血清白細(xì)胞介素-25與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的相關(guān)性研究

張濱 張瑩 周卉 李明 趙雪麗 朱蕓

血清白細(xì)胞介素-25與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的相關(guān)性研究

張濱 張瑩 周卉 李明 趙雪麗 朱蕓

目的通過(guò)檢測(cè)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者血清白細(xì)胞介素(IL)-25水平, 分析其與RA之間的相關(guān)性。方法60例RA患者(RA組)和30例健康體檢者(健康對(duì)照組), 用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法測(cè)定血清IL-25水平, 觀察RA組臨床指標(biāo)并測(cè)定類風(fēng)濕因子(RF)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、血沉(ESR)、拉環(huán)瓜氨酸肽抗體(CCP)等實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)水平, 分析與IL-25水平相關(guān)性。結(jié)果RA組血清IL-25水平高于健康對(duì)照組, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。不同RA病情時(shí)期患者(RA活動(dòng)組和臨床緩解組)血清IL-25水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 但均高于健康對(duì)照組, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。RA組血清IL-25水平與ESR、CRP、平均疾病活動(dòng)度評(píng)分(DAS28)無(wú)相關(guān)性(P＞0.05), 與RF呈正相關(guān)(r=0.406, P＜0.05)。結(jié)論RA患者血清IL-25水平與健康人相比明顯升高；血清IL-25對(duì)RA的診斷具有一定的臨床價(jià)值；IL-25參與RA的病理過(guò)程, 并可能參加相關(guān)抗體的產(chǎn)生過(guò)程。

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；白細(xì)胞介素-25

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis, RA)是以關(guān)節(jié)組織慢性炎癥和破壞為主的自身免疫性疾病［1］, 發(fā)病機(jī)制尚不明確。近年研究顯示, IL-25與RA的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。本研究通過(guò)測(cè)定RA患者與健康對(duì)照者的外周血IL-25水平, 初步分析其與RA相關(guān)關(guān)系, 探討RA中IL-25的臨床意義, 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2012年12月～2013年6月在濰坊市人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科就診RA患者60例(RA組), 均符合ACR2010RA最新診斷標(biāo)準(zhǔn), 其中男12例, 女48例, 年齡26～77歲, 平均年齡(51±13)歲, 病程3～360個(gè)月, 平均病程(27.4±19.6)個(gè)月, 關(guān)節(jié)壓痛數(shù)(10.4±4.7)個(gè), 關(guān)節(jié)腫脹數(shù)(8.8±4.0)個(gè), 晨僵時(shí)間0.1～3.0 h, 平均晨僵(1.0±0.5)h, CCP陽(yáng)性46例, RF(422.7±448.1)IU/ml, ESR(44.7±17.3)mm/h, CRP (29.1±23.8)mg/L, DAS28評(píng)分(5.2±0.9)分。并收集同期健康體檢者30例(健康對(duì)照組), 其中男14例, 女16例, 年齡20～65歲, 平均年齡(33±10)歲。所有入選病例均排除其他風(fēng)濕性疾病。

1.2IL-25測(cè)定 用ELISA法測(cè)定血清IL-25(試劑盒購(gòu)自美國(guó)R&D公司), 嚴(yán)格按照試劑盒內(nèi)說(shuō)明進(jìn)行測(cè)定。

1.3指標(biāo)測(cè)定 采用國(guó)際公認(rèn)的常規(guī)檢測(cè)方法測(cè)定兩組RF、CRP、ESR、CCP抗體等其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1RA組與健康對(duì)照組血清IL-25水平比較 RA組中血清IL-25水平為(248.2±106.7)pg/ml, 高于健康對(duì)照組(48.5± 25.3)pg/ml, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

2.2RA活動(dòng)組和臨床緩解組血清IL-25水平比較 RA患者的臨床緩解標(biāo)準(zhǔn)［2］為：晨僵時(shí)間≤15 min；無(wú)疲乏感；無(wú)關(guān)節(jié)疼痛；無(wú)關(guān)節(jié)壓痛；無(wú)關(guān)節(jié)或軟組織腫脹；ESR男性＜20 mm/h, 女性＜30 mm/h, 滿足以上5條以上者為臨床緩解。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)將RA患者分為活動(dòng)組(37例)和臨床緩解組(23例)。血清IL-25水平分別為(262.7±120.6)pg/ml和(241.5±107.0)pg/ml, 兩組比較, 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),但均高于健康對(duì)照組, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.3RA組CCP陽(yáng)性組和CCP陰性組血清IL-25水平比較 RA組中CCP陽(yáng)性組和CCP陰性組IL-25水平分別為(305.3±130.5)、(208.7±27.3)pg/ml, 兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2.4RA組血清IL-25水平與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)相關(guān)分析 RA組血清IL-25水平與ESR、CRP、年齡、關(guān)節(jié)壓痛數(shù)、DAS28無(wú)相關(guān)性(r=0.352、-0.193、-0.058、-0.042、-0.206, P＞0.05)。與病程、關(guān)節(jié)腫脹數(shù)、RF呈正相關(guān)(r=0.292、0.311、0.406, P＜0.05)。

3 討論

RA基本病理表現(xiàn)為滑膜炎、血管翳形成, 可侵犯軟骨和軟骨下的骨質(zhì)及關(guān)節(jié)周圍韌帶和肌腱, 是造成關(guān)節(jié)破壞、畸形和功能障礙的病理基礎(chǔ)。RA發(fā)病機(jī)制尚未明確, 但細(xì)胞因子在RA的致病中至關(guān)重要, 且與RA病情活動(dòng)密切相關(guān)［3］。IL-25是IL-17家族中的新成員, 主要參與Th2細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答, 可誘導(dǎo)IL-6、IL-8等前炎癥因子, 參與RA病理過(guò)程［4］。

本研究以RA患者為研究對(duì)象, 分析IL-25在RA患者外周血中的表達(dá), 發(fā)現(xiàn)RA組血清IL-25水平明顯高于健康對(duì)照組, 與相關(guān)文獻(xiàn)關(guān)于IL-25參與RA病理過(guò)程的報(bào)道相符, 且經(jīng)治療已達(dá)臨床緩解的RA患者血清IL-25水平仍高于健康對(duì)照組, 提示IL-25可能對(duì)RA的診斷具有一定的臨床價(jià)值。

也有研究［5］發(fā)現(xiàn), 在關(guān)節(jié)軟骨中有IL-25 的表達(dá), 且可抑制關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)的合成, 刺激NO的釋放和IL-6的產(chǎn)生,在IL-25為10 nmol/L時(shí), 可使黏多糖蛋白的合成降低20%, NO的釋放增加400%, IL-6的產(chǎn)生增加330%, 提示IL-25與IL-25R結(jié)合后可引起與IL-17R受刺激后相似的下游效應(yīng),從而參與關(guān)節(jié)炎性疾病的發(fā)生。抗CCP抗體是RA較早出現(xiàn)且較為特異的抗體, 可作為RA較為敏感的診斷指標(biāo)［6］, 也是骨破壞的危險(xiǎn)因素及判斷關(guān)節(jié)預(yù)后的重要指標(biāo)［7］。本研究中RA組的CCP陽(yáng)性組與陰性組IL-25差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 但本研究只檢測(cè)了患者CCP陽(yáng)性率, 并沒(méi)有定量檢測(cè)CCP抗體滴度, 因此僅能得出CCP陽(yáng)性率與RA患者IL-25水平無(wú)相關(guān)的結(jié)論, 但無(wú)法反映出CCP抗體含量與IL-25的關(guān)系。另外, 本研究結(jié)果顯示RA組IL-25水平與另一個(gè)標(biāo)記性抗體RF呈正相關(guān), 不能完全排除IL-25參與RA相關(guān)抗體產(chǎn)生過(guò)程的可能。

在CIA模型研究中Kaiwen等［8］對(duì)CIA鼠脾細(xì)胞和膝關(guān)節(jié)滑膜進(jìn)行 IL-25 實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)分析, 其中IL-25 mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng), 而用ELISA檢測(cè)CIA小鼠血清和脾細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-25 的含量也增加。在CIA的高峰期IL-25水平持續(xù)上升, 顯著高于對(duì)照組和炎癥早期。這表明IL-25和RA的疾病活動(dòng)和進(jìn)展相關(guān)。但本研究結(jié)果顯示RA活動(dòng)組血清IL-25水平并不顯著高于臨床緩解組, 且RA組血清IL-25水平與DAS28、ESR、CRP、關(guān)節(jié)壓痛數(shù)無(wú)相關(guān)性。可能與本研究病例數(shù)較少或者IL-25參與RA病程的機(jī)制復(fù)雜相關(guān)。

本研究結(jié)果顯示RA患者血清IL-25水平明顯升高, 說(shuō)明其參與了RA 病理過(guò)程。在CIA模型中, 外源性給予重組IL-25可致關(guān)節(jié)炎的發(fā)生, 而抑制IL-25的下游信號(hào)則可減少其關(guān)節(jié)腫脹和骨破壞, 同樣表明IL-25在RA的發(fā)病過(guò)程中起到的重要作用。可推斷, IL-25可能參與RA的發(fā)生發(fā)展, 對(duì)RA的診斷有價(jià)值, 但其作用機(jī)制需要進(jìn)一步研究。相信隨著研究的完善, IL-25有望成為RA未來(lái)治療的新靶點(diǎn)。

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.03.009

2015-10-13］

261041 濰坊市人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科(張濱 周卉李明 趙雪麗 朱蕓)；濰坊市婦幼保健院(張瑩)