高壓氧療法對大鼠心理應激條件下的牙周炎治療效果觀察

高壓氧療法對大鼠心理應激條件下的牙周炎治療效果觀察*

王瑢▲，桃子璽▲，何梁偉，黃世光△

(暨南大學醫學院口腔醫學系，廣東 廣州 510632)

[摘要]目的： 探討心理應激對大鼠實驗性牙周炎的影響，觀察高壓氧(hyperbaric oxygen, HBO)治療對心理應激相關牙周炎的療效。方法：清潔級4周齡雄性Wistar大鼠80只，隨機分為4組：(1)正常對照組；(2)牙周炎組：用浸有牙齦卟啉單胞菌株的絲線結扎左側上頜第2磨牙牙頸部，復制實驗性牙周炎模型；(3)單純應激組；(4)牙周炎+應激組。于實驗后第9周停止應激刺激，對除正常對照組外其它各組大鼠每組選取4只進行HBO治療。于實驗后2、4和8周末分批處死動物，每組處死4只，于實驗后10周末處死動物，每組處死8只。采血檢測血糖濃度、血漿促腎上腺皮質激素(ACTH)、皮質類固醇和腎上腺素含量。測量術區的牙周附著情況，制作牙體牙周聯合切片，觀察牙周的組織學改變。結果：檢測應激標記物的變化可見單純應激組的血糖及血漿ACTH、皮質類固醇和腎上腺素含量在實驗后第2、4周明顯高于正常對照組和牙周炎組(P<0.01)，第8周時血糖降至正常水平，但血漿ACTH、皮質類固醇和腎上腺素含量仍高于正常對照組和牙周炎組(P<0.05)；牙周炎+應激組在實驗后第2、4和8周血糖及血漿ACTH、皮質類固醇和腎上腺素含量均高于正常對照組和牙周炎組(P<0.05)；HBO治療組牙周炎+應激組血糖明顯低于非治療組(P<0.01)，單純應激組和牙周炎+應激組血漿ACTH、皮質類固醇和腎上腺素水平顯著下降(P<0.01)。大體觀察可見正常對照組及單純應激組牙周附著位置正常；牙周炎組出現牙齦萎縮，附著喪失明顯；牙周炎+應激組附著喪失明顯，根分叉暴露，HBO治療后，牙齦水腫減輕，牙周袋變淺。單純應激組與正常對照組在各時點的牙周附著水平的差異不顯著(P>0.05)；牙周炎+應激組附著喪失程度在各時點均明顯高于牙周炎組(P<0.01)；HBO治療結束后牙周炎組及牙周炎+應激組牙周附著喪失程度減輕(P<0.01)。組織學觀察可見牙周炎+應激組牙周組織破壞程度在各時點均重于牙周炎組；經HBO治療后，牙周組織炎癥程度減輕，炎癥細胞浸潤減少。結論：心理應激可加重牙周炎進程。HBO對大鼠實驗性牙周炎及心理應激相關牙周炎均有治療效果。

[關鍵詞]牙周炎； 動物模型； 心理應激； 高壓氧

[中圖分類號]R781.4+2; R363[文獻標志碼]A

doi:10.3969/j.issn.1000-4718.2015.11.026

[文章編號]1000-4718(2015)11-2090-06

[收稿日期]2015-04-21[修回日期] 2015-09-14

[基金項目]*河南省教育廳2014年度科學技術研究重點項目 (No. 14B310006)

通訊作者△Tel： 0370-3251628; E-mail： sqyzmcx@163.com

Effect of hyperbaric oxygen on periodontitis with psychological stress in ratsWANG Rong, TAO Zi-xi, HE Liang-wei, HUANG Shi-guang

(FacultyofDentistry,SchoolofMedicine,JinanUniversity,Guangzhou510632,China.E-mail:thshg@126.com)

ABSTRACT[]AIM: To investigate the role of chronic psychological stress on periodontitis and the effects of hyperbaric oxygen (HBO) on periodontitis with psychological stress in rats. METHODS: Male special pathogen-free Wistar rats (n=80) were randomly divided into 4 groups: (1)normal control group; (2)experimental periodontitis group: the periodontitis model was induced by wrapping 3/0 silk ligature inoculated with Porphyromonas gingivalis around the left maxillary second molar of the rats; (3)psychological stress stimulation group; (4)periodontitis model with stress stimulation group. Psychological stress was removed at the 9th week after ligature, and 4 rats from each experimental group were randomly chosen for HBO treatment. The rats were sacrificed at the 2nd， 4th， 8th and 10th weeks after ligature. The levels of blood glucose, adrenocorticotropic hormone (ACTH), corticosterone and adrenaline were measured as the stress markers. The histological changes of periodontal tissues were observed under microscope with HE staining. RESULTS: The levels of blood glucose, ACTH, corticosterone and adrenaline in psychological stress stimulation group and periodontitis with stress group were significantly higher than those in control group and experimental periodontitis group at the 2nd and 4th weeks after ligature (P<0.05). The levels of the stress markers were significantly lower than those in untreated groups in the 10th week after HBO (P<0.01). The sites of gingival attachment were normal in control group and psychological stress stimulation group. Periodontal pocket, and periodontal attachment loss (AL) were observed in experimental periodontitis group. The tissue damage was much heavier in periodontitis model with stress stimulation group as the furcation of tooth was exposed and the tissue damage was observed on both sides of the adjacent teeth. No significant difference of AL between psychological stress stimulation group and normal control group during the experiment was observed. The AL in periodontal model with stress stimulating group was significantly higher than that in experimental periodontitis group at the 2nd, 4th and 8th weeks (P<0.01). The level of AL was attenuated at the 10th week after HBO (P<0.01). No difference of histological change in periodontal tissues was observed between control group and psychological stress stimulation group. Severer inflammatory changes and alveolar bone destruction were observed in periodontitis with stress group than those in experimental periodontitis group. The levels of inflammation reduced at the 10th week after HBO. CONCLUSION: Stress stimulation is one of the inducing factors of periodontitis in rats, which aggravates periodontitis. HBO may represent a useful way in treating psychological stress periodontitis.

[KEY WORDS]Periodontitis; Animal models; Psychological stress; Hyperbaric oxygen

牙周炎是一種多因素疾病，是導致牙齒缺失的主要原因，其發病機制復雜。現代心身醫學認為，心理應激與牙周健康狀況密切相關，是牙周炎的重要危險因子[1]。由于牙周炎造成的牙列缺損、異味、疼痛、出血等問題使得牙周炎患者多伴有明顯的心理壓力[2]。高壓氧(hyperbaric oxygen，HBO)是指在超過0.1 MPa(1 ATA)壓力環境下吸入純氧[3]。目前對HBO治療心理應激相關牙周炎的研究尚未見報道，因此，本研究通過建立大鼠牙周炎模型，觀察心理應激對牙周炎的影響及HBO療法對心理應激相關牙周炎的治療效果，探討高壓氧治療牙周炎的可能機制。

材料和方法

1材料

SPF級Wistar大鼠購于廣東省醫學實驗動物中心；牙齦卟啉單胞菌株 (P.gingivalis)由四川大學華西口腔生物實驗室提供；拜安易血糖儀(BAYER3253型)和拜安易血糖檢測試紙(葡萄糖氧化酶法3257型)購于拜耳醫藥保健有限公司；促腎上腺皮質激素 (adrenocorticotrophic hormone, ACTH) 放免試劑盒和皮質類固醇放免試劑盒購于DiaSorin；腎上腺素放免試劑盒購于Biosource。YLC0.5/1型嬰兒高壓氧艙由西安第七零一研究所提供。

2方法

2.1牙周致病菌結扎絲線制備將3/0無菌絲線置于含有P.gingivalis改良GAM培養基(1 mg/L維生素K1、5%脫纖維蛋白羊血)中，于厭氧培養箱(體積分數：80% N2，10% H2，10% CO2)37 ℃培養5 d。

2.2動物模型的建立選取80只SPF級4周齡雄性Wistar大鼠，購于廣東省醫學實驗動物中心，在恒溫(22 ℃)、光照周期12 h交替、無特殊致病菌的環境中飼養1周后進行實驗。實驗分組如下：將實驗動物編號，按隨機數字表法分成以下4組，每組20只大鼠：(1)正常對照組：牙周不做任何處理；(2)單純應激組：牙周不做任何處理，于實驗開始每日予以心理應激刺激；(3)牙周炎組：根據本研究室已經建立的方法[4]，采用戊巴比妥鈉麻醉后用浸有P.gingivalis菌的3/0絲線結扎大鼠左側上頜第二磨牙牙頸部，結扎絲線置于齦溝內，于近中頰處打結，建立牙周炎模型(圖1)；(4)牙周炎+應激組：按上法復制牙周炎模型，同時于術后每日施以心理應激刺激。上述各組大鼠除了正常對照組外，于實驗第9周開始停止應激刺激，牙周炎組、單純應激組和牙周炎+應激組各隨機選取4只作為治療組大鼠進行HBO治療，連續治療2周。實驗后2、4和8周分批處死實驗動物，每時點每組處死4只大鼠，實驗后10周每組處死8只大鼠。

Figure 1.An image of standard ligature showed wrapped silk．

圖1浸有牙周致病菌的3/0絲線結扎大鼠上頜第二磨牙牙頸部

2.3應激方案采取2種應激刺激方案：(1)限制性應激：將大鼠置于空間局限的小鐵籠中，每次限制其活動及飲食2 h(圖2)；(2)冷水浸泡應激：將大鼠置于空間局限的小鐵籠中，用冷水浸至大鼠鎖骨以上位置，每次浸泡2 h(圖3)。實驗開始后，每天隨機選擇上述2種應激方案中的一種施于應激組大鼠，以模擬現實社會應激源的多樣性和不可預料性。

Figure 2.Restraint stress: a rat was placed in a tiny cages for 2 h to limit the activities and diet.

圖2限制性應激

Figure 3.Ice water stress: the rats were placed in a tiny cage with appropriate ice water to immerse the rat lower limbs for 2 h.

圖3冰水混合物浸泡應激

2.4HBO治療方案于實驗第9周停止應激刺激。上述各組大鼠除正常對照組外，牙周炎組、單純應激組和牙周炎+應激組各隨機選取4只作為治療組進行HBO治療 (0.25 MPa，YLC0.5/1型嬰兒高壓氧艙)，每天1次，每次暴露60 min，連續治療2周后于實驗第10周時處死動物。

2.5大體觀察及組織學觀察采用10%中性甲醛溶液心臟灌注處死大鼠，選用自制牙周探針檢測牙周附著喪失。牙周附著喪失為釉牙骨質界到牙周袋底的距離，測量部位為實驗牙頰、腭側近中、中央、遠中共6個點，取平均值。取出上頜骨，由中線切開，10%甲醛溶液(pH 7.0)固定48 h以上；采用混合脫鈣液進行脫鈣；制成近遠中向5 μm厚度的牙體牙周組織聯合切片，HE染色，中性樹膠封片，光學顯微鏡下觀察牙周組織學改變。

2.6應激標記物的檢測大鼠處死前非麻醉狀態下剪尾取尾靜脈血，采用拜安易血糖儀及血糖試紙測定血糖濃度。2%戊巴比妥鈉溶液腹腔注射麻醉后固定大鼠，心臟采血2 mL，室溫下于肝素抗凝管靜置1 h，-25 ℃冰箱內過夜，第2天4 000 r/min離心10 min后取血漿，放射免疫分析法測定ACTH、皮質類固醇和腎上腺素(具體方法按試劑盒說明書操作)。

3統計學處理

應用SPSS 13.0統計學軟件進行分析處理，所有數據以均數±標準差(mean±SD)表示。多樣本間的比較采用完全隨機設計的單因素方差分析(one-way ANOVA)，各組方差齊性時，多個樣本均數間的兩兩比較采用最小顯著差異(least significant diffe-rence, LSD)法檢驗，若方差不齊時采用Tamhane’s T2法，兩樣本間的比較采用小樣本t檢驗。以P<0.05為差異有統計意義。

結果

1應激標記物改變

血糖、血漿ACTH、皮質類固醇及腎上腺素的變化見表1～4。單純應激組的血糖、ACTH、皮質類固醇及腎上腺素在第2、4周時明顯高于正常對照組和牙周炎組(P<0.01)，在8周時單純應激組血糖恢復正常水平，血漿ACTH、皮質類固醇及腎上腺素水平在8周時下降，但仍較正常對照組和牙周炎組要高(P<0.05)；牙周炎+應激組的血糖、血漿ACTH、皮質類固醇及腎上腺素水平在第2、4和8周時均高于正常對照組和牙周炎組(P<0.05)。經HBO治療后，牙周炎+應激組血糖明顯降低(P<0.01)，單純應激組和牙周炎+應激組血漿ACTH、皮質類固醇和腎上腺素水平與非治療組相比顯著下降(P<0.01)。

2大體觀察

正常對照組及單純應激組牙周附著位置正常。牙周炎組第2 周時輕度牙齦萎縮，探及淺牙周袋，尚無明顯附著喪失；第4周時出現牙齦萎縮，附著喪失明顯；第8 周時附著喪失明顯加重。牙周炎+應激組第2 周時探及牙周袋，有附著喪失；第4 周時附著喪失嚴重；第8 周時附著喪失明顯加重，根分叉暴露，累及兩側鄰牙。于第9 周開始停止應激刺激進行HBO治療后，牙齦水腫減輕，探診見牙周袋變淺,見圖4。

表1　各實驗組和對照組大鼠血糖水平變化

P: periodontitis; S: stress. ** P<0.01 vs stress group; ## P<0.01 vs P+S group; △△ P<0.01 vs untreated group.

P: periodontitis; S: stress. * P<0.05, ** P<0.01 vs stress group; ## P<0.01 vs P+S group; △ P<0.05 vs untreated group.

P: periodontitis; S: stress. * P<0.05, ** P<0.01 vs stress group; ## P<0.01 vs P+S group; △△ P<0.01 vs untreated group.

P: periodontitis; S: stress.*P<0.05,**P<0.01vsstress group;##P<0.01vsP+S group;△△P<0.01vsuntreated group.

3附著喪失

附著喪失(attachment loss，AL)測量結果見表5，單純應激組在各時點與正常對照組比較差異均無統計學意義；牙周炎組和牙周炎+應激組的AL在各個時點明顯高于正常對照組和單純應激組(P<0.01)；在第4、8周時牙周炎+應激組的AL明顯高于牙周炎組(P<0.01)；牙周炎組和牙周炎+應激組隨時間延長AL明顯加重(P<0.01)；HBO治療后AL水平明顯下降(P<0.01)。

Figure 4.Observation of periodontal tissues in general. A: control group, no inflammation was found in the periodontal tissues; B: stress group (8 weeks), no inflammation was found in the periodontal tissues; C, D, E: periodontitis group (2, 4 and 8 weeks), visible inflammation was present; F, G, H: periodontitis + stress group (2, 4 and 8 weeks), severe inflammation was present; I: after HBO (10 weeks), periodontal inflammation was reduced.

圖4各實驗組各時點的大體觀察

表5　各組大鼠牙周附著喪失的變化

P: periodontitis; S: stress.**P<0.01vscontrol group;##P<0.01vsperiodontitis group;▲▲P<0.01vs4 week after operation in the same group;△△P<0.01vsuntreated group.

4組織學改變

正常對照組的牙周組織未見明顯炎癥表現，附著位置未見異常。牙齦上皮結構完整，牙周膜纖維排列整齊，結締組織內未見明顯的炎癥細胞浸潤，固有牙槽骨形態結構完整；單純應激組與正常對照組相比無明顯區別。組織學觀察見牙周組織結構正常，牙周膜纖維排列整齊，溝內上皮、結合上皮完整，牙槽骨未見吸收；牙周炎組的組織學觀察見牙齦上皮潰瘍，組織深部可見大量炎癥細胞浸潤，結合上皮向根方增殖，膠原纖維變性，血管擴張充血，牙槽骨表面破骨細胞活躍，見凹坑狀骨吸收，牙槽嵴頂高度降低；牙周炎+應激組的組織學觀察見牙周膜纖維排列紊亂，出現膠原疏松、變性，大量炎癥細胞浸潤，結合上皮向根方增殖，牙槽嵴頂被破壞，可見破骨細胞和骨吸收陷窩。HBO治療后，大鼠牙周組織炎癥減輕，牙周膜纖維排列整齊，結締組織內炎癥細胞浸潤減少，牙周組織中血管開放的數目增多，見圖5。

Figure 5.Histological changes of periodontal tissues. P: periodontitis; S: stress.

圖5各組大鼠牙周組織的HE染色結果

討論

牙周炎是一種以牙周支持組織破壞為主要表現的慢性感染性疾病，最終可導致牙齒脫落[5]。牙周炎的發病機制復雜，單純的某個因素無法解釋該病的嚴重性和復雜性。牙周致病菌是牙周病的始動因素，但一些能增加宿主易感性的因素是影響牙周病發生、發展和對治療反應的重要因素，其中心理應激就是其中之一。心理應激是指對人體造成傷害的心理因素。調查發現我國大城市人群健康危險性壓力發生率為44.54%，約75%的疾病發生與心理壓力有關，如高血壓、冠心病、牙周病等[6]。調查顯示，由于牙周炎造成的牙列缺損、異味、疼痛、出血等問題，使得牙周炎患者多伴有明顯的心理壓力，可表現為人際關系敏感、失眠、焦慮、抑郁、甚至敵對等情緒反應[2]。有學者通過臨床問卷調查，認為心理應激是牙周疾病的重要風險因素，與牙周炎的病變程度呈正相關[7-8]。一般認為，各種社會和心理因素以應激為中介可通過神經-內分泌-免疫系統之間的相互作用、相互影響，導致宿主免疫防御能力降低，增加機體對致病菌的易感性[9]；心理應激還可通過刺激交感-腎上腺髓質軸，引起血漿中腎上腺素和去甲腎上腺素濃度升高，參與調控機體對應激的急性反應；同時由心理應激介導的一系列的代謝和心血管代償機制(如調節心律和外周血管阻力、抑制胰島素分泌、刺激胰高血糖素的分泌等)，可導致外周微血管收縮，微循環血液流量減少，從而導致組織缺血[10-11]。同時，牙周致病菌多以厭氧菌為主，心理應激加重了局部的缺氧狀態，有利于厭氧菌的生長繁殖。有學者選取腎上腺素、去甲腎上腺素、多巴胺和皮質類固醇等應激相關標志物，觀察體外環境下應激相關標志物對牙周致病菌的影響。結果表明，應激相關標志物可以促進牙周致病菌的生長，對牙周疾病可能有一定的影響[12]。低氧誘導因子1α(hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α)是細胞低氧適應與應答調節的關鍵因子，在缺氧誘導下表達增強。乳酸脫氫酶1(lactic dehydrogenase 1, LDH1)主要分布在有氧代謝為主的器官。組織缺氧時，LDH1表達減少。HIF-1α在組織局部的表達情況以及血清LDH1水平可作為評價組織缺氧情況的指標。本實驗室前期研究顯示：牙周炎+應激組HIF-1α平均陽性細胞率在實驗各時點顯著高于牙周炎組[13]；血清LDH1水平在各時點均明顯低于正常對照組和牙周炎組[14]，認為心理應激可造成牙周組織氧代謝障礙，應激刺激可能通過降低牙周組織氧代謝水平加重大鼠牙周炎癥程度。本實驗通過選取Wistar大鼠建立牙周炎動物模型，并每天從限制性應激刺激或冷水浸泡應激刺激2種應急刺激方案中隨機選取1種來模擬復雜多變的社會心理應激刺激，同時防止了大鼠對應激源的適應。在實驗后第2、4、8周時，檢測應激標記物如血糖、ACTH、皮質類固醇、腎上腺素在實驗組均升高，表明大鼠內分泌系統對應激刺激發生反應，處于應激狀態。且牙周炎組、牙周炎+心理應激組和單純應激組各項檢測指標明顯高于正常對照組，其中牙周炎+心理應激組最高，差異顯著。大體觀察及組織學觀察發現牙周炎+心理應激組的炎癥水平和牙周支持組織破壞程度明顯高于牙周炎組，而單純的心理應激組并無明顯的牙周組織破壞。實驗結果表明：單純的心理應激不會引起大鼠的牙周組織破壞，但心理應激可以加重伴有牙周炎癥大鼠的牙周組織破壞程度。Peruzzo等[15]在家兔口內通過結扎誘導的方法建立牙周炎模型，發現慢性心理應激刺激明顯加重了牙槽骨吸收，本實驗結果與Peruzzo等[15]的結果一致。

HBO治療牙周炎是近年來牙周疾病治療的一種新方法，既可單獨應用于牙周疾病的治療，也可與齦上潔治術、齦下刮治術、翻瓣術等其它牙周治療手段聯合使用，均有一定的治療效果。研究發現，HBO+齦上潔治/齦下刮治的治療效果最佳，認為HBO療法結合牙周基礎治療手段對牙周炎有協同治療作用[16-17]。本研究自實驗后第9周起對治療組大鼠進行HBO治療，連續治療2周。HBO治療結束后牙周炎+應激組血糖明顯降低，單純應激組和牙周炎+應激組血清ACTH水平與非治療組相比顯著下降；大體觀察見牙齦無明顯水腫，探診見牙周袋變淺；組織學觀察牙周組織炎癥破壞減輕，炎癥細胞減少，與多數學者的研究結果一致。研究結果表明，HBO療法對心理應激相關牙周炎具有明顯療效。

綜上所述，本實驗通過建立大鼠牙周炎模型，并給予心理應激刺激，結果顯示心理應激能加重牙周炎的破壞程度，是牙周炎的重要危險因素。HBO療法能顯著改善牙周病的炎癥程度，其確切的機理仍有待進一步的研究。

[參考文獻]

[1]Rosania AE, Low KG, McCormick CM, et al. Stress, depression, cortisol, and periodontal disease[J]. J Perio-dontol, 2009, 80(2):260-266.

[2]Merchant AT, Pitiphat W, Ahmed B, et al. A prospective study of social support, anger expression and risk of perioddontits in men[J]. J Am Dental Assoc, 2003, 134(12):1591-1596.

[3]Signoretto C, Bianchi F, Burlacchini G, et al. Microbiological evaluation of the effects of hyperbaric oxygen on periodontal disease[J]. New Microbiol, 2007, 30(4):431-437.

[4]張增方, 呂芳麗, 黃世光, 等. 心理應激對大鼠實驗性牙周炎及牙周組織中低氧誘導因子1α表達的影響[J]. 中國病理生理雜志, 2011, 27(2):315-319.

[5]裴喜燕, 歐陽翔英, 和璐. 關于牙周炎定義標準[J]. 牙體牙髓牙周病學雜志, 2015, 25(1):45-51.

[6]楊廷忠, 黃漢騰. 社會轉型中城市居民心理壓力的流行病學研究[J]. 中華流行病學雜志, 2003, 24(9):760-764.

[8]Mannem S, Chava VK. The effect of stress on periodontitis: a clinicobiochemical study[J]. J Indian Soc Perio-dontol, 2012, 16(3):365-369.

[9]Kemeny ME, Schedlowski M. Understanding the interaction between psychosocial stress and immune-related diseases: a stepwise progression[J]. Brain Behav Immun, 2007, 21(8):1009-1018.

[10]Henderson B. Integrating the cell stress response: a new view of molecular chaperones as immunological and physiological homeostatic regulators[J]. Cell Biochem Funct, 2010, 28(1):1-14.

[11]Goyal S, Jajoo S, Nagappa G, et al. Estimation of relationship between psychosocial stress and periodontal status using serum cortisol level: a clinico-biochemical study[J]. Indian J Dent Res, 2011, 22(1):6-9.

[12]Jentsch HF, M?rz D, Krüger M. The effects of stress hormones on growth of selected periodontitis related bacteria[J]. Anaerobe, 2013, 24:49-54.

[13]Huang S, Lu F, Zhang Z, et al. The role of psychologic stress-induced hypoxia-inducible factor-1α in rat experimental periodontitis[J]. J Periodontol, 2011, 82(6):934-941.

[14]黃世光, 王曉歌, 潘倩茹, 等. 慢性心理應激對大鼠實驗性牙周炎及血清乳酸脫氫酶1的影響[J]. 中國病理生理雜志, 2012, 28(5):924-928.

[15]Peruzzo DC, Benatti BB, Antunes IB, et al. Chronic stress may modulate periodontal disease: a study in rats[J]. J Periodontol, 2008, 79(4):697-704.

[16]Chen TL, Xu B, Liu JC, et al. Effects of hyperbaric oxygen on aggressive periodontitis and subgingival anaerobes in Chinese patients[J]. J Indian Soc Periodontol, 2012, 16(4):492-497.

[17]Nogueira-Filho GR, Rosa BT, David-Neto JR. Effects of hyperbaric oxygen therapy on the treatment of severe cases of periodontitis[J]. Undersea Hyperb Med, 2010, 37(2):107-114.

(責任編輯：林白霜， 羅森)

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