投喂激素催產光唇魚試驗

林衍峰+嚴云志

摘要：針對目前光唇魚人工繁殖操作繁瑣、親魚死亡率高、繁殖率較低的問題，研制了一種激素口服顆粒。將LHRH-A2、HCG和DOM溶解于生理鹽水中，吸附于浮性顆粒餌料內，表面涂覆一層添加維生素E的鴨油制成催熟劑和催產劑。用投喂的方式對光唇魚進行催熟和催產，平均每尾雌魚產卵677粒、出苗372尾，平均受精率71.19%、孵化率77.25%。光唇魚口服催熟劑最佳劑量為（LHRH-A2）7.5 μg/kg體重·次，口服催產劑最佳劑量為（LHRH-A2）45 μg+（HCG）1 500 IU+（DOM）18 mg/kg體重。

關鍵詞：光唇魚;人工繁殖;催熟劑;催產劑;口服劑

中圖分類號：S961.2 文獻標識碼：B

在魚類人工繁殖中普遍使用注射激素法，此外還有浸泡法[1]、口服法[2]、埋植法[3]等。有研究證明，促性腺激素釋放激素（GnRH）及其類似物口服后經魚類的消化道吸收進入血液循環，從而刺激腦垂體促性腺激素（GtH）細胞的分泌活動[4]，適用于一些難以注射操作、極易產生應激死亡的小型魚類的人工繁殖。光唇魚（Acrossocheilus fasciatus）個體小，平均懷卵量3 736粒/尾，體重相對懷卵量85粒/g[5]，種群內個體性成熟不同步[6]，體質嬌嫩、應激反應強烈，大規模人工繁殖較為困難。頡志剛采用注射催產、人工授精，催產率達到80%以上[7]。巫一安等用注射催產，自然產卵率超65%，產后親魚死亡率50%左右[8]。張玉明等在餌料中添加維生素E促進性腺發育，用微流水刺激誘導親魚在6 d中分批產卵，每尾雌魚平均產卵341粒、出苗203尾[9]。針對目前人工繁殖操作繁瑣、親魚死亡率高、繁殖率較低的問題，本試驗采用投喂激素法進行催產，以期找到一種安全高效的光唇魚人工繁殖方法。

1材料與方法

1.1親魚來源與培育

試驗用光唇魚為2～3冬齡性成熟個體，體重45～55 g，于2015年1月采自休寧縣率水河，在黃山市恒坤自然觀光農業有限公司流水魚池中馴養。混凝土制流水魚池長6.5 m、寬3.9 m、深12 m，池內水深0.4～0.6 m，流速0.01～0.2 m/s。水源從迴嶺河引入，水質清澈，水溫3～23 ℃，溶氧量8 mg/L以上，pH值6.73～7.12，鹽度小于0.01‰，可溶解固體總量小于9.7。2015年3月水溫達到10 ℃時開始馴食，投喂蛋白含量40%的浮性顆粒餌料，每天6：00、18：00各投喂1次，根據攝食情況調整投喂量，每次控制在20 min內吃完。

1.2雌雄比例和養殖密度

雌性體側有6條黑色橫斑，雄性沿體側有1條黑色縱條、胸部有玫瑰紅色的渲染[9]。試驗分為5組，每組2個試驗重復，另設2個對照組，共12個魚池。每池放養100尾親魚，密度約4尾/m2，雌雄比例1∶1。

1.3口服劑型制備

將激素溶解于生理鹽水中，均勻噴灑在蛋白含量40%的浮性顆粒餌料上，晾干后表面涂覆一層添加維生素E的鴨油制成口服催產劑，置于2～4 ℃冷藏箱中避光保存。其中鴨油用量為餌料重量5%，維生素E添加量為鴨油重量0.1%。

1.4激素組合及用量設計

激素采用寧波激素二廠生產的促黃體素釋放激素A2（LHRH-A2）、絨促激素（HCG）和多潘立酮（DOM）。根據預先用注射法所做敏感性試驗得知催熟劑劑量為（LHRH-A2）2.5 μg/kg體重、催產劑劑量為（LHRH-A2）15 μg+（HCG）500 IU+（DOM）6 mg/kg體重，根據注射法激素濃度擴大設置5個倍數濃度梯度和1個空白對照組，各組激素含量見表1。表1各組激素含量表

劑型分組每100g餌料中催產藥物含量ⅠⅡⅢⅣⅤ對照組催熟劑催產劑LHRH-A2/μg255075100125/LHRH-A2/μg150300450600750/HCG/IU5 00010 00015 00020 00025 000/DOM/mg60120180240300/1.5投喂激素催熟

水溫穩定達到18 ℃以上1周后，從2015年5月10日開始投喂催熟劑，每隔7 d于18點投喂1次，投喂量為魚群體重1%。在長0.6 m、寬0.5 m、深0.15 m的塑料框內，內襯40目紗絹制成的網箱，底部鋪設一層直徑10～15 mm礫石作為光唇魚的產卵巢，水溫達到20 ℃以上時在池中進水口處放置4個產卵巢。

1.6投喂激素催產

經4～6周的催熟培育，雌魚腹部膨大柔軟，雄魚體側的縱行黑紋異常醒目、黑紋上下現耀眼金黃色過渡帶、胸部呈鮮艷紅色、口角布滿凸起的白色珠星，當雄魚在產卵巢附近追逐雌魚，表明親魚性腺已發育成熟。先停食1 d，次日6點投喂催產劑，投喂量為魚群體重1%。

1.7受精卵收集孵化

水溫20～23 ℃時，投喂催產劑后14～20 h開始產卵，至次日凌晨產卵結束。產卵時需經常收集受精卵，防止雄魚吞食。用孔徑5 mm塑料篩將受精卵和礫石分離，受精卵放在孵化箱中置于孵化池中孵化。孵化箱邊長0.5 m、深0.1 m，用60目紗絹制成，固定在木制框架內，每箱裝受精卵1萬粒。孵化池用混凝土制成，長5 m、寬3 m、深1 m，水深0.3～0.4 m，上方架設遮陽棚避免陽光直射。孵化用水經沉淀后用80目篩絹過濾，防止泥漿和生物敵害進入。孵化池內流速002～0.05 m/s，溶氧保持在6 mg/L以上。水溫20～23 ℃條件下，經70～95 h孵化出苗，孵化7～8日后進入平游期、開始攝食餌料。

2試驗結果

試驗結果見表2，5個試驗組均成功產卵，對照組僅有零星產卵未做統計。試驗組產卵總量33.84萬粒，獲得受精卵24.09萬粒，孵化出苗18.61萬尾，平均受精率71.19%，平均孵化率為77.25%，平均每尾雌魚產卵677粒，平均每尾雌魚繁殖幼魚372尾。表2產卵孵化情況表

組別ⅠⅡⅢⅣⅤ對照組池號123456789101112產卵日期6月26-30日6月24-25日6月23日6月16日6月9日7月12-20日產卵/萬粒1.852.012.171.964.013.534.243.696.254.13受精/萬粒1.481.411.591.643.323.253.233.422.232.52出苗/萬尾1.011.091.351.212.943.032.412.721.291.56受精率/%80.0070.1573.2783.6782.7992.0776.1892.6835.6861.02孵化率/%68.2477.3084.9173.7888.5593.2374.6179.5357.8561.90產卵/粒·尾-13704024343928027068487381250826出苗/尾·尾-1202218270242588606482544258312零星產卵

未做統計3討論

3.1口服催產劑的制備工藝

與注射法相比，投喂法需要解決激素能被光唇魚攝食并避免在水體中溶解損失的問題。隨著餌料加工和藥物制劑工藝的發展，出現了不溶于水的微囊[10]和避免被胃液分解的腸溶微囊[11]，用微囊或腸溶微囊制成的激素制劑損失小、吸收率高，但制備工藝復雜、成本較高，一般養殖場不具備加工條件。光唇魚沒有胃，激素不會被胃液分解失效，只需解決激素在池水中溶解損失和如何被親魚主動攝食的問題。本試驗用光唇魚習慣攝食的浮性膨化顆粒餌料作激素載體，表面涂覆油脂防止激素在水中溶解損失，添加VE防止脂肪氧化變質，具有工藝簡單、成本低廉、給藥方便、繁殖率高的優點，普通養殖場均能使用，可滿足光唇魚規?；斯し敝车男枨蟆?/p>

3.2光唇魚口服激素的劑量

本試驗用投喂激素法進行光唇魚人工繁殖，獲得了比注射激素法更好的繁殖效果，證明催產激素可以經光唇魚消化道吸收進入血液而保持生物活性。因為催產激素通過魚類消化道吸收會有部分損失，所以口服法需要較高的劑量才能達到較好的催熟催產效果[4]。

本試驗結果表明，隨著劑量增加，光唇魚性成熟日期提前、產卵量增加、產卵耗時減少，當劑量超過注射法3倍以上時，受精率、孵化率和出苗量開始下降。如圖1所示，第Ⅲ組出苗量最高，此時劑量為注射法3倍，即催熟劑量為（LHRH-A2）7.5 μg/kg體重·次，催產劑量為（LHRH-A2）45 μg+（HCG）1 500 IU+（DOM）18 mg/kg體重。

魚類注射催產激素時，一般雄魚劑量減半，但口服法則難以做到。本試驗在雌雄親魚劑量基本一致的情況下取得較好繁殖效果，其機理有待進一步研究。

圖1各組繁殖情況

參考文獻：

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Test on feeding hormones to induce spawning of Acrossocheilus fasciatus

LIN Yanfeng1，YAN Yunzhi2

（1.Fishery office of Xiuning county， Xiuning Anhui 245400;

2. College of Life Sciences， Anhui Normal University， Wuhu Anhui 241000）

Abstract：An oral tablets contained hormone was designed for inducing the egg release of Acrossocheilus fasciatus to overcome some shortages in the current methods used in the culturing of this species， such as complex operation， high mortality of parent fish and low reproductive rate. After LHRH-A2， HCG and DOM were dissolved in saline and absorbed by floating pellets， a layer of vitamin E made from duck oil was coated beyond them. This oral tablet was used to accelerate the ripening and induce the spawning of Acrossocheilus fasciatus by feeding it on these agents. Per female fish averagely spawned 677 eggs and the hatched ones reached 372 of larvae， with the fertilization rate averagely reaching 71.19% and the hatching rate 77.25%. The optimal oral dose of ripening dose for Acrossocheilus fasciatus is 7.5 μg/kg （LHRH-A2） per time and the optimal oral dose of oxytocic agent is 45 μg/kg （LHRH-A2）+1 500 IU/kg （HCG）+18 mg/kg （DOM）.

Key words：Acrossocheilus fasciatus; Artificial Propagation; Ripening agent; Oxytocin; Oral agents

（收稿日期：2015-09-25）