急性呼吸窘迫綜合征患者血清中嗜酸性粒細胞趨化因子－3、白細胞介素－13和－35的表達及意義

急性呼吸窘迫綜合征患者血清中嗜酸性粒細胞趨化因子-3、白細胞介素-13和-35的表達及意義

劉鈺曾俊汪衛立

(金華廣福醫院重癥醫學科，浙江金華321000)

摘要〔〕目的觀察急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)患者血清中嗜酸性粒細胞趨化因子(EOTAXIN)-3、白細胞介素(IL)-13及-35表達，分析其臨床價值。方法78例ARDS患者作為觀察組，70例正常成人血清樣本作為對照組，檢測兩組血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達，分析三者在不同臨床特征中的表達差別。結果兩組血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達差異有統計學意義。觀察組血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達與病變嚴重程度及預后密切相關。相關分析顯示觀察組中EOTAXIN-3和IL-13具有正相關性，IL-13和IL-35具有負相關性。結論ARDS患者血清中EOTAXIN-3和IL-13高表達、IL-35低表達不僅可以促進病變進展，還能在一定程度上判斷病情嚴重程度和預后。EOTAXIN-3、IL-13和IL-35可能具有一定的協同作用。

關鍵詞〔〕急性呼吸窘迫綜合征；嗜酸性粒細胞趨化因子-3；白細胞介素(IL)-13；IL-35

中圖分類號〔〕R56〔文獻標識碼〕A〔

第一作者：劉鈺(1977-)，男，主治醫師，主要從事重癥醫學研究。

急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)是一種常見的危重癥，病死率較高〔1〕，其發病機制復雜，主要與肺水腫形成和肺組織炎癥反應發生相關〔2〕。嗜酸性粒細胞趨化因子(EOTAXIN)-3被認為與遲發性變態反應相關的炎性因子，同時對判斷急、慢性炎癥的程度有一定作用〔3〕。白細胞介素(IL)-13是一種由CD4+的Th2細胞分泌的多效性細胞因子，不僅具有免疫調節作用，還可以激活EOTAXIN，形成炎性的瀑布效應〔4〕。IL-35是IL家族的新成員，可以抑制炎癥反應，并防止過度的自身免疫反應發生〔5〕。本研究關注ARDS患者血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達，探討其臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料2011年1月至2013年12月我院診治的ARDS患者78例作為觀察組，其中男41例，女37例；年齡42~84歲，平均60.3歲。納入參考JAMA：ARDS柏林定義〔6〕。排除標準：①伴有惡性腫瘤的患者；②有風濕免疫性疾病史的患者；③嚴重血液系統疾病的患者。選擇同期在我院體驗證實為健康的成年人血清標本作為對照組，其中男35例，女35例；年齡45~67歲，平均57.7歲。

1.2EOTAXIN-3、IL-13和IL-35檢測方法觀察組于確診后抽取空腹靜脈血10 ml，對照組抽取空腹靜脈血10 ml，離心后分離血清，放在-20℃冰箱中待檢。EOTAXIN-3、IL-13和IL-35檢測均應用ELISA法。嚴格實驗步驟，努力減少誤差。

1.3氧合狀態分級輕度：血氧分壓(PaO2)/吸入氣氧濃度分數(FIO2)=201~300 mmHg，且呼氣末正壓(PEEP)或持續氣道正壓(CPAP)≤5 cmH2O。中度：PaO2/FIO2=101~200 mmHg，且PEEP≥5 cmH2O。重度：PaO2/FIO2≤100 mmHg，且PEEP≥10 cmH2O。

1.4統計學方法應用SAS6.12軟件進行t檢驗、方差分析和線性相關性分析。

2結果

2.1兩組血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表達的比較觀察組中EOTAXIN-3和IL-13表達明顯高于對照組，IL-35表達明顯低于對照組。見表1。

2.2不同氧合狀態分組患者血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表達的比較不同氧合狀態分組患者血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達差異有統計學意義。見表2。

2.3隨訪存活組與死亡組血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表達量的比較存活和死亡組血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達量差異有統計學意義。見表3。

2.4觀察組中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表達的相關性觀察組中EOTAXIN-3和IL-13具有正相關性(r=0.46，P=0.041 2)，IL-13和IL-35具有負相關性(r=-0.48，P=0.040 9)。

組別nEOTAXIN-3(μg/L)IL-13(mg/L)IL-35(mg/L)觀察組7878.20±16.4376.71±12.5755.86±20.87對照組7053.34±11.8546.54±9.7698.45±16.76t/P值8.68/0.010811.23/0.003110.13/0.0086

表2不同氧合狀態分組患者血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表達的比較

氧合狀態nEOTAXIN-3(μg/L)IL-13(mg/L)IL-35(mg/L)輕度2670.81±20.3266.37±18.5166.46±14.32中度2877.51±19.8674.77±20.4154.65±16.13重度2485.51±20.3189.61±21.2655.73±13.31F/P值8.09/0.01527.97/0.01987.61/0.0214

組別nEOTAXIN-3(μg/L)IL-13(mg/L)IL-35(mg/L)存活組6070.41±20.5164.56±11.2463.47±20.12死亡組1897.13±21.32113.13±32.4633.74±7.65t/P值7.08/0.029811.23/0.00029.31/0.0119

3討論

ARDS是全身炎癥性反應發生在肺部的表現，也提示機體正常炎性反應過度〔7,8〕。在ARDS發展過程中，促炎介質與抗炎介質的平衡失調〔9,10〕。EOTAXIN-3是一種選擇性EOTAXIN和強有力的激活劑，通過與其受體結合，引起機體一系列的反應，主要見于炎性疾病，尤其是在炎性介質誘導后使其分泌增多〔11〕。EOTAXIN-3在機體內環境中升高提示機體存在著明顯的致炎因子及持續性亞急性或慢性炎癥改變〔12〕。IL-13主要由活化的Th2細胞分泌，活化的單核細胞、CD8+細胞和B細胞也可以少量產生。IL-13可以刺激B細胞的增殖過程，減少其凋亡現象，同時對Ig合成有一定的影響〔13,14〕。有研究認為IL-13可抑制單核細胞的抗體介導的細胞毒作用，并調節炎性相關因子DNA和mRNA的表達，在轉錄水平上抑制其發生，其常與IL-1、IL-6、腫瘤壞死因子(TNF)-α等協同作用〔15〕。IL-35是IL家族的新成員，主要由Treg分泌，在正常機體中表達較為穩定，對抑制炎性反應及免疫因子的活性有重要作用〔16,17〕。IL-35可以防止過度的自身免疫反應發生〔18〕。也有觀點認為IL-35在經樹突細胞刺激后產生，能抑制外周血中CD4和CD8陽性的T細胞反應，抑制過敏性疾病的發展〔19,20〕。

本實驗提示EOTAXIN-3和IL-13、IL-35三者異常表達對促進病變進展有重要作用。EOTAXIN-3的高表達是機體炎性高反應狀態的一個指標，可以激活嗜堿性粒細胞、CD4陽性的T細胞和樹突細胞。研究認為EOTAXIN-3還可以促進IL-1B、IL-4和IL-5的表達，使機體的亞急性炎癥或慢性炎癥呈持續性發展〔12〕。本實驗結果提示EOTAXIN-3、IL-13和IL-35蛋白均參與ARDS的進展過程，也提示在ARDS病變形成和發展過程中聯合檢測EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達可以在一定程度上判斷病變程度和患者的預后，即EOTAXIN-3和IL-13高表達、IL-35低表達時病變進展快，患者的預后差。本文提示EOTAXIN-3、IL-13和IL-35之間具有一定的協同作用。孟瑩等〔15〕認為EOTAXIN-3是嗜酸性粒細胞化學激動劑，可以釋放信號促使嗜酸性粒細胞向炎癥區域浸潤，并在過敏反應的早期階段激活免疫相關細胞，IL-13對EOTAXIN-3有刺激作用，呈明顯的量效關系。Li等〔21〕也認為IL-13是引起EOTAXIN-3表達的最重要的細胞因子，而與炎癥相關最重要的TNF-α，不能刺激EOTAXIN-3的產生，但是TNF-α可以增加IL-13的表達，進而有效刺激EOTAXIN-3的分泌。

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〔2013-12-19修回〕

(編輯苑云杰)