不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評價分析

程廣翠

（吉林省遼源市中心醫(yī)院檢驗科，吉林 遼源 136200）

不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評價分析

程廣翠

（吉林省遼源市中心醫(yī)院檢驗科，吉林 遼源 136200）

目的 分析ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA （化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）三種乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測方式的精密度與靈敏度。方法通過對168例血清樣本采用ELISA、ECLIA及TRFIA三種方法平行測定乙型肝炎病毒DNA定量檢測陽性患者的HBsAg水平，并根據(jù)結(jié)果分析三種檢測方法的靈敏度和精密度。結(jié)果進(jìn)行低濃度HBsAg檢測時，ECLIA的陽性檢出率較ELISA吸附試驗和TRFIA的檢出比率值均高，且有明顯差異，并具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論在進(jìn)行HBV血清流行病學(xué)調(diào)查中采用ELISA法檢驗，發(fā)現(xiàn)其具有靈感度高，對HBsAg進(jìn)行陽性測試時驗出率也較高，并在檢測低濃度HBsAg時更能凸顯其優(yōu)勢，因而ELISA法作為對低濃度HBsAg檢測上值得臨床推廣。

腫瘤血清標(biāo)志物；ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）；檢測分析

血清標(biāo)志物HBsAg（乙型肝炎表面抗原）在1963年起很長時間被稱為“奧抗”，1974年被定名為乙型肝炎表面抗原。在血清檢測時，血清HBsAg呈陽性作為HBV感染的標(biāo)志。根據(jù)我院收治的168例患者，采集其血清樣本后，使用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）對乙型肝炎病毒的DNA定量檢測的陽性患者的HBsAg水平進(jìn)行檢測，分析三種方法的檢測靈敏度和精密度，及臨床應(yīng)用價值。

1　材料與方法

1.1測試資料：根據(jù)我院收治的168例患者，采集其血清樣本后，使用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）［1］對乙型肝炎病毒的DNA定量檢測的陽性患者的HBsAg水平進(jìn)行檢測。其中男性74例，女性94例，且年齡在16～60歲。

1.2研究方法

1.2.1樣本采集：對檢查者進(jìn)行空腹采血后，檢驗人員盡快將標(biāo)本血清分離，選擇立即測定或是放置冰箱冷凍室，并將溫度調(diào)至-18～- 20 ℃保存，確保2 d內(nèi)檢測完成。

1.2.2檢測方法：使用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA （化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）三種乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測方式，按照試劑盒說明書進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗測定，并按照全自動電化學(xué)發(fā)光儀和配套試、酶標(biāo)儀等儀器設(shè)備的使用說明書進(jìn)行操作檢測樣本。

1.2.3靈敏度實驗：根據(jù)國家臨檢中心提供的臨界標(biāo)準(zhǔn)將血清稀釋成不同的濃度，ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）分別進(jìn)行連續(xù)五次重復(fù)測驗，統(tǒng)計出測定每次結(jié)果，并加以分析。

1.2.4臨床樣本的檢測：利用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）168例患者血液樣本進(jìn)行檢測的HBsAg水平并與利用電化學(xué)光反應(yīng)檢測的樣本結(jié)果進(jìn)行比較。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理：使用SPSS1.7統(tǒng)計數(shù)據(jù)分析軟件對所有收集數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計量數(shù)據(jù)以（±s）表示，采用配對t檢驗，計數(shù)數(shù)據(jù)采用χ2檢驗。其數(shù)據(jù)差異作為統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié) 果

2.1三種方法的靈敏度檢測：ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）與ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）相比，ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）靈敏度較高。

2.2ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）與ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）測定HBsAg水平各模式的結(jié)果：對我院收治的168例血液樣本利用三種檢測方式檢測，ECLIA檢測出129例，檢測出的比率為76.7%，ELISA檢測出118例，檢測出的比率為70.2%。通過以上資料：發(fā)現(xiàn)ECLIA法較ELISA法與TRFIA法對于低濃度的HBsAg檢出率較高，具有統(tǒng)計學(xué)意義。與相關(guān)學(xué)者報道的4種方法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物的結(jié)果具有高度以上一致性，CLIA和ECLIA在檢測敏感性上更有優(yōu)勢［2］相吻合。.

3　討 論

根據(jù)資料顯示，全球目前有乙型肝炎病毒的攜帶者將近3億，而我國初步統(tǒng)計患有乙型肝炎病毒攜帶者將近1億之多，目前是世界上乙型肝炎的高發(fā)國之一。對于乙型肝炎病毒的檢測手段需要檢驗專家的不斷探索和臨床檢驗工作者的認(rèn)真努力，臨床檢驗ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）與ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）對于乙型肝炎血清標(biāo)志診斷數(shù)據(jù)一直是作為診斷乙型肝炎患者的標(biāo)準(zhǔn)，長期受到臨床技術(shù)人員的高度重視，乙型肝炎病毒患者的早期診斷對治療效果及預(yù)后的影響很大，早期患者的HBsAg一般較低，能找到合適的方法對低濃度的HBsAg進(jìn)行檢測，對早期乙型肝炎患者的發(fā)現(xiàn)具有重大的臨床意義。一般患病者早期的低濃度HBsAg一般較低，通過本組資料顯示，ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、TRFIA（時間分辨免疫熒光法）、ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）測定的靈敏度較高，ELISA、TRFIA以及ECLIA 3種乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測方法之間一致性程度較高，有利于結(jié)果互認(rèn)［3］，ECLIA法較ELISA法與TRFIA法對于低濃度的HBsAg檢出率較高，為更好的服務(wù)于臨床，為臨床提供更準(zhǔn)確數(shù)據(jù)，患者檢測和血液樣本時應(yīng)盡可能采用ECLIA法，以保證低濃度HBsAg的檢出率。

［1］陳佑明，黃敬，熊符，等.時間分辨熒光免疫分析法和免疫放射分析法檢測HBsAg的對比分析［J］.標(biāo)記免疫分析與臨床，2006，13（1）：50-51.

［2］楊凡，單詠梅，周宏，等.不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評價分析［J］.檢驗醫(yī)學(xué)，2010，25（9）：723-726.

［3］歐貴啟.不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評價分析［J］.中外醫(yī)療，2011，30（36）：175-176.

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1671-8194（2016）24-0045-01