化痰祛濁通絡方對自發性高血壓大鼠血壓一氧化氮、內皮素1及血管緊張素Ⅱ的影響 ※

化痰祛濁通絡方對自發性高血壓大鼠血壓一氧化氮、內皮素1及血管緊張素Ⅱ的影響※

李強

(河北省懷安縣中醫院中醫科，河北懷安076150)

【摘要】目的觀察化痰祛濁通絡方對自發性高血壓大鼠(SHR)血壓及一氧化氮(NO)、內皮素1(ET-1)及血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)的影響，探討其降壓作用機制。方法將15月齡SHR隨機分為空白對照組、化痰祛濁通絡方組和吲達帕胺組，每組各9只。空白對照組予0.9%氯化鈉注射液(10 mL/kg)、化痰祛濁通絡方組予化痰祛濁通絡方水煎液(生藥10 mL/kg)、吲達帕胺組予吲達帕胺溶液(10 mg/kg)，均每日1次灌服，連續6周。所有大鼠每周測量尾動脈壓，給藥6周腹主動脈抽血測定血清NO、ET-1及AngⅡ含量。結果給藥6周后，化痰祛濁通絡方組和吲達帕胺組給藥后均可降低SHR收縮壓(SP)和舒張壓(DP)，與空白對照組及本組給藥前比較差異均有統計學意義(P<0.05)；化痰祛濁通絡方組及吲達帕胺組ET-1和Ang Ⅱ含量均較本組給藥前及空白對照組明顯降低，NO含量明顯升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。結論化痰祛濁通絡方能明顯降低SHR血壓，其機制可能是通過下調ET、Ang Ⅱ含量及上調NO含量來發揮降壓作用。

【關鍵詞】大鼠，近交SHR；高血壓；化痰；通絡；內皮縮血管肽1；一氧化氮；血管緊張素II

doi：10.3969/j.issn.1002-2619.2015.08.021

【中圖分類號】R-332；R544.105.31；R341.6；R392.11；R977.6

【文獻標識碼】A

【文章編號】1002-2619(2015)08-1179-04

作者簡介：李強(1967—)，男，副主任醫師，學士。從事中醫內科臨床工作。

Abstract【】ObjectiveTo observe the effects of Huatan-quzhuo-quzhuo decoction on blood pressure, nitric oxide (NO), endothelin-1 (ET-1) and angiotensin-Ⅱ(AngⅡ) in spontaneously hypertensive rats (SHR), and to investigate the antihypertensive mechanism.Methods 15-months-old rats were randomly divided into blank control group,Huatan-quzhuo-tongluo decoction group and indapamide group, 9 rats in each group.Rats in blank control group received 0.9% sodium chloride (10 mg/kg).Rats in Huatan-quzhuo-tongluo decoction group received Huatan-quzhuo-quzhuo decoction (10 mg/kg).Rats in indapamide group received indapamide solution (10 mg/kg), and all mice received successive perfusion once daily for 6 weeks.The arterial pressure was measured in all mice weekly, and the contents of serum NO, ET-1 and AngⅡ were detected by abdominal aorta blood-collecting 6 weeks after successive perfusion .ResultsThe systolic pressure (SP) and diastolic pressure (DP) were decreased six weeks after successive perfusion in Huatan-quzhuo-tongluo decoction and indapamide groups, and the decreased in two groups was significantly different from that in blank control group (P<0.05).The contents of ET-1 and Ang-Ⅱafter perfusion were obviously decreased in Huatan-quzhuo-tongluo decoction and indapamide groups, and the content of NO was obviously increased, the differences were statistically significant (P<0.05).The contents of ET-1 and Ang-Ⅱafter perfusion were obviously decreased in Huatan-quzhuo-tongluo decoction and indapamide groups as compared with those in blank control group, and the content of NO was obviously increased, the differences were statistically significant (P<0.05).ConclusionHuatan-quzhuo-tongluo decoction can significantly reduce the blood pressure in SHR rats, and the possible mechanism is to decrease serum levels of ET,AngⅡ and increase NO levels.

收稿日期：(2014-08-08)

※ 項目來源：張家口市科學技術和地震局科學技術與發展指導計劃項目(編號：1101122D)

Investigation of Huatan-quzhuo-tongluo decoction on blood pressure, NO, ET-1 and AngⅡ in spontaneously hypertensive ratsLIQiang.DepartmentofTraditionalChineseMedicine,Huai'anCountyHospitalofTraditionalChineseMedicineinHebeiProvince,Hebei,Huai'an076150

【Key words】Rats, inbreeding SHR; Hypertension; Dissipate phlegm, dredging collaterals; Endothelin 1; nitric oxide; Angiotensin-II

原發性高血壓是危害人類健康的常見疾病。臨床研究發現，高血壓與血清中一氧化氮(NO)、內皮素(ET)和血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)含量有關[1]。已知血管內皮細胞功能紊亂是高血壓發生的起始環節[2]，而NO是血管內皮釋放的主要舒張血管物質，所以其含量可反映血管內皮細胞的功能，同時NO還可以通過阻斷AngⅡ對腎近曲小管鈉的吸收，抑制腎小球旁細胞分泌，降低血壓[3]。動物實驗研究發現，自發性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rats，SHR)被公認為是最接近人原發性高血壓的動物模型[4]，通過研究15月齡SHR高血壓的相關指標，可以指導臨床用藥。化痰祛濁通絡方是河北省懷安縣中醫院多年來治療原發性高血壓的協定處方，降壓效果可靠，能夠解決高血壓發病的基本因素痰、濁、瘀導致的經絡阻塞。本實驗研究通過觀察化痰祛濁通絡方對 SHR的降壓效果及對血清NO、ET、Ang Ⅱ含量的影響，探討其降壓作用機制。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1實驗動物雄性SHR 27只，15月齡，體質量(305±52) g，由河北省實驗動物中心提供，動物合格證號DK0411-0118。動物飼料亦由河北省實驗動物中心提供。飼養室保持空氣新鮮，相對濕度40%～70%，溫度21～27 ℃，自由進食，每周換水2～3次，每日飲水量4～7 mL。

1.1.2實驗藥物化痰祛濁通絡方藥物組成：桂枝10 g，茯苓12 g，薏苡仁15 g，炮穿山甲6 g，姜半夏10 g，皂角刺6 g，三七6 g，黃連3 g。由河北省懷安縣中醫院制劑室煎煮、過濾、濃縮成水煎液(1 mL相當于生藥1 g)，分裝、滅菌，4 ℃貯存備用。吲達帕胺片(天津飛鷹制藥股份有限公司，國藥準字H20080818，規格25 mg/片)，苯巴比妥鈉注射液(廣東邦民制藥廠有限公司，國藥準字H44021888，規格1 mL∶100 mg/支)。

1.1.3實驗試劑ET-1 試劑盒、AngⅡ、NO 試劑盒，由北京北方生物技術研究所生產，批號分別為 20110928、20111023、20110916。

1.1.4實驗儀器BP-6無創尾動脈血壓測量分析系統(成都泰P科技有限公司)，722S型可見分光光度計(上海精密科學儀器有限公司)，SN-682γ型閃爍計數器(上海核福光電儀器有限公司)。

1.2實驗方法

1.2.1動物分組及給藥將27只雄性SHR隨機分為3組，即空白對照組、化痰祛濁通絡方組及吲達帕胺組，每組各9只，其中空白對照組予0.9%氯化鈉注射液10 mL/kg，每日1次灌服，連續6周；化痰祛濁通絡方組予化痰祛濁通絡方水煎液生藥10 mL/kg，每日1次灌服，連續6周；吲達帕胺組予吲達帕胺溶液10 mg/kg(1 mL相當于生藥1 mg)，每日1次灌服，連續6周。

1.2.2標本采集及檢測指標所有SHR每周9：00用BP-6無創尾動脈血壓測量分析系統測量清醒狀態下大鼠尾動脈收縮壓(SP)和舒張壓(DP)，給藥前后測定并進行比較。給藥前和給藥6周后苯巴比妥鈉注射液腹腔內注射麻醉，迅速從腹主動脈采血3 mL，用分光光度法檢測血清NO，放射免疫法測定ET-1和Ang Ⅱ，操作均按照試劑盒說明書進行。

1.3統計學方法采用SPSS 17.0統計軟件進行統計學分析，計量資料以均數±標準差(±s)表示，采用t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.13組SHR給藥前后血壓變化比較見表1。

表1　3組SHR給藥前后血壓變化比較　kPa， ± s

表1　3組SHR給藥前后血壓變化比較　kPa， ± s

組 別n給藥前SPDP給藥后SPDP化痰祛濁通絡方組919.63±0.4214.72±0.4014.17±0.42*△#10.69±0.43*△#吲達帕胺組919.44±0.4814.63±0.4315.70±0.43*△11.89±0.41*△空白對照組919.49±0.4814.68±0.4319.41±0.4614.72±0.48

與本組給藥前比較，*P<0.05；與空白對照組給藥后比較，△P<0.05；與吲達帕胺組給藥后比較，#P<0.05

由表1可見，化痰祛濁通絡方組和吲達帕胺組給藥后大鼠SP和DP均降低，與給藥前比較差異有統計學意義(P<0.05)，空白對照組給藥前后比較差異無統計學意義(P<0.05)；化痰祛濁通絡方組、吲達帕胺組給藥后SP及DP與空白對照組給藥后比較差異有統計學意義(P<0.05)；化痰祛濁通絡方組與吲達帕胺組給藥后SP及DP比較差異有統計學意義(P<0.05)，化痰祛濁通絡方組降壓效果顯著。

2.23組SHR血清NO、ET-1及AngⅡ含量變化比較見表2。

表2　3組SHR血清NO、ET-1及AngⅡ含量變化比較　 ± s

表2　3組SHR血清NO、ET-1及AngⅡ含量變化比較　 ± s

組 別化痰祛濁通絡方組(n=9)給藥前給藥后吲達帕胺組(n=9)給藥前給藥后空白對照組(n=9)給藥前給藥后NO(μmol/L)32.11±16.2598.50±18.17*△39.55±19.6779.53±17.70*△32.01±8.9333.12±9.13ET-1(pg/mL)90.09±18.4834.90±9.01*△87.61±14.5853.22±11.01*△84.47±8.0985.55±7.99AngⅡ(pg/mL)904.55±26.06434.41±22.98*△891.37±21.09526.33±31.02*△793.17±42.96788.11±44.25

與本組給藥前比較，*P<0.05；與空白對照組給藥后比較，△P<0.05

由表2可見，3組給藥前各指標比較差異無統計學意義(P>0.05)；給藥6周后，化痰祛濁通絡方組及吲達帕胺組ET-1和AngⅡ含量均較本組給藥前明顯降低，NO含量明顯升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。給藥后化痰祛濁通絡方組、吲達帕胺組ET-1和AngⅡ含量與空白對照組比較均明顯降低，NO含量明顯升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。給藥后化痰祛濁通絡方組與吲達帕胺組NO、ET-1、AngⅡ含量變化比較差異無統計學意義(P>0.05)。

3討論

原發性高血壓是以血壓升高為主要臨床表現，伴或不伴有多種心血管危險因素的綜合征，通常簡稱為高血壓，是多種心、腦血管疾病的重要病因和危險因素，影響重要臟器結構和功能，最終導致這些器官功能衰竭，迄今為止仍是心血管疾病死亡的主要原因之一。中醫理論認為，長期嗜食膏粱厚味，必致臟腑功能受損，尤易損及脾胃，脾失健運則升清降濁無權，留滯為痰，痰濕內阻，血行不暢，則瘀血內生，進而痰瘀互結，屬中醫學頭痛、眩暈等病證范疇[5]。近年來，對于原發性高血壓病證結合的研究多集中于陰虛陽亢證[6]。隨著我國經濟水平的發展，人們生活環境、工作環境、生活方式和飲食習慣等的改變，臨床實踐中偏于痰瘀阻滯證更為普遍，特別是形體肥胖的高血壓患者，過食肥甘厚味、氣血壅滯易產生痰濁、瘀血，痰濁與瘀血互結，阻滯血脈，使血液運行不暢，致眩暈、頭痛、高血壓等發生。將“痰濕”和“瘀血”作為原發性高血壓發病的主要病理因素，針對病因應用“化痰祛濁通絡”法治療，可闡明其作用機制，明確其療效和適應證，為臨床應用提供理論依據[7]，為傳統中藥發揮更大的社會和經濟效益奠定基礎。應用化痰祛濁通絡法治療原發性高血壓，通過多部位、多靶點作用，不僅降低血壓，而且能消除肥胖，降低血脂、血糖、改善血流，這是治療原發性高血壓的發展趨勢[7]。

中醫學認為，原發性高血壓的發生與肝、腎、脾功能虛弱有關，肝陰不足，虛火灼絡，脈絡損傷，易致經絡濁氣稽留，痰濕不能正常疏泄；腎氣不足，則脾、肺氣機升降失調，久之脾失健運，津聚成痰，痰濕內阻，氣血運行不暢，痰瘀內阻脈道；脾胃為后天之本，脾氣虛弱，全身氣血津液必然受到影響，痰、濕、濁、瘀等阻滯脈絡，更加重脾運輸功能失調，形成惡性循環。如此，逐漸發生西醫所指血脂聚集、水鈉潴留、膽固醇升高等，形成高血壓病理改變[8]。因此，原發性高血壓的本質就是濁氣、痰濕、瘀血阻滯脈絡，治宜化痰，祛濁，通絡[8]。化痰祛濁通絡方由桂枝、茯苓、薏苡仁、炮穿山甲、姜半夏、皂角刺、三七、黃連等組成。痰濕發生在氣分和衛分交搏之中，瘀血發生在營分和血分代謝阻滯之時。患者肺內有形之痰為氣體交換的產物，原發性高血壓患者經絡之痰是體內代謝的垃圾。祛痰為有形之肺痰，姜半夏祛痰則為機體經絡內生成的垃圾之痰[8]；祛肺之痰需要宗氣交換順利，祛經絡垃圾之痰必須營分血分內氣足、血暢。萬病濕為先，先有濕聚，才繼之有氣滯、血瘀、痰凝、熱毒逐漸加重疾病發生、發展，所以治療原發性高血壓之痰，需要首先以茯苓、薏苡仁等祛濕之藥為先導，因為濕聚為先，氣滯隨后導致痰濕積聚，此時治療相對容易，在茯苓、薏苡仁的基礎上，加用桂枝溫經理氣取效[9]；當病情發展到高血壓癥狀、體征很明確時，已經是濕聚、氣滯基礎上發生了血瘀，三者形成的垃圾之痰需要在薏苡仁、桂枝、茯苓基礎上加用祛痰之姜半夏；當病情繼續發展形成頑固性高血壓之表現，則為濕聚、氣滯、血瘀基礎上發生了痰凝，此時必須在祛痰之姜半夏之上再加用炮穿山甲破瘀散結；而病情繼續發展導致各種并發癥時，這時即在濕聚、氣滯、血瘀、痰凝的基礎上，熱毒將其堆積的垃圾灼煉成阻塞經絡之動脈粥樣硬化，此時治療更加困難，在祛痰之姜半夏、破瘀散結之炮穿山甲之上，加能透堅托邪之皂角刺、三七、黃連[10]；由于濕聚、氣滯、血瘀、痰凝、熱毒互為消長，產生新的垃圾，需要不斷給予化痰祛濁通絡治療，鞏固療效[11]。經過多年臨床實踐，化痰祛濁通絡方治療原發性高血壓效果良好，特別是對肥胖型高血壓患者效果更好[12]。本動物實驗研究證明，化痰祛濁通絡方可降低SHR的SP和DP，與給藥前比較差異有統計學意義(P<0.05)，且降壓效果優于吲達帕胺(P<0.05)。

現代醫學研究證明，血管內皮功能失調會引發血管痙攣，血管內皮細胞釋放的正常代謝物質減少，其中NO是內皮細胞釋放的舒張血管物質，其含量減少則會導致血壓升高，而血管內皮功能下降，同樣會使Ang Ⅱ分泌量增加，發生水鈉潴留，形成高血壓病理改變[13]。本實驗研究結果表明，給藥6周后，化痰祛濁通絡方組、吲達帕胺組ET-1和Ang Ⅱ含量與空白對照組比較均明顯降低，NO含量明顯升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。化痰祛濁通絡方組與吲達帕胺組血漿NO、ET-1、Ang Ⅱ含量變化比較差異無統計學意義(P>0.05)。由此認為，化痰祛濁通絡方降低血壓的機制可能是通過下調ET及Ang Ⅱ含量和上調NO含量來發揮降壓作用，其具體作用機制需要進一步探討。

參考文獻

[1]呂文波，梁展凡.原發性高血壓的現代醫學診斷方法概況[J].遼寧中醫雜志，2010，6(1)：37-38.

[2]陳明，胡申江.高血壓病血管內皮功能障礙及治療[J].心血管病學進展，2005，26(3)：222-226.

[3]譚珍媛，羅遠，羅艷，等.壯藥降壓方對自發性高血壓大鼠降壓作用研究[J].中國實驗方劑學雜志，2013，19(5)：262-263.

[4]陳琦，陳素紅，呂圭源，等.芍藥提取物對老年自發性高血壓大鼠血壓、血脂以及肝功能的影響[J].浙江中醫藥大學學報，2013，37(2)：187-192.

[5]李陽，王瑩，郭琳.高血壓病辨證分型與現代醫學的關系[J].現代中西醫結合雜志，2012，21(23)：2615-2618.

[6]錢岳晟，張偉忠，周懷發，等.原發性高血壓患者表型與中醫體質分類關系的研究[J].中國中醫基礎醫學雜志，2002，8(2)：49-51.

[7]李成.高血壓病從痰辨析[J].山東中醫藥大學學報，2013，37(3)：192-193.

[8]張小慶.化濕祛痰法治療高血壓病痰濕壅盛型療效觀察[J].浙江中西醫結合雜志，2013，23(1)：20-21.

[9]魏東，高侃，方倩，等.健脾平肝湯對原發性高血壓患者血液流變學及血脂的影響[J].河北中醫，2013，35(7)：968-970.

[10]原春青，吳永輝，史哲，等.高血壓治療新進展[J].航空航天醫學雜志，2012，23(7)：883-884.

[11]王會弟，甄圣龍，游向東.原發性高血壓患者動態動脈硬化指數與頸動脈內-中膜厚度的相關性研究[J].河北中醫，2014，36(11)：1757-1758.

[12]王秀玲，楊寶元.原發性高血壓中醫證型研究近況[J].河北中醫，2014，36(6)：952-953.

[13]趙鳳林，盧先彬，李艷景.中西藥合用治療高血壓病臨床觀察[J].實用中醫藥雜志，2010，26(7)：488-489.

(本文編輯：曹志娟)

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河南中醫藥博物館開館

日前，位于河南中醫學院內的河南中醫藥博物館正式開館。主展區位于圖書館內，由醫史館、校史館、中藥館、仲景館、古籍館和醫德館等展館組成。博物館醫史館主要展示中原中醫藥的歷史貢獻。仲景館主要通過圖文、實物和聲光電等多媒體，展示醫圣張仲景為世界醫學發展、為中醫藥事業的發展做出的杰出貢獻。在中藥館中，觀眾可以觀賞到上千種水浸標本、蠟葉植物標本、中藥材標本、動物礦物標本。校史館用詳實材料展現了河南中醫學院1958年建校以來的發展歷程。