獻(xiàn)血者血液核酸檢測(cè)的關(guān)鍵及控制點(diǎn)思考

呂 萍，阿不都外力阿巴拜克力

（新疆喀什地區(qū)中心血站檢驗(yàn)科，新疆 喀什 844000）

獻(xiàn)血者血液核酸檢測(cè)的關(guān)鍵及控制點(diǎn)思考

呂 萍，阿不都外力阿巴拜克力

（新疆喀什地區(qū)中心血站檢驗(yàn)科，新疆 喀什 844000）

隨著我國(guó)無償獻(xiàn)血事業(yè)的迅速發(fā)展，群眾的思想覺悟越來越高，越來越多獻(xiàn)血者自愿獻(xiàn)血，這對(duì)臨床搶救和治療具有重大意義。獻(xiàn)血者血液核酸檢測(cè)對(duì)控制血液質(zhì)量起到關(guān)鍵的把關(guān)作用，測(cè)得值應(yīng)在試劑說明書規(guī)定范圍之內(nèi)。檢測(cè)的過程中，必須核對(duì)可疑標(biāo)本，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行復(fù)查，必要時(shí)進(jìn)行雙孔復(fù)查，檢測(cè)質(zhì)量控制是保證檢測(cè)質(zhì)量的關(guān)鍵所在。為了確保血站實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果能夠記錄完整并得到妥善的保留，提高血液標(biāo)本檢測(cè)過程中的規(guī)范性，衛(wèi)生部頒發(fā)了相關(guān)質(zhì)量管理制度，明確了質(zhì)量控制的主要范圍，明確了用血的規(guī)范，為了保證血液的質(zhì)量，必須對(duì)檢驗(yàn)過程的關(guān)鍵控制點(diǎn)進(jìn)行檢查，確保批號(hào)和有效期限的準(zhǔn)確性。為此本文重點(diǎn)探討獻(xiàn)血者血液核酸檢測(cè)的關(guān)鍵及控制。

血液核酸檢測(cè)；關(guān)鍵及控制點(diǎn)

開展血站核酸檢測(cè)是保證血液安全的重要舉措。按照《血站技術(shù)操作規(guī)程》的要求，對(duì)所有無償獻(xiàn)血者捐獻(xiàn)的血液都要經(jīng)過至少兩次或者兩次以上輸血傳播疾病指標(biāo)（抗原或抗體）的檢測(cè)，包括HIV（艾滋病病毒）、HBV（乙肝病毒）、HCV（丙肝）和梅毒，結(jié)果均為陰性，就可以在臨床給患者使用[1-2]。之前獻(xiàn)血中心血站一直采用免疫學(xué)方法檢測(cè)血液中的抗體[3]。雖然免疫學(xué)方法的靈敏度和特異性在不斷改進(jìn)和提高，但由于方法本身的局限性，“窗口期”獻(xiàn)血、病毒變異等因素仍然可能引起輸血后疾病的感染，而核酸檢測(cè)技術(shù)通過檢測(cè)抗原的方式，可大大降低輸血性感染的幾率，進(jìn)一步保障血液安全。現(xiàn)將檢測(cè)過程如下闡述。

1 檢測(cè)前的控制點(diǎn)

1.1 在獻(xiàn)血前，血站工作人員要對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行健康征詢、量血壓、稱體重等檢查，并對(duì)血型、血紅蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、乙型肝炎表面抗原、梅毒快檢等項(xiàng)目進(jìn)行血液快速篩查，經(jīng)綜合評(píng)估，合格者才能獻(xiàn)血。同時(shí)，對(duì)于獻(xiàn)血者來說，快速篩查和采血時(shí)使用的穿刺針、采血袋等所有器材都是從具有國(guó)家規(guī)定資質(zhì)并驗(yàn)收合格的生產(chǎn)廠家采購(gòu)的。每一位獻(xiàn)血者都使用一套新的采血器材，用后集中銷毀[4]。

1.2 采血管應(yīng)使用一次性無菌的真空采血管。分離膠是由疏水有機(jī)化合物和硅石粉組成的，結(jié)構(gòu)中含有大量氫鍵，其比重介于血漿和細(xì)胞成分之間，可形成隔離層。離心時(shí)，惰性分離膠能夠?qū)⒀褐械囊后w成分（血清或血漿）和固體成分（紅細(xì)胞，白細(xì)胞，血小板，纖維蛋白等）徹底分開并完全積聚在試管中央而形成屏障，標(biāo)本在48 h內(nèi)保持穩(wěn)定。當(dāng)失去離心力后，分離膠中鏈狀結(jié)構(gòu)再次變成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，恢復(fù)初始高黏度凝膠狀態(tài)，在血漿和細(xì)胞成分間形成隔離層[5]。

1.3 標(biāo)本與血液同源

在采取血液過后，護(hù)士應(yīng)在每個(gè)采血管上做標(biāo)示，防止貼錯(cuò)標(biāo)識(shí)，防止留錯(cuò)血液標(biāo)本，并認(rèn)真核對(duì)體檢表標(biāo)簽、血袋標(biāo)簽、標(biāo)本標(biāo)簽。

1.4 防止標(biāo)本溶血

標(biāo)本溶血后，紅細(xì)胞破壞所釋放的血紅蛋白（Hb），其組分亞鐵血紅素具有過氧化物酶樣作用，可能造成ELISA假陽性；進(jìn)而抑制Taq酶的活性，使PCR擴(kuò)增效率明顯降低，導(dǎo)致結(jié)果偏低（甚至假陰性）[6]。

1.5 處理與保存要求

血液是一種特殊物質(zhì)，由不同的血液成分組成，不同血液成分的儲(chǔ)存條件也存在一定差異，血液必須在規(guī)定的條件下保存。如紅細(xì)胞在2～6℃冷藏環(huán)境中可儲(chǔ)存35天，血小板可在20～24℃振蕩條件下保存5天，新鮮冰凍血漿在-18℃以下的低溫冰箱中可儲(chǔ)存1年，等等。超出血液儲(chǔ)存條件和期限，血液就會(huì)失去應(yīng)有的作用。

1.6 儀器設(shè)備的控制

儀器設(shè)備應(yīng)有標(biāo)識(shí)和校正驗(yàn)證的標(biāo)識(shí)，使用和維護(hù)記錄填寫相關(guān)數(shù)據(jù)的完整與保存，定期給儀器維護(hù)與維修。如使用全自動(dòng)擴(kuò)增檢測(cè)設(shè)備，可根據(jù)儀器的特點(diǎn)適當(dāng)分區(qū)，應(yīng)能有效防止PCR產(chǎn)物污染。實(shí)驗(yàn)室的分區(qū)原則是各區(qū)獨(dú)立、注意流向、因地制宜、方便工作，同時(shí)各工作區(qū)應(yīng)有明確標(biāo)識(shí)[7]。

2 檢測(cè)中的控制

2.1 建立標(biāo)準(zhǔn)的血液核酸檢測(cè)工作程序

保證檢測(cè)工作流程同一化，標(biāo)本符合檢測(cè)項(xiàng)目技術(shù)要求，試劑使用符合說明書要求，信息管理系統(tǒng)和設(shè)備運(yùn)行通暢。

2.2 保持環(huán)境的清潔

核酸檢測(cè)過程中敏感性極高，微量的污染很有可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，最終使用血液的浪費(fèi)。在實(shí)驗(yàn)室中具備鞋、工作衣或防護(hù)服、鞋套、無粉乳膠手套、一次性口罩、一次性帽子等基本工作用具。各個(gè)各實(shí)驗(yàn)區(qū)的用品應(yīng)有標(biāo)識(shí)，不得混用；配備有相應(yīng)防護(hù)設(shè)備，防止在檢測(cè)的過程中有細(xì)菌感染。引起污染的主要原因有標(biāo)本污染、設(shè)備污染和其它污染。應(yīng)嚴(yán)格控制進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的人員，盡量減少在實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)以減少交叉污染的可能性，工作完成后及時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行有效地清潔去污和消毒，核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室要做好日維護(hù)、月維護(hù)工作[8]。

2.3 做好質(zhì)量控制及評(píng)價(jià)工作

室內(nèi)質(zhì)控必須保證使用試劑中有內(nèi)標(biāo)；必須保證試劑存放符合要求，防止污染；必須采用陰性對(duì)照，以判斷核酸實(shí)驗(yàn)室是否污染；必須每個(gè)檢測(cè)批次都有陽性對(duì)照，以監(jiān)測(cè)核酸提取的有效性。同時(shí)應(yīng)參加衛(wèi)生計(jì)生委臨床檢驗(yàn)中心組織的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)活動(dòng)，以評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

3 檢測(cè)后控制

3.1 首先看內(nèi)標(biāo)，陰陽對(duì)照和質(zhì)控?cái)U(kuò)增結(jié)果，無誤方可發(fā)放報(bào)告。

3.2 核酸單檢陽性獻(xiàn)血者的追蹤應(yīng)遵循知情同意原則

酶免陰性核酸單檢陽性獻(xiàn)血者，應(yīng)進(jìn)行追蹤，不同的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目制定相應(yīng)的追蹤方案。獻(xiàn)血者的追蹤，需要多個(gè)科室協(xié)同進(jìn)行，并遵循知情同意原則。

3.3 開展計(jì)算機(jī)信息管理系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)

集中化核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室必須應(yīng)用系統(tǒng)化對(duì)標(biāo)本的采集與保存、離心與運(yùn)輸、交接及標(biāo)簽編碼，以及檢測(cè)過程和檢測(cè)報(bào)告的發(fā)布等進(jìn)行信息化管理。委托方和受委托方應(yīng)統(tǒng)一血液信息管理軟件、統(tǒng)一標(biāo)本編碼規(guī)則，保證區(qū)域內(nèi)每份血液和其標(biāo)本的追溯性，保證血液檢測(cè)信息的準(zhǔn)確、及時(shí)、安全、有效和完整。

4 結(jié) 論

核酸檢測(cè)可有效地縮短窗口期，降低輸血風(fēng)險(xiǎn)，提高血液安全。在獻(xiàn)血者核酸檢測(cè)過程中，應(yīng)做好實(shí)驗(yàn)室管理，制訂實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系，嚴(yán)格各項(xiàng)技術(shù)操作，熟練掌握儀器設(shè)備性能，防止實(shí)驗(yàn)室污染，保證檢測(cè)結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確性，不斷提高血液檢測(cè)質(zhì)量，確保臨床用血安全。

[1] 段 勇,郭 逸,葉世軍.病毒核酸檢測(cè)術(shù)在西安地區(qū)血液篩查中的應(yīng)用分析[J].中國(guó)輸血雜志,2014,03(12):254-255.

[2] 于志軍,鄧雪蓮,高慧卉,藏 亮,梁曉華,安萬新.血清學(xué)檢測(cè)與核酸檢測(cè)在獻(xiàn)血者血液篩查中的相關(guān)研究[J].實(shí)用預(yù)防學(xué),2014,03(15):365-366.

[3] 趙紅娜,王藝芳,李俊英,葛文超,方建華.核酸檢測(cè)與酶免檢測(cè)在鄭州地區(qū)血液篩查中的聯(lián)合應(yīng)用[J].中國(guó)輸血雜志,2015,11(3):423-424.

[4] 馮 晴,孟中華,呂杭軍.浙江省血站血液集中化檢測(cè)工作實(shí)踐對(duì)于規(guī)劃全省血液核酸檢測(cè)的啟示[J].中國(guó)輸血雜志,2014,08(14): 89-90.

[5] 李 薇,溫馨娜,鄭慧麗.齊齊哈爾市無償獻(xiàn)血者血液HBV、HCV、HIV酶免檢測(cè)聯(lián)合核酸檢測(cè)結(jié)果分析[J].中國(guó)繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育,2016,07(12):147-148.

[6] 方奎明,孫 昂,吳曉晉,祝 青,黃志翔,魯紅霞,易 玲,符 凱,李 軼.血液核酸檢測(cè)降低血傳播疾病風(fēng)險(xiǎn)的研究[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2016,10(15):234-235.

[7] 張 峰,張 瓊,林 碧,菜淑峰,林 杰.血清學(xué)聯(lián)合核酸檢測(cè)在獻(xiàn)血者血液篩查中的互補(bǔ)性[J].中國(guó)艾滋性病,2016,03(12):523-524.

[8] 田耘博,毛 偉,廖紅文.重慶市血液中心血液病毒核酸檢測(cè)試劑利用率的回顧性分析[J].中國(guó)輸血雜志,2016,10(11):325-326.

本文編輯：劉欣悅

R446.6

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ISSN.2095-6681.2016.33.29.02