滕濤 梁利國 謝駿
摘要:細菌性疾病是大宗淡水魚類的主要疾病之一,本文對大宗淡水魚類病原菌(愛德華氏菌、魯氏耶爾森氏菌、弧菌、氣單胞菌、熒光假單胞菌、柱狀噬纖維菌、魚害黏球菌、柱狀屈撓桿菌)的分類、生物學性狀、所致疾病及防治方法等方面的研究概況進行了系統(tǒng)的綜述,并對魚類細菌性疾病的研究前景進行展望。
關鍵詞:大宗淡水魚;細菌性疾病;研究進展;病原菌;生物學性狀;防治方法
中圖分類號: S941.42文獻標志碼: A文章編號:1002-1302(2015)11-0008-05
收稿日期:2014-11-04
基金項目:現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系建設專項(編號:CARS-46-10);江蘇省水產三新工程(編號:D2013-5)。
作者簡介:滕濤(1991—),男,湖南常德人,碩士研究生,主要從事水產動物病害方面的研究。E-mail:tengtao0611@126.com。
通信作者:謝駿,研究員,碩士生導師,主要從事池塘微生態(tài)學、水產動物的應激機制、細菌性病害生態(tài)防控技術的研究。Tel:(0510)85559939;E-mail:xiej@ffrc.cn。大宗淡水魚(青、草、鰱、鳙、鯉、鯽、鳊)是我國淡水養(yǎng)殖的主體魚類,在我國漁業(yè)中占有重要地位。隨著淡水養(yǎng)殖集約化程度的提高,魚類細菌性疾病造成的危害也有日益嚴重的趨勢,其流行面廣、死亡率高和持續(xù)時間長,常造成水產養(yǎng)殖的嚴重損失,對該類疾病的研究一直受到國內外研究工作者的關注。近10年來,隨著研究技術的發(fā)展,該領域的研究工作日顯活躍。本文概述了這一類病原菌的分類、生物學性狀、所致疾病及防治方法等,并對魚類細菌性疾病的研究前景進行展望。
1愛德華氏菌屬
1.1遲緩愛德華氏菌
1.1.1分類及生物學性狀遲緩愛德華氏菌(Edwardsiella tarda)屬于腸桿菌科、愛德華氏菌屬,在許多資料和文章中也被稱為遲鈍愛德華氏菌或緩慢愛德華氏菌。遲緩愛德華氏菌為革蘭氏陰性病原菌,短桿菌,大小多在(0.5~1) μm×(1~3) μm,無莢膜,亦不形成芽孢,為周毛菌,能運動。生長溫度范圍為15~42 ℃,最適為37 ℃,適宜pH值范圍為 5.5~9.0[1]。
1.1.2所致疾病及防治方法遲緩愛德華氏菌(E. tarda)是一種重要的人、畜、魚共患病的病原菌,能引起魚類出血性敗血癥,使魚類腹部積水腫脹、體表出血、腸內出現(xiàn)黏液,造成魚類的大量死亡,給水產養(yǎng)殖業(yè)造成巨大損失。被感染的淡水魚如鯽等,腹部膨脹,有白濁腹水,口吻部、體表等部位出血,剖檢可見肝、腎形成特征性的膿瘍[2]。王燕等在所試的30種抗生素中,發(fā)現(xiàn)該菌株對先鋒霉素V、慶大霉素、諾氟沙星、呋喃唑酮等抗生素敏感,而對其他抗生素則具有一定的抗性[3]。
王亞婷介紹防治方法有3種:(1)化學治療法:乳酸和磷酸三鈉可以使魚皮膚表面的菌體數(shù)量大大減少;(2)疫苗防治法:有滅活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗3種疫苗,用腹腔注射效果較明顯;(3)生物防治法:利用對遲緩愛德華菌有殺滅作用的噬菌體PhiET-1,對泥鰍進行菌浴感染試驗,發(fā)現(xiàn)當復染指數(shù)(MOI) = 0.1時,8 h可幾乎殺滅全部病原[4]。
1.2鲇魚愛德華氏菌
1.2.1分類及生物學性狀鲇魚愛德華氏菌(Edward ictaluri)屬于愛德華氏菌屬,在該屬細菌中最難培養(yǎng)。菌體大小約1 μm×(2~3) μm,為小直桿菌,革蘭氏染色陰性,無莢膜,不形成芽孢,兼性厭氧,25 ℃時有動力,在37 ℃時無動力。菌落大小為0.5 mm左右,圓形光滑、邊緣整齊、稍隆起[5]。
1.2.2所致疾病及防治方法由鲇魚愛德華氏菌(E. ictaluri)所引起的魚類愛德華氏菌病主要是鲇魚腸道敗血癥。在發(fā)病初期病魚無明顯臨床表現(xiàn),隨著病程發(fā)展,病魚表現(xiàn)為食欲減退、反應遲鈍,后期病魚頭頂部充血,下頜皮膚破損出血呈圓形孔洞[6]。該病有季節(jié)性,常發(fā)生于春季和秋季,鳙等可被感染發(fā)病,病魚在咽部及口腔附近出現(xiàn)皮膚出血或淤血、鰓色變淡、突眼癥狀,解剖可見腎臟和脾臟腫脹,肝臟出血且有壞死灶,腹膜內有血性腹水[7]。周冬仁等通過對18種藥物的敏感試驗結果表明,該病菌分離株對呋喃妥因、青霉素、依諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星、先鋒Ⅵ、呋喃唑酮、強力霉素、菌必治、新霉素敏感,這為黃顙魚的鲇魚愛德華氏菌病的用藥提供了依據(jù)[5]。
治療方法:一旦發(fā)現(xiàn)該病,馬上進行藥物治療,首先整個水體潑灑聚維酮碘等碘制劑0.5 g/m3;同時飼料拌加恩諾沙星2~4 g/kg,連續(xù)投喂5 d。但是藥物治療只有在發(fā)病早期才能取得較好的療效。
2魯氏耶爾森氏菌
2.1分類及生物學性狀
魯氏耶爾森氏菌(Yersinia ruckeri)為腸桿菌科、耶爾森氏菌屬[8]。該菌大小為(0.7~0.8) μm×(1.3~2.7) μm,為革蘭氏陰性,微彎曲,短桿狀,兩端鈍圓,靠7~8根周鞭毛運動[9]。其在20 ℃培養(yǎng)下有動力,37 ℃下培養(yǎng)無動力,且20 ℃比37 ℃生長旺盛[10]。
2.2所致疾病及防治方法
該菌能引起魚類紅嘴病,是淡水養(yǎng)殖魚類暴發(fā)性敗血癥的常見致病菌。該菌導致魚體表面或器官出血,病魚的主要臨床癥狀為:體表潰爛、充血,內臟器官如腎臟、脾臟、心臟、肝臟以及鰓出血等,死亡率較高。徐伯亥等報道了在鰱、鳙發(fā)生的一種暴發(fā)性新的流行病,具有流行面廣、致死率高等特點,從病魚分離出來的細菌經試驗證明毒力很強,經7次重復感染試驗3 d之內全部死亡,死魚癥狀與天然發(fā)病魚的癥狀一致,并經重分離,再感染亦能復制,而且細菌性狀相同[10]。其他鯉科魚類,如鯉、鯽、團頭魴等也患與此類似的疾病而大量死亡。范方玲在所試的18種藥物中,該菌株對諾氟沙星、環(huán)丙沙星、強力霉素、氯霉素、卡那霉素等5種藥物敏感[11]。
在抑制魯氏耶爾森氏菌引起的紅嘴病方面,陶健等報道了黃芩、訶子以及復方制劑三黃湯在體外對魯氏耶爾森菌具有較強的抑制作用,說明該中草藥中的某些成分具有較強的抑菌能力[12]。該病是一種全身性感染性疾病,因此在防治上應內外同治,即內服敏感的抗菌藥和外用消毒藥消毒魚體和水體。
3弧菌屬
3.1河流弧菌
3.1.1分類及生物學性狀河流弧菌(Vibrio fluvialis)屬于弧菌屬,菌體大小為(0.5~0.8)μm×(1.8~2.5)μm,為革蘭氏陰性、直或弧狀短桿菌,無芽孢,無莢膜,以極生單鞭毛(有鞘膜)運動,單個或成雙相連(有時3~4個排列成短鏈),亦可呈多形性,細菌運動呈活潑的穿梭狀[13]。該菌在弧菌選擇性培養(yǎng)基上生長良好,菌落呈黃色、黏稠、光滑、圓形、邊緣整齊,直徑1~1.5 mm。在血瓊脂平板上菌落特點基本同上,但菌落周圍呈現(xiàn)溶血。
3.1.2所致疾病及防治方法徐伯亥等研究證實,河流弧菌是淡水養(yǎng)殖魚類(鰱、鳙等)細菌性敗血癥的一種致病菌[14]。病魚嚴重貧血,上下頜、口腔、鰓蓋、眼睛等充血;眼球突出,肛門紅腫,肝、脾、腎腫脹,有的魚鱗豎起。阿哈提等報道,2001年8月在新疆烏魯木齊市某水產站養(yǎng)殖的青魚突然發(fā)病、死亡(死亡率近70%),經做細菌學檢驗表明,為河流弧菌和嗜水氣單胞菌混合感染所致[15]。阿哈提等經藥敏試驗發(fā)現(xiàn),該菌對菌必治、丁胺卡那霉素高度敏感,對鏈霉素、新生霉素、土霉素、氯霉素、金霉素中度敏感[15]。
防治方法:(1)消毒藥。生石灰,1 m水深的1 m2水面用藥22.5~30 g,化水全池潑灑,可有效地控制并緩解此病;漂白粉,每立方水體用藥1 g,溶水全池潑灑。(2)內服藥。魚服康A型,每100 kg魚體質量用藥150~200 g,混飼,1 d 1次,連用3 d。若病情較重,間隔3 d后,再用1個療程;魚血散,用量按魚體質量的0.1%給藥,每天1次,連用7 d[16]。
3.2霍亂弧菌
3.2.1分類及生物學性狀霍亂弧菌(Vibrio cholerae)屬于弧菌屬,為弧菌屬的模式種,需氧或兼性厭氧菌,革蘭氏陰性,菌體短小呈逗點狀,有單鞭毛、菌毛,部分有莢膜[17]。霍亂弧菌在營養(yǎng)瓊脂和堿性瓊脂上呈無色、圓形、透明、光滑、濕潤、扁平或稍凸起、邊緣整齊的菌落。
3.2.2所致疾病及防治方法霍亂弧菌(V. cholerae)是烈性腸道傳染病霍亂的病原體,可導致感染者劇烈嘔吐、嚴重腹瀉、失水乃至死亡。在水產上,李楠等發(fā)現(xiàn),河南省新鄉(xiāng)市一草魚養(yǎng)殖場出現(xiàn)霍亂弧菌在草魚上引起的“體表潰爛、腸道和腸系膜充血、出血,肝臟貧血并伴有嚴重腹水”為主要癥狀的細菌性傳染病[18]。葉菊蓮等研究發(fā)現(xiàn),從海、水產品中分離的霍亂弧菌對諾氟沙星、頭孢噻肟100% 敏感,但對復方新諾明和萘啶酸的耐藥性較高[19]。
防治方法:病時要減少投餌,以防殘餌腐敗;每50 kg魚內服磺胺藥5 g或土霉素1~2.5 g;外用消毒可采用強氯精0.2~0.25 mg/L溶水全池潑灑。
3.3非O1群霍亂弧菌
3.3.1分類及生物學性狀非01群霍亂弧菌(Non-01,Vibrio cholerae)屬于弧菌屬,菌體大小為(0.7~1.0)μm×(1.5~3.0)μm,為革蘭氏陰性發(fā)酵型桿菌,弧狀,具動力,以單極端鞭毛運動,耐鹽范圍為6%以下。
3.3.2所致疾病及防治方法許多試驗證明水產動物經常成為霍亂弧菌的宿主,起到傳播媒介的作用。翟子玉等從患病的鯽、鰱、鳙魚體內分離到點狀氣單胞菌和非霍亂弧菌2種相應病原菌,通過人工感染試驗表明,非01霍亂弧菌僅引起鰱、鳙被感染發(fā)病,未能使鯽感染發(fā)病,與在實際生產中出現(xiàn)的發(fā)病情況相吻合[20]。徐景野等采用K-B法進行藥敏試驗,發(fā)現(xiàn)該菌株對氯霉素、紅霉素、萬古霉素、先鋒霉素V、環(huán)丙沙星、強力霉素、菌必治、慶大霉素等敏感[21]。
防治方法:食鹽0.4%+中藥復合制劑+法拉乃司或鰻康素3~5 mg/L,浸浴18~24 h換水1/3,添加食鹽,保持鹽度為4‰,仍用上述劑量的中藥復合制劑及法拉乃司等,如此連續(xù)用藥3 d,3 d后,每月?lián)Q水1/3,改用有機碘(如優(yōu)碘靈或龍碘)1~2 mg/L+呋喃唑酮3~5 mg/L,連續(xù)使用2 d后轉向正常投餌及其他管理。
4氣單胞菌屬
4.1嗜水氣單胞菌
4.1.1分類及生物學性狀嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)屬于氣單胞菌屬,無芽孢,不產生莢膜,散在或成雙排列,端生單鞭毛(有運動性)的短桿菌,兩端鈍圓,大小多在(0.6~0.7)μm×1.4 μm。菌落特征為圓形光滑、邊緣整齊、較隆起、不透明的淺灰黃白色。
4.1.2所致疾病及防治方法嗜水氣單胞菌(A. hydrophila)寄主廣泛,可引起大宗淡水魚等發(fā)生相應的細菌性敗血癥,危害魚的種類最多、地區(qū)最廣、損失最大。綜合病癥一般表現(xiàn)為病魚的上下頜、鰓蓋、眼睛、鰭基及魚體兩側充血,眼球突出、肛門紅腫,肝、脾、腎及腸道糜爛,并伴有嚴重腹水,部分病魚鱗片豎起[22]。陳翠珍等研究報道了由嗜水氣單胞菌引起的鯉體表出血感染癥,由嗜水氣單胞菌單獨或與溫和氣單胞菌、豚鼠氣單胞菌混合感染引起的草魚腸炎[23]。張波等的藥敏試驗結果顯示,該菌株對大多數(shù)試驗藥物敏感,對復達欣、頭孢西丁、先鋒必等11種藥物高度敏感[24]。
防治方法:(1)先殺滅魚體外的寄生蟲。(2)外潑消毒藥與內服藥飼相結合以殺滅水體及魚體內的病原菌。外潑消毒藥,1個療程潑1~3次,1 m3水體用二氧化氯1~2 mL或溴氯海因0.5 g,或二氯異氰尿酸鈉0.5~0.6 g等;內服藥充分拌勻后制成水中穩(wěn)定性好的顆粒藥飼投喂,連喂5~7 d,每天上午、下午各投喂1次;(3)在治愈后2 d,全池遍灑1次生石灰(1 m3水體用生石灰30 g),使池水呈弱堿性,有利于浮游生物的繁殖和適合魚類的生長[25]。