血清白細胞介素-25與類風濕關節炎的相關性研究

張濱 張瑩 周卉 李明 趙雪麗 朱蕓

血清白細胞介素-25與類風濕關節炎的相關性研究

張濱 張瑩 周卉 李明 趙雪麗 朱蕓

目的通過檢測類風濕關節炎(RA)患者血清白細胞介素(IL)-25水平, 分析其與RA之間的相關性。方法60例RA患者(RA組)和30例健康體檢者(健康對照組), 用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法測定血清IL-25水平, 觀察RA組臨床指標并測定類風濕因子(RF)、C反應蛋白(CRP)、血沉(ESR)、拉環瓜氨酸肽抗體(CCP)等實驗室指標水平, 分析與IL-25水平相關性。結果RA組血清IL-25水平高于健康對照組, 差異有統計學意義(P＜0.01)。不同RA病情時期患者(RA活動組和臨床緩解組)血清IL-25水平比較差異無統計學意義(P＞0.05), 但均高于健康對照組, 差異有統計學意義(P＜0.05)。RA組血清IL-25水平與ESR、CRP、平均疾病活動度評分(DAS28)無相關性(P＞0.05), 與RF呈正相關(r=0.406, P＜0.05)。結論RA患者血清IL-25水平與健康人相比明顯升高；血清IL-25對RA的診斷具有一定的臨床價值；IL-25參與RA的病理過程, 并可能參加相關抗體的產生過程。

類風濕關節炎；白細胞介素-25

類風濕關節炎(rheumatoid arthritis, RA)是以關節組織慢性炎癥和破壞為主的自身免疫性疾病［1］, 發病機制尚不明確。近年研究顯示, IL-25與RA的發生發展密切相關。本研究通過測定RA患者與健康對照者的外周血IL-25水平, 初步分析其與RA相關關系, 探討RA中IL-25的臨床意義, 現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2012年12月～2013年6月在濰坊市人民醫院風濕免疫科就診RA患者60例(RA組), 均符合ACR2010RA最新診斷標準, 其中男12例, 女48例, 年齡26～77歲, 平均年齡(51±13)歲, 病程3～360個月, 平均病程(27.4±19.6)個月, 關節壓痛數(10.4±4.7)個, 關節腫脹數(8.8±4.0)個, 晨僵時間0.1～3.0 h, 平均晨僵(1.0±0.5)h, CCP陽性46例, RF(422.7±448.1)IU/ml, ESR(44.7±17.3)mm/h, CRP (29.1±23.8)mg/L, DAS28評分(5.2±0.9)分。并收集同期健康體檢者30例(健康對照組), 其中男14例, 女16例, 年齡20～65歲, 平均年齡(33±10)歲。所有入選病例均排除其他風濕性疾病。

1.2IL-25測定 用ELISA法測定血清IL-25(試劑盒購自美國R&D公司), 嚴格按照試劑盒內說明進行測定。

1.3指標測定 采用國際公認的常規檢測方法測定兩組RF、CRP、ESR、CCP抗體等其他實驗室指標。

1.4統計學方法 采用SPSS18.0統計學軟件對數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差(±s)表示, 采用t檢驗；相關性分析采用Pearson相關分析。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1RA組與健康對照組血清IL-25水平比較 RA組中血清IL-25水平為(248.2±106.7)pg/ml, 高于健康對照組(48.5± 25.3)pg/ml, 差異具有統計學意義(P＜0.01)。

2.2RA活動組和臨床緩解組血清IL-25水平比較 RA患者的臨床緩解標準［2］為：晨僵時間≤15 min；無疲乏感；無關節疼痛；無關節壓痛；無關節或軟組織腫脹；ESR男性＜20 mm/h, 女性＜30 mm/h, 滿足以上5條以上者為臨床緩解。根據此標準將RA患者分為活動組(37例)和臨床緩解組(23例)。血清IL-25水平分別為(262.7±120.6)pg/ml和(241.5±107.0)pg/ml, 兩組比較, 差異無統計學意義(P＞0.05),但均高于健康對照組, 差異有統計學意義(P＜0.05)。

2.3RA組CCP陽性組和CCP陰性組血清IL-25水平比較 RA組中CCP陽性組和CCP陰性組IL-25水平分別為(305.3±130.5)、(208.7±27.3)pg/ml, 兩組比較差異無統計學意義(P＞0.05)。

2.4RA組血清IL-25水平與實驗室指標相關分析 RA組血清IL-25水平與ESR、CRP、年齡、關節壓痛數、DAS28無相關性(r=0.352、-0.193、-0.058、-0.042、-0.206, P＞0.05)。與病程、關節腫脹數、RF呈正相關(r=0.292、0.311、0.406, P＜0.05)。

3 討論

RA基本病理表現為滑膜炎、血管翳形成, 可侵犯軟骨和軟骨下的骨質及關節周圍韌帶和肌腱, 是造成關節破壞、畸形和功能障礙的病理基礎。RA發病機制尚未明確, 但細胞因子在RA的致病中至關重要, 且與RA病情活動密切相關［3］。IL-25是IL-17家族中的新成員, 主要參與Th2細胞介導的免疫應答, 可誘導IL-6、IL-8等前炎癥因子, 參與RA病理過程［4］。

本研究以RA患者為研究對象, 分析IL-25在RA患者外周血中的表達, 發現RA組血清IL-25水平明顯高于健康對照組, 與相關文獻關于IL-25參與RA病理過程的報道相符, 且經治療已達臨床緩解的RA患者血清IL-25水平仍高于健康對照組, 提示IL-25可能對RA的診斷具有一定的臨床價值。

也有研究［5］發現, 在關節軟骨中有IL-25 的表達, 且可抑制關節軟骨基質的合成, 刺激NO的釋放和IL-6的產生,在IL-25為10 nmol/L時, 可使黏多糖蛋白的合成降低20%, NO的釋放增加400%, IL-6的產生增加330%, 提示IL-25與IL-25R結合后可引起與IL-17R受刺激后相似的下游效應,從而參與關節炎性疾病的發生。抗CCP抗體是RA較早出現且較為特異的抗體, 可作為RA較為敏感的診斷指標［6］, 也是骨破壞的危險因素及判斷關節預后的重要指標［7］。本研究中RA組的CCP陽性組與陰性組IL-25差異無統計學意義(P＞0.05), 但本研究只檢測了患者CCP陽性率, 并沒有定量檢測CCP抗體滴度, 因此僅能得出CCP陽性率與RA患者IL-25水平無相關的結論, 但無法反映出CCP抗體含量與IL-25的關系。另外, 本研究結果顯示RA組IL-25水平與另一個標記性抗體RF呈正相關, 不能完全排除IL-25參與RA相關抗體產生過程的可能。

在CIA模型研究中Kaiwen等［8］對CIA鼠脾細胞和膝關節滑膜進行 IL-25 實時定量聚合酶鏈反應(PCR)分析, 其中IL-25 mRNA表達明顯增強, 而用ELISA檢測CIA小鼠血清和脾細胞培養上清中IL-25 的含量也增加。在CIA的高峰期IL-25水平持續上升, 顯著高于對照組和炎癥早期。這表明IL-25和RA的疾病活動和進展相關。但本研究結果顯示RA活動組血清IL-25水平并不顯著高于臨床緩解組, 且RA組血清IL-25水平與DAS28、ESR、CRP、關節壓痛數無相關性。可能與本研究病例數較少或者IL-25參與RA病程的機制復雜相關。

本研究結果顯示RA患者血清IL-25水平明顯升高, 說明其參與了RA 病理過程。在CIA模型中, 外源性給予重組IL-25可致關節炎的發生, 而抑制IL-25的下游信號則可減少其關節腫脹和骨破壞, 同樣表明IL-25在RA的發病過程中起到的重要作用。可推斷, IL-25可能參與RA的發生發展, 對RA的診斷有價值, 但其作用機制需要進一步研究。相信隨著研究的完善, IL-25有望成為RA未來治療的新靶點。

［1］蔣明, 朱立平, 林孝義.風濕病學.北京:科學出版社, 1995: 815.

［2］中華醫學會風濕病學分會.類風濕關節炎診斷及治療指南.中華風濕病學雜志, 2010, 14(4):265-270.

［3］徐曉玲, 梁瑞霞, 黃君健, 等.細胞因子在類風濕關節炎發病機制中的作用.生物技術通訊, 2008, 19(1):111-114.

［4］Hurst SD, Muchamuel T, Gorman DM, et al.New IL-17 family members promote Th1 or Th2 responses in the lung: in vivo function of the novel cytokine IL-25.J Immunol, 2002, 169(1):443-453.

［5］唐宏勇, 李憶農.IL-25與自身免疫性疾病.新醫學, 2013, 44(12):807-812.

［6］Vincent C, Simon M, Sebbang M, et al.Immunoblotting detection of autoantibodies to human epidermis filaggrin: a new diagnostic test for rheumatoid arthritis.J Rheumatol, 1998, 25(5):838-846.

［7］Kroot EJ, de Jong BA, Van Leeuwen MA, et al.The prognostic value of anticyclic citrullinated peptide antibody in patients with recent-onset rheumatoid arthritis.Arthritis Rheum, 2000, 43(8):1831-1835.

［8］Kaiwen W, Zhaoliang S, Yinxia Z, et al.Changes and significance of IL-25 in chicken collagen II-induced experimental arthritis (CIA).Rheunmtol Int, 2012, 32(8):2331-2338.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.03.009

2015-10-13］

261041 濰坊市人民醫院風濕免疫科(張濱 周卉李明 趙雪麗 朱蕓)；濰坊市婦幼保健院(張瑩)