段慧云(牡丹江市第二人民醫院,黑龍江 牡丹江 157000)
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腦血栓患者治療前后血小板膜糖蛋白CD62p水平變化的研究
段慧云
(牡丹江市第二人民醫院,黑龍江 牡丹江 157000)
【摘要】目的 通過對CD62p的觀察研究,判定其對腦血栓疾病的影響。方法 采用流式細胞儀對CD62p水平進行檢測。結果 治療后2、4、8周的血漿CD62p水平逐漸下降,且與治療前相比差異顯著(P<0.05)。結論 腦血栓疾病的發生與發展是受到多種因素綜合影響,使得患者腦血管內血液變成固狀,血流受到不同程度的阻礙后而形成的一類綜合疾病。
【關鍵詞】血小板;CD62p;腦血栓
血小板主要功能為參與血栓形成,主要通過其表面糖蛋白的作用來完成的,通常來說,血小板內的溶酶體膜糖蛋白與α-顆粒膜糖蛋白為靜息狀態,在各因素作用下,溶酶體膜與Q-顆粒膜和血小板漿膜相互融合,使得血小板表面的CD63與CD62p轉變為活化血小板,加強了其聚集、黏附功能[1]。因而,在各種因子作用下使得血小板膜糖蛋白的數量與構型重新發生變化,使得血小板內部發生分泌反應,形成血栓,主要為CD62p、GPⅡb/Ⅲa、CD42b等。本次研究主要對腦血栓的診療及預后做出相應分析與判斷。
1.1 一般資料:選取我院2013年3月至2014年3月收治的腦血栓患者80例作為本次的額觀察對象,設為試驗組(男58例,女22例,平均年齡67歲),另取在我院門診檢查為健康人群80例設為常規組(男55例,女25例,平均年齡68歲)。
1.2 方法
1.2.1 所需器材:CD42b抗體(藻紅蛋白標記)、CD62p抗體(異硫氰酸熒光素標記);多聚甲醛、磷酸鹽緩沖液;需用儀器包括:Falocn上樣管、FACSCalibur流式細胞儀、CTAD真空采血管、血細胞分析儀等。
1.2.2 樣品的處理:治療前與治療后的2、4、8周取1.8 mL的靜脈血,置于抗凝劑離心管內(包含枸緣酸鈉0.2 mL,3.8%濃度),離心5 min,保持800 r/min的速率,后將富血小板血漿分離出來,并置入等量的多聚甲醛(濃度為2%),并固定15 min,后對懸浮的血小板進行洗滌(15 min,1000 r/min),后用緩沖液將血小板懸浮調節為1×1010/L的濃度。
1.3 熒光染色:將標記的抗體CD62p,20 μL與CD42b,20 μL混合搖勻,置于避光處0.5 h,后進行2次洗滌,并將其轉移至流式細胞儀進行檢測。
1.4 流式細胞儀的檢測與數據分析:前向與側向角采用對數放大,每個樣品收集血小板20000個,并將熒光標記的抗體陽性百分比記錄下來,分別計算CD42b與CD62p的陽性表達率。
1.5 統計學處理:本次數據采用SPSS17.0的統計軟件,計量資料用均數±標準差(±s)表示,行t檢驗,當P<0.05時表示差異具有統計學意義。
治療后的2周血漿CD62p水平為(32.21±8.53)%;4周(24.26± 8.36)%;8周(12.25±6.37)%,與治療前數據[(50.24±9.81)%]比較差異顯著(P<0.05),但是與常規組數據[(3.25±0.55)%]比較均較高(P<0.05)。
大量臨床實驗證明,腦梗死疾病的發生與發展與多種因素相關,其中起到重要作用的包括活化血小板于腦血栓中的形成、發展等過程,血漿CD62p指的是其特異性標志。
CD62p作為血小板膜糖蛋白中的一種,其分布于靜止血小板與巨核細胞內,其中α顆粒(非活化血小板胞質內)包含CD62p,當血小板進行活化時,該顆粒將血小板膜進行融合后釋放,CD62p重新在血小板表面排列,且該物質僅僅在活化血小板的表面表達,不隨時間變化而消失在血小板表面,CD62p同樣也可將血小板活化狀態適當反映出來。所以說,血小板活化特異性標志之一是CD62p的表達[2]。
CD62p相對于血小板膜而言,介導血小板與淋巴細胞、中性粒細胞、單核細胞間的黏附,因此CD62p屬于活化血小板和白細胞、內皮細胞等互相作用的紐帶。臨床研究顯示,CD62p也可以歸屬于單核細胞與中性白細胞間的一種受體,該物質在細胞黏附過程中,使得中性白細胞與血小板相互進行黏附、聚集、機化血栓等,除此之外,當內皮細胞或者是血小板進行活化時,CD62p可以釋放至血漿內,其中血漿內CD62p的含量可以在一定程度上表現出血小板的活化程度與血栓的形成傾向。近年來相關研究發現[3],CD62p可以作為血小板與血管內皮細胞或者是中性粒細胞間的介導因子,可以使得單核細胞間互相進行黏附并聚集等,可以有效啟動并放大血栓形成等效用,對栓塞、相關炎癥等方面起著不可忽視的作用。
通過對CD62p的觀察研究可以對患者體內的血小板與內皮細胞的激活狀態有一定的參考作用,同樣對已血栓性、炎癥損傷等疾病的診療方面意義重大。最初相關研究通過對CD62p的檢測,并結合一些自身免疫性的疾病、腎臟疾病、糖尿病等進行觀察,研究發現CD62p水平同樣會出現不同程度的升高,后來經過更深層次的研究后得出,健康人體的血漿內同樣存在可溶性的CD62p,但是其濃度較低。
所以說,腦血栓疾病是受各種因素影響,并使得患者腦血管內血液變成固狀,促使血流受到不同程度的阻礙后而形成的一類綜合疾病。
參考文獻
[1]王朝輝,鞠文博,黃競妍,等.腦血栓患者治療前后血小板膜糖蛋白CD62p水平的比較[J].中國老年學雜志,2013,33(5):1152-1153.
[2]許文芳,陳雪芳,尹琪華,等.急性腦梗死患者血小板CD62p和CD63的變化及臨床意義[J].檢驗醫學,2010,25(1):78-79.
[3]王朝輝,鞠文博.流式細胞術檢測血小板膜糖蛋白與血栓性疾病變化關系研究[J].北華大學學報(自然科學版),2013,14(5): 542-545.
中圖分類號:R743
文獻標識碼:B
文章編號:1671-8194(2016)13-0176-01