肉組MDA含量顯著降低（P<0.05）。

結論火龍果具有增強抗氧化酶活性而發揮抗氧化作用。

【關鍵詞】火龍果；GSHPx；SOD；MDA

中圖分類號：R285.5文獻標識碼：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2016.04.009

火龍果（Hylocereus undatus），又稱紅龍果、吉祥果和仙蜜果等，是仙人掌科（Cataceae）量天尺屬（Hylocere usundatus）植物果實，是近年來在我國備受關注的一種熱帶亞熱帶經濟植物[1]。目前在我國海南、福建、廣西、廣東和貴州省等地被大面積種植，具有極高的經濟價值?；瘕埞矶际菍?，火龍果果肉和果皮富含植物多糖、植物蛋白質及多種氨基酸、脂肪酸及礦物質等，此外，還含有多種生物活性物質，如多酚、黃酮類化合物、花青素等，而這些天然多酚、黃酮類化合物、花青素被實驗證實具有清除自由基和良好的抗氧化作用[2～3]。

衰老是一種生命過程的必然規律，是機體各種組織和器官功能的時間依賴性衰退，是各種生命成熟后都一定經歷的最后階段，衰老不能抗拒，但是可以通過藥物干預延緩衰老，如通過保持機體具有足夠的抗氧化物質，就能及時清除機體內過量的自由基，保持機體健康和抗衰老[4]。由于火龍果是天然抗氧化劑的良好來源，因此本實驗以火龍果果皮和果肉為原料，從抗氧化酶活性的角度探討火龍果的抗氧化作用。現將實驗方法及結果報告如下。

1材料與方法

1.1藥物及試劑

新鮮火龍果，紅皮白肉，采購于廣西百色市；D半乳糖購于武漢博士德生物工程有限公司；谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）等測定試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

1.2實驗動物及動物分組

60只健康昆明種小白鼠，雌雄各半，體重（20±2）g，由右江民族醫學院實驗動物中心提供（許可證號：SYXK20110010）。小鼠被隨機分成4個實驗組：衰老模型組、火龍果皮組、火龍果肉組和正常對照組，每組15只。

1.3衰老模型的建立及給藥

采用皮下注射D半乳糖（150 mg/kg）建立衰老小鼠模型，正常對照組小鼠皮下注射等量生理鹽水。在造模的同時，火龍果皮組、火龍果肉組小鼠按體重劑量100 g·kg1·d1分別喂食火龍果皮和火龍果肉，連續注射和喂養40 d。

1.4血清GSHPx、SOD活性和MDA含量的測定

每只小鼠摘眼球取血液于1.5 ml EP管中，經過37℃恒溫水浴靜置30 min后，3000 rpm離心10 min獲得血清，根據相應試劑盒操作說明書分別測定GSHPx、SOD活性和MDA含量。

1.5肝臟GSHPx、SOD活性和MDA含量的測定

小鼠取血后，迅速斷椎處死，及時摘取肝臟，先用4℃預冷的生理鹽水清洗肝臟表面血液，再用干凈的濾紙吸干表面水分，稱重，用玻璃勻漿器于冰水浴中進行手工勻漿，再加入9倍體積的生理鹽水稀釋制成10%肝勻漿，以3000 rpm離心10 min，根據相應試劑盒操作說明書分別取上清液部分測定GSHPx、SOD活性和MDA含量。

1.6統計學方法

采用SPSS 19.0統計軟件進行統計學處理，實驗過程中每組小鼠因為種種原因均有意外死亡，因此以每組12只實驗數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差（±s）表示，多組間均數比較采用單因素方差分析，各組和對照組兩兩比較采用最小顯著差法（LSD法），檢驗水準：α=0.05。

2結果

2.1火龍果對小鼠血清GSHPx、SOD活性和MDA含量的影響

與正常對照組比較，火龍果肉組、火龍果皮組血清GSHPx活性均顯著升高（P<0.05或0.01）；而衰老模型組血清GSHPx活性顯著降低（P<0.05）；火龍果皮組血清MDA含量顯著降低（P<0.05）。與衰老模型組比較，火龍果肉組、火龍果皮組血清GSHPx活性均顯著升高（P<0.01），而MDA含量均顯著降低（P<0.05或0.01）。但火龍果肉組、火龍果皮組血清SOD活性與正常對照組比較以及與衰老模型組比較差異均無統計學意義（P>0.05）。見表1。

2.2火龍果對小鼠肝臟GSHPx、SOD活性和MDA含量的影響

與正常對照組相比，火龍果肉組、火龍果皮組和衰老模型組肝臟MDA含量均有顯著升高（P<0.01）；同時衰老模型組肝臟SOD活性顯著降低（P<0.01）。與衰老模型組相比，火龍果肉組、火龍果皮組肝臟SOD的活性顯著升高（P<0.01）；火龍果肉組MDA含量顯著降低（P<0.05）。但火龍果肉組、火龍果皮組肝臟GSHPx活性與正常對照組相比以及與衰老模型組相比差異均無統計學意義（P>0.05）。見表2。

3討論

在眾多研究抗衰老機制中，自由基學說被公認為是衰老發生發展的重要機制之一[5]。自由基學說認為，人體抗氧化防御體系中的各種抗氧化酶如GSHPx、SOD等和小分子非酶抗氧劑與機體自由基的產生在正常生理情況下是處于動態平衡狀態中，一旦這種平衡被打破，機體內包括氧自由基以及其活性衍生物就會產生過多，這類統稱為活性氧族（reactive oxygen species，ROS）物質產生過多會使機體發生一系列的氧化反應，使細胞脂質過氧化，產生脂質過氧化物如MDA等有害物質，結果使細胞質膜的生理功能遭受損害，細胞生命活力低下，導致組織器官功能減退，從而使機體進入衰老過程[6]。因此，通過保持機體內各種抗氧化酶活性，及時清除過量自由基，對于延緩衰老有著重要的意義。

火龍果的果肉和果皮中均含有豐富的營養物質，此外，還含有如黃酮類物質、三萜類化合物等生理活性藥用成分[7]?；瘕埞械亩喾宇惢衔?，具有清除過量自由基危害的功效[8～9]。紅皮白肉火龍果以及紅皮紅肉火龍果的果肉和果皮中都含有豐富的花青素，其中火龍果中的甜菜花青素（betacyanines）既可以作為著色劑，又具有減少和清除自由基的能力[10～11]。本研究結果表明，火龍果肉、果皮能顯著增高血清GSHPx活性和肝臟SOD活性，同時能顯著降低血清和肝臟MDA含量，提示火龍果具有提高抗氧化酶活性、清除自由基、抑制脂質過氧化物產生等而發揮抗氧化作用。但在本次實驗中也發現，火龍果在提高血清SOD活性、肝臟GSHPx活性方面作用不明顯，這是否可能與產生SOD、GSHPx的組織器官有關，還有待進一步實驗研究。

綜上所述，火龍果具有一定抗氧化、延緩衰老的作用。其抗氧化和延緩衰老方面的有效成分和作用機制還有待進一步研究。

參考文獻

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[6]黃麗娟，黃彥峰，王映，等.茴香提取液對糖尿病大鼠血清NO、MDA和SOD的影響[J].右江民族醫學院學報，2016，38（1）：1416.

[7]趙志平，楊春霞.火龍果的開發與發展前景[J].中國種業，2006，6（2）：1314.

[8] He X，Liu RH.Phytochemicals of apple peels：isolation，structure elucidation，and their antiproliferative and antioxidant activities[J].J Agric Food Chem，2008，56（21）：99059910.

[9] Lamperi L，Chiuminatto U，Cincinelli A，et al.Polyphenol levels and free radical scavenging activities of four apple cultivars from integrated and organic farming in different italian areas[J].J Agric Food Chem，2008，56（15）：65366546.

[10] Stintzing FC，Carle R.Functional properties of anthocyanins and betalains in plants，food，and in human nutrition[J].Trends FoodSci Tech，2004，15（1）：1938.

[11]Tenore GC，Novellino E，Basile A.Nutraceutical potential and antioxidant benefits of red pitaya（Hylocereus polyrhizus）extracts[J].J Funct Foods，2012，4（1）：129136.

（收稿日期：2016-05-25修回日期：2016-08-06）

（編輯：梁明佩）