引入地西泮對速眠新復合氯胺酮麻醉效果的改進觀察

技術方法

引入地西泮對速眠新復合氯胺酮麻醉效果的改進觀察

曹春艷，康寧，嚴笠，胡正云，申志惠，肖苒

(中國醫學科學院北京協和醫學院整形外科醫院，北京100144)

【摘要】目的改進速眠新單純與復合麻醉方法的不足，觀察引入地西泮對速眠新復合鹽酸氯胺酮麻醉效果的影響。方法成年實驗家兔80只，雌雄各半，隨機分為A、B、C三組，A組肌肉注射速眠新(0.3 mL/kg),B組肌肉注射速眠新復合鹽酸氯胺酮混合液(0.3 mL/kg)，C組肌肉注射速眠新復合鹽酸氯胺酮混合液(0.3 mL/kg)，并靜注地西泮注射液(1.5 mL/kg)，對比三組的麻醉效果、麻醉顯效時間、初次麻醉維持時間、總麻醉藥用量及總手術時間。結果C組麻醉顯效時間明顯短于A、B組(P<0.01)；初次麻醉維持時間C組長于A、B組(P<0.01)；總麻醉藥用量C組明顯少于A、B組(P<0.01)；C組總的手術時間少于A、B兩組(P<0.01)；C組的麻醉效果優于A、B組(P<0.01)。結論采用速眠新、鹽酸氯胺酮聯合地西泮復合麻醉明顯提高了麻醉效果，是適于家兔敏感手術部位及手術時間較長的動物實驗的理想麻醉方法。

【關鍵詞】麻醉；速眠新；氯胺酮；地西泮；兔

[作者簡介]曹春艷(1965-)，女，主管技師，研究方向：醫學動物實驗教學與實驗動物麻醉。

[通訊作者]肖苒(1970-)，女，研究員，研究方向：基礎醫學研究。Email: rxiao163@163.com。

【中圖分類號】R332【文獻標識碼】 A

doi:10.3969.j.issn.1671.7856. 2015.001.013

Experimental observation of aesthetic effects of introducing diazepam

into combined aesthesia of Sumianxin and Ketamine hydrochloride

CAO Chun-yan，KANG Ning，YAN Li，HU Zheng-yun，SHEN Zhi-hui，XIAO Ran

(Research Center of Plastic Surgery Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences &

Peking Union Medical College, Beijing 100144, PR China)

Abstract【】Objective To observe the effectiveness of introducing Diazepam into combined aesthesia of Sumianxin and ketamine hydrochloride. MethodA total of 80 rabbits of both genders for operation were randomly divided into A, B and C groups. The A group was injected with Sumianxin intramuscularly (0.3 mL/kg by weight). The B group was injected with Sumianxin and ketamine hydrochloride intramuscularly (0.3 mL/kg by weight). The C group was injected with Diazepam intravenously (1.5 mL/kg by weight) combined with Sumianxin and ketamine hydrochloride injected intramuscularly (0.3 mL/kg by weight). The aesthetic effects, induction time, anesthesia maintaining time, total anaesthetic dose and operation time were observed, recorded and compared. ResultThe induction time of the C group was significantly shorter than A and B groups (P<0.01). The initial anesthesia maintaining time of the C group was the longest among the three (P<0.01) with least total anaesthetic dose (P<0.01). The operation time of the C group was the least with best aesthetic effects (P<0.01). ConclusionIntroducing Diazepam into combined aesthesia of Sumianxin and ketamine hydrochloride can improve the aesthetic effects. Therefore, this is an optional aesthetic method for time-consuming animal operation or sensitive surgical sites of rabbits.

【Key words】Anesthesia；Sumianxin；Ketamine hydrochloride；Diazepam；Rabbit

復合麻醉是由兩種或兩種以上的麻醉藥物或麻醉方法同時或先后應用，以達到完善的術中及術后鎮痛效果。因為它的全麻藥用量少及副作用小等特點，已逐漸成為動物醫學領域的主要流行趨勢[1]。麻醉藥及麻醉方法的選擇，不僅考慮手術部位，還應考慮手術時間長短[2]。過去所采用的速眠新以及目前最常用的速眠新復合氯胺酮的麻醉方法，存在麻醉不全、麻醉維持時間短及麻醉深度不夠等缺點，不能滿足一些敏感部位和對鎮痛要求比較高的手術時間長的動物外科手術。針對這種情況，在實驗兔靜脈皮瓣凝血實驗模型手術過程中，我們根據此實驗特點，并結合以往的麻醉經驗，采用了在速眠新與氯胺酮麻醉的基礎上，靜注一定劑量的地西泮注射液這種復合麻醉的方法，經過一年多的試驗摸索，取得了很好的麻醉效果，現報告如下。

1材料和方法

1.1藥物及配制

地西泮注射液(天津金耀藥業有限公司)，批號：1301311；速眠新注射液(吉林省康達動物藥業有限公司)，批號：獸藥字(2009)070111777；氯胺酮注射液(福建古田藥業有限公司)，批號：120821；速眠新和氯胺酮混合液，1:1等體積配制。

1.2實驗動物的選擇

健康普通級實驗家兔(北京隆安實驗動物養殖中心)【SCXK(京)2009-0005】80只，雌雄不限，4～5月齡，體重2.5～3.5kg。動物實驗在整形外科醫院研究中心動物室完成【SYXK(京)2010-0008】。

1.3麻醉方法及用量

實驗家兔80只，單籠飼養。觀察一周后，健康狀態無異常，隨機分成A、B、C三組，各組月齡及體重差異無統計學意義。每組家兔實驗前稱體重。A組：實驗兔20只。首次給予速眠新0.3 mL/kg體重肌注麻醉。當家兔呼吸變淺，脈搏加快時追加首次劑量的一半，手術后續的麻藥追加也按此劑量。B組：實驗兔20只。按0.3 mL/kg體重的劑量肌注鹽酸氯胺酮與速眠新混合液，速眠新和氯胺酮等體積混合(1:1)。動物觀察及麻藥追加劑量同A組。C組：實驗兔40只。先以0.3 mL/kg體重的劑量肌注鹽酸氯胺酮與速眠新混合液，配伍及劑量同B組。當兔對外界刺激反應遲鈍時，以22號靜脈留置針沿兔耳緣靜脈穿刺，緩慢推注地西泮注射液1.5 mL/kg體重，速度為2～3 mL/min。靜脈推注時觀察動物睫毛、呼吸、肌肉松弛情況。手術進行時，注意觀察動物的麻醉狀態，當動物的有效麻醉變淺，只需追加首次鹽酸氯胺酮與速眠新混合液的1/2劑量，直至手術完成。

1.4觀察指標

1.4.1麻醉誘導時間：自給藥至實驗家兔出現麻醉狀態的時間，此時肌張力下降，呼吸平穩，痛覺逐漸消失等。

1.4.2首次麻醉維持時間：動物進入麻醉后到第一次有痛覺反應，無法手術而追加麻醉藥的時間。

1.4.3麻醉藥物的追加次數及速眠新用藥總量：記錄整個手術過程中A、B、C三組從始至終麻醉藥物的追加次數及速眠新用藥量的累積數量。

1.4.4麻醉效果：

(1)以睫毛、角膜反射減弱，呼吸頻率30～60次/min且平穩，心率120～150次/min，肌張力松弛，手術切割、剝離、無反應為準。

(2)動物死亡率：術中或術后(排除手術原因)麻醉死亡例數及術后一月內動物死亡例數。

1.5統計學方法

采用SPSS17 統計軟件進行分析。計量資料以x±S表示，組間比較采用成組方差分析，以P<0.05為差異，有統計學意義。

2結果

2.1麻醉時間

三種麻醉方法的麻醉誘導時間、首次麻醉維持時間、總的手術時間的數據見表1。數據顯示：其三種時間的時長差異具有統計學顯著性(P<0.01)。C組誘導時間短，與A、B兩組比較有顯著差異性(P<0.01);C組首次麻醉維持時間的時長明顯大于A、B兩組,B組大于A組，組間比較有顯著差異性(P<0.01)；總的手術時間A、B、C三組之間同樣存在顯著差異(P<0.01)，C組總的手術時間少于其他兩組。

2.2麻醉效果

C組麻醉效果好，動物很快進入麻醉狀態，手術進行順利，因而總的手術時間要少于其他兩組，而且術中麻藥追加次數及麻醉藥用量明顯少于A組、B組(P<0.01)，術中及術后動物無死亡；而A組、B組麻醉效果不理想，時常出現麻醉不全狀況，肌松效果不好，麻醉深度不夠，尤其A組術中追加麻醉藥次數多，速眠新的麻醉總用藥量高，因而死亡率也最高。結果顯示，A組實驗家兔共死亡4只，其中術中死亡一只，術后1 d死亡1只，術后3 d死亡1只，術后6 d死亡1只。B組死亡率低于A組，術后三天動物死亡一只。結果見表2：

表1　三種麻醉方法的麻醉時間比較

注：★與C組比較，P<0.01；▲與B組比較，P<0.01。

Note:★Compared with the C group,P<0.01;▲Compared with the B group,P<0.01.

表2　三種麻醉方法的麻醉效果比較

注：★與C組比較，P<0.01；▲與B組比較，P<0.01。

Note:★Compared with the C group,P<0.01;▲Compared with the B group,P<0.01.

3討論

在靜脈皮瓣凝血實驗動物模型制作過程中，實驗動物需要術后連續3 d手術部位與壓力負壓器相連，同時3 d后還要連續數日進行取材，因此動物的選擇也是本實驗成功的關鍵因素之一。雖然小型豬的皮瓣比較適合此類實驗，但體型相對較大，操作不方便，儀器不好固定且價格較高。而實驗家兔溫順，體型適中，容易操作，相對大動物來說價格便宜，試驗成本低，很顯然家兔成為符合此實驗動物模型的首選實驗動物。

在本實驗中，由于手術部位皮下神經非常敏感，術區較大，整個手術時間較長，一般需要3 h左右。同時需要術后3～7 d每日連續取材并連續數日觀察皮瓣存活情況。因此，不僅對麻醉的鎮痛、鎮靜效果要求比較高，而且需要麻醉劑用藥量要少，這樣才能盡量減少麻醉劑的不良反應，保證動物術后連續麻醉取材而不至于死亡。顯而易見，麻醉質量直接影響著實驗進程和實驗結果。良好的麻醉效果不但是實驗動物福利倫理的重要保證，也是整個外科手術成功的關鍵環節，其中最為重要的是采用何種麻醉劑和麻醉方法[3]。

目前，大多數復合動物麻醉仍以速眠新或氯胺酮為主，在一些動物外科手術及模型制備中需多次給藥，且術后多見不良反應，給實驗帶來諸多不便[4]。單獨使用速眠新Ⅱ時具有操作簡單，麻醉效果確切，肌松效果良好等特點，但誘導期長，且有出現麻醉不全的情況，麻醉深度較淺，始終有個別動物鎮痛不全[5]，由此導致動物術中體動次數較多，常常需反復追加麻藥，不僅影響手術的實施，而且易造成動物體內麻藥蓄積，從而出現對心血管和呼吸系統的抑制作用，引起血壓下降，心動過緩，出現麻醉意外，造成實驗動物死亡。在本實驗中，速眠新組麻醉誘導期長，動物術中體動次數多，需反復追加麻醉劑，有產生快速耐受的可能，其結果不僅影響手術的連貫性，還影響手術的質量，導致總的手術時間延長，麻醉總用藥量加大，相應也加大了毒副作用的風險，增加了動物的死亡率。如實驗所示，該組有4只動物死亡，動物死亡率最高。而氯胺酮為“分離麻醉劑”，對交感神經和循環系統有興奮作用，單獨使用時，唾液、氣管和支氣管分泌物增多，肌肉松弛較差，對心肌有直接抑制作用，大劑量應用時可出現呼吸抑制和呼吸暫停，因而極少單獨使用，多用于基礎麻醉或其他藥物復合物[6]。目前，氯胺酮與速眠新復合麻醉已被廣泛應用于動物實驗中。兩種藥物復合麻醉優于單純藥物麻醉，具有更好的鎮靜、鎮痛和肌肉松弛作用，但要注意第一次的給藥劑量，否則麻醉效果欠佳，重復給藥造成交感神經興奮，大劑量對心肌有抑制作用[7]。在B組實驗中，我們發現兩種藥物復合麻醉效果確實，麻醉藥用量減少，麻醉起效時間好于A組，麻醉維持時間較單純速眠新組長。但由于動物的個體差異，麻醉藥劑量不好控制，存在麻醉不全、麻醉深度不理想、鎮痛作用弱、麻醉維持時間短的情況，一般麻醉維持時間在35～45 min之間，動物術中蘇醒次數較多，根據手術需要，需反復追加麻藥，這樣不僅影響了手術的進程，也易導致麻藥累積用量加大。雖然此種復合麻醉方法的麻醉藥的用量少于單純藥物麻醉，但隨著麻醉藥的反復追加，麻醉藥用量加大的同時麻醉風險也隨之加大。據實驗觀察，有部分動物術后精神狀態不佳，食欲不振，其中有一只動物術后3 d死亡，可能與麻藥蓄積及毒副作用有關。由此可見，速眠新與氯胺酮復合麻醉作為實驗家兔手術部位敏感和手術時間長的麻醉藥物顯然不妥，此種麻醉方法僅能滿足家兔一般的外科手術要求。

地西泮是長效苯二氮卓類藥，是一種通過抑制中樞神經系統而達到緩解過度興奮和引起近似生理性睡眠的脂溶性很高的藥物，靜脈注射后作用迅速。小劑量時主要起鎮靜作用，隨著劑量加大，依次出現催眠、抗驚厥和麻醉作用。此外它具有安全、高效、作用持久等特點，同時具有強化麻醉劑和麻醉性鎮靜劑的效果[8-9]。據楊霽[10]等研究證實，地西泮與速眠新Ⅱ復合麻醉，不僅加強了速眠新Ⅱ的鎮痛、鎮靜作用，而且肌松效果明顯，同時對動物的呼吸、循環系統影響小。其作用機理可能與γ氨基丁酸(GABA)能神經傳遞的突觸功能有關。它可以通過抑制γ氨基丁酸(GABA)能神經傳遞的突觸功能進一步使速眠新中a2受體激動劑的鎮痛作用得到加強。而地西泮與氯胺酮復合麻醉，兩種藥物配伍達到優勢互補的麻醉效果，動物蘇醒快，死亡率低。對心率與血壓的影響輕微，同時也減少了氯胺酮的用藥量，減輕氯胺酮的不良反應[11]。基于地西泮與氯胺酮及速眠新的協同作用，同時根據復合麻醉所遵循的兩條原則,即根據麻醉藥物的相互作用原理, 合理選擇麻醉藥物，以及根據實驗動物的生理特點和麻醉藥物易于吸收的方式，合理選擇麻醉途徑[12]。于是我們根據地西泮是一種脂溶性很高的藥物，靜脈注射后作用迅速的特點，在本實驗中，我們采取在肌注速眠新和氯胺酮混合液后，待動物反應遲鈍時，靜注一定劑量地西泮注射液的麻醉方法。大樣本研究結果表明，此種復合麻醉方法在麻醉起效時間、首次麻醉維持時間、追加麻醉劑的次數、麻醉劑的總用藥量、動物的死亡率及完成手術時間上與A、B兩組有顯著差異性(P<0.01)。麻醉起效時間明顯縮短，大大加快了手術前的準備工作；首次麻醉維持時間延長，追加麻醉劑次數明顯減少，麻醉深度適宜，動物自主呼吸平穩，說明了地西泮明顯地延長了氯胺酮和速眠新的復合麻醉時間，彌補了A、B兩組麻醉維持時間短、追加麻醉藥次數多的缺點，因而對于手術的實施非常有利，手術進行順暢，總的手術時間明顯少于其他兩組，從而減少了對動物的刺激，符合動物福利倫理的原則。另外，本實驗結果顯示，C組麻醉劑總的用藥量及動物的死亡率明顯少于A組、B組，說明其麻醉的有效性、安全性高。因此，進一步保證了手術質量及動物術后的迅速恢復。實踐證明：由于引入一定劑量地西泮注射液，明顯加強了速眠新和氯胺酮的鎮靜、鎮痛和肌肉松馳的作用，而且最為重要的是在手術實施的過程中，術中只需追加麻藥1～2次，麻藥的追加次數明顯減少。因此，麻醉劑的用量也相應減少，使得無論速眠新的劑量還是氯胺酮的劑量都大大降低，避免了術中反復追加麻藥而帶來麻醉累計藥量加大；避免了麻藥在動物體內蓄積而導致對呼吸、心血管的抑制作用，從而降低了動物的死亡率，達到安全、有效的麻醉效果。此外這種復合麻醉方法對動物刺激小，降低了動物的恐懼感，并且后續的麻藥追加不用再次靜脈追加，只需肌注速眠新和鹽酸氯胺酮混合液首次劑量的一半，實驗操作變得簡單易行。因此，本實驗所采取的麻醉方法，不僅符合動物福利倫理要求，同時也保證了手術對麻醉質量的要求。

綜上所述，由于手術時間長，手術部位敏感，且對麻醉的鎮痛、鎮靜要求較高，A、B兩組麻醉方法不能滿足此實驗要求。而在速眠新和氯胺酮的麻醉基礎上，引入地西泮注射液復合麻醉，改進了原有麻醉方法的不足，降低了麻醉風險，延長了麻醉維持時間，麻醉效果確實，整個手術過程中產生的鎮痛、鎮靜、肌松效果都較完全且均衡，麻醉深度適宜，動物始終保持穩定狀態，避免了因麻醉過深而造成動物死亡，因麻醉過淺而導致手術無法正常進行的后果。由此可以推斷，地西泮可以增強氯胺酮與速眠新的鎮痛、鎮靜作用，且效果明顯，毒副作用少，術后恢復迅速，故三種藥復合麻醉是安全可靠、簡單易行、適用范圍大、毒副作用小的較為理想的麻醉方法。

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〔修回日期〕2014-12-01