兩種微柱凝膠卡和試管法在臨床血型鑒定中的應用評價

常靜秋

兩種微柱凝膠卡和試管法在臨床血型鑒定中的應用評價

常靜秋

【摘要】目的探討兩種微柱凝膠卡和試管法在臨床血型鑒定中的應用。方法 選取500份患者標本，同時采用進口、國產微柱凝膠檢測卡以及傳統的試管法進行血型鑒定，然后對凝集強度進行比較分析。結果 卡式法比試管法的操作更加標準化，靈敏度、特異性、客觀性等方面具有更顯著的優勢；進口和國產微柱凝膠卡的血型鑒定結果差異無統計學意義（P＞0.05）。結論 卡式法鑒定血型操作簡便，結果清晰準確，進口和國產微柱凝膠卡的鑒定結果相似，國產微柱凝膠檢測卡費用更低。

【關鍵詞】微柱凝膠卡；試管法；血型鑒定

作者單位： 225300 泰州市第三人民醫院

Evaluation of Two Kinds of Micro Column Gel and Tube Method in Clinical Blood Typing

CHANG Jingqiu, Third People's Hospital of Taizhou City, Taizhou 225300, China

[Abstract]Objective To evaluate the two micro gel cards and test tube method in clinical blood Identification. Methods 500 patients samples were selected for ABO blood group identification by imported, domestic micro column gel card and test tube method. Results Imported micro gel test more standardized than the operating tube method, the sensitivity, specificity, objectivity, and so has a more significant advantage; blood test results of imported micro gel cards and domestic micro-column gel card difference between the two methods no statistically significant(P>0.05). Conclusion Micro-column gel card identifying blood type operation simple, clear and accurate results, while similar identification results of domestic and imported micro gel cards, and less costly.

[Key words]Micro-gel card, Tube method, Blood test

隨著檢驗技術的發展，微柱凝膠血型鑒定卡在ABO血型鑒定中得到了廣泛的使用。相對于傳統的手工試管法，卡式法標本用量少，操作簡單，結果易于判讀[1]。在中國，長期以來使用進口微柱凝膠卡，成本較高。隨著國產微柱凝膠卡的市場投放，許多醫院開始使用國產微柱凝膠卡。現選取我院500份標本進行血型

鑒定，通過對比分析進口、國產微柱凝膠卡和試管法在鑒定血型中的效果，探討這些鑒定結果的一致性和存在的差異。現進行如下報道。

表1　進口與國產微柱凝膠卡對A、B以及RhD抗原凝集強度鑒定結果[n(%)]

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇本院2015年5～6月入院的需要進行常規血型鑒定的500例患者標本作為研究對象。

1.2儀器與試劑

國產微柱凝膠卡(長春博迅生物技術有限責任公司)及專用TD-3A血型血清學用離心機（長春博研科學儀器有限責任公司），進口瑞士達亞美公司DiaclonABO/D正反定型卡、ID-Diluent2（2號稀釋液）及專用離心機（ID-Centrifuge）。抗A、抗B、單克隆抗D、ABO反定型用紅細胞試劑為上海血液生物有限責任公司生產。

1.3標本來源

我院2015年5月～6月住院患者500名，抽取靜脈EDTA-K2抗凝血2 ml。1.4檢測方法

1.4.1進口微柱凝膠卡 將被測血標本采用低離子介質（2號稀釋液）配制成2%的紅細胞懸浮液，微柱凝膠卡正定型孔和ctl孔各加入20 μl。反定型孔加入1%反定型細胞50 μl，再加入患者血漿50 μl，放置于專用離心機離心觀察結果。

1.4.2國產微柱凝膠卡 將被測血標本用生理鹽水配制成0.8%的紅細胞懸浮液，微柱凝膠卡正定型孔和對照孔各加入50 μl。反定型孔加入1%反定型細胞50 μl，再加入患者血漿50 μl，放置于專用離心機離心觀察結果。

1.4.3試管法 按照《全國臨床檢驗操作規程》[2]第三版血型鑒定試管法操作規程進行。

1.5凝集度評定標準

參考文獻血型鑒定結果由人工判讀，凝集判斷標準見[3]。當正反定型結果一致才能認為是正確結果，否則為亞型、病理狀態、標本或血型卡不合格等情況。

1.6統計學方法

利用統計學處理軟件SPSS 17.0進行處理分析，采用χ2檢驗對數據資料進行對比分析，以P＜0.05為結果具有統計學意義。

2　結果

2.1微柱凝膠卡法與試管法鑒定結果比較

在檢測的500例患者標本中，RhD陰性4例，ABO血型有2例結果不一致。經查，其中1例是因為微柱凝膠卡在運輸過程中受到震蕩和倒置，使用前未進行離心恢復，撕去卡上的錫紙膜時產生了交叉污染，從而導致血型鑒定正反不一致。選擇正確儲存且離心后的檢測卡重新鑒定，結果正反定型與試管法一致。1例為纖維蛋白原異常增高致反定型凝集假陽性。經滴加生理鹽水，去除假凝集，重新檢測后，結果一致[4]。經分析對比及重新檢測，500例標本卡式法和試管法血型結果一致，微柱凝膠卡法比試管法具有更高的敏感性和特異性、結果易重復，并且更加安全快速。

2.2進口與國產微柱凝膠卡鑒定結果比較

進口與國產微柱凝膠卡的A抗原凝集強度、B抗原凝集強度以及RhD凝集強度結果差異無統計學意義（P＞0.05）。如表1所示。

3　討論

微柱凝膠卡法是一種廣泛應用于血型鑒定、交叉配合、間接抗人球蛋白實驗中的檢驗方法。其原理是通過在微柱中加入凝膠，紅細胞膜抗原與相應的抗體在凝膠介質中發生免疫反應，利用凝膠的分子篩作用，通過調節凝膠孔徑，只允許單個的紅細胞通過，而紅細胞的凝塊不能通過，利用重力的作用將凝集的紅細胞和游離的紅細胞分離[5]，從而區分有無凝集。由于凝膠間隙只讓未凝集的紅細胞通過，這就使得卡式檢測具有較高的靈敏性，對于一些由于紅細胞抗原減弱而導致血型鑒定困難的標本，卡式法的陽性度更強。另一方面，凝膠卡中加入了抗人球蛋白以促進紅細胞的特異性凝集，因此卡式法的特異性明顯高于試管法[6]。微柱凝膠技術屬于微試管柱凝集技術，這種方法具有準確率和靈敏度高、操作簡單、標本用量少、結果可長期保存、可標準化等優點。采用標準化定量工作，減少了操作人員的隨意性，且重復性好。由于采用了凝膠分子篩技術，使結果一目了然，避免了操作者的主觀影響[7]。

本研究結果表明，微柱凝膠卡法比試管法的陽性度更強，特異性更高，操作更加標準化，并且還可以長期保存。進口微柱凝膠卡法和國產微柱凝膠卡法的鑒定結果比較差異無統計學意義，但是進口微柱凝膠卡法的費用相對較高。綜上所述，微柱凝膠卡在血型鑒定中操作更簡單、靈敏度高、結果清晰直觀，可長期保存。國產微柱凝膠卡與進口微柱凝膠卡沒有顯著差異，費用相對更低，值得廣泛地被推廣于臨床應用。同時，微柱凝膠卡保存時要注意溫度和濕度，為了保證結果的準確性和穩定性，使用前應先將檢測卡離心，規范操作，加樣過程中避免交叉污染，以確保結果的準確性，從而充分發揮微柱凝膠卡的臨床價值。另外，某些疾病引起自身冷凝集、血漿中的纖維蛋白原增多、抗原減弱等會導致檢測中出現假陽性、假陰性，應結合臨床和血清學特點，查明原因，并進行相關試驗，聯合其他血型檢測方法，從而作出正確的血型鑒定[8]。

[1]袁曉華，胡惠萍. 國產微柱凝膠卡對血型鑒定的結果分析[J]. 國際檢驗醫學雜志，2013（12）：1585-1586.

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[3] 蘭炯采，負中橋，陳靜嫻. 輸血免疫血液學實驗技術[M]. 北京：人民衛生出版社，2011：77-79.

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[6] 董文，丁敏. 微柱凝膠卡式法用于血型鑒定與試管法之比較[J].醫學信息(上旬刊)，2011（6）：3351-3352.

[7] 彭道波，蘭炯采，王梁平，等. 用微柱凝膠試驗進行交叉配血[J].中國輸血雜志，2001，14（4）：232.

[8] 王小平. 微柱凝膠法應用與血型鑒定[J]. 廣州醫藥，2007，38（2）：60-62.

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.25.018

【文章編號】1674-9308（2015）25-0027-03

【文獻標識碼】B

【中圖分類號】R446