用ELISA法檢測乙型肝炎兩對半準確性的影響因素探討

王　 迪 張錦偉 韓亞男

（大連市第六人民醫院檢驗科，遼寧 大連 116031）

用ELISA法檢測乙型肝炎兩對半準確性的影響因素探討

王 迪 張錦偉 韓亞男

（大連市第六人民醫院檢驗科，遼寧 大連 116031）

目的 探討用ELISA法（酶聯免疫吸附法）檢測乙型肝炎兩對半準確性的影響因素。方法 選取2014年8月至2015年8月在我院采用ELISA法檢測乙型肝炎兩對半的1628例患者為觀察目標，對其檢測過程進行回顧性分析，并總結影響檢測結果準確性的影響因素。結果 影響1628例患者檢測結果準確性的因素具體如下：實驗前標本準備工作不充足、檢驗人員的素質與水平較差、血清標本質量不達標、檢驗操作程序不規范、檢驗結果研讀不準確等。結論 乙型肝炎兩對半應用ELISA法檢測過程中，檢驗人員必須保持高度負責、嚴謹慎重的工作態度，妥善安排實驗前的標準準備工作，規范操作，準確評定檢驗結果，對相關影響因素進行控制，切實提高檢測結果的準確性和有效性，以便為臨床診斷和治療提供真實可靠的數據參考。

乙型肝炎兩對半；影響因素；準確性；ELISA法

乙型肝炎是臨床比較常見的一種惡性傳染性疾病，其對患者身體健康和生命安全造成嚴重威脅。ELISA法是臨床檢測乙型肝炎患者的常用方法之一，其檢測結果真實有效，可為臨床診斷和治療乙型肝炎提供詳盡的信息。然而，由于實際操作過程中多種因素的影響，ELISA法的檢測結果也存在假陽性或假陰性的可能性。明確可能影響ELISA法檢測結果的相關因素，制定相應的防范措施，對提高乙型肝炎兩對半準確性和檢驗質量具有非常重要的作用［1］。本文選取在我院采用ELISA法檢測乙型肝炎兩對半的1628例患者為觀察目標，現作如下報道。

1　 資料與方法

1.1 一般資料：選取2014年8月至2015年8月在我院采用ELISA法檢測乙型肝炎兩對半的1628例患者作為觀察目標，其中男996例，女632例，患者年齡27～70歲，平均年齡（48.3±6.2）歲?；仡櫺苑治鏊腥脒x病例的乙型肝炎兩對半臨床資料，對影響檢測結果的因素進行評析。

1.2 ELISA法的具體應用及影響因素分析：乙型肝炎兩對半應用ELISA法進行檢測時，做好試劑盒的選擇與保存非常關鍵。如果試劑盒質量不佳，將會直接影響到檢測結果，所以試劑盒必須達到優質、可靠的要求，以保證其性能的穩定性和靈敏度、特異性均不會出現任何差異。試劑盒的保存必須按照既定的要求和標準，開始進行實驗前，將試劑盒在常溫下放置30 min。對試劑盒的性能以及實驗操作過程的具體流程、易發生問題的環節，實驗操作人員必須十分了解，除此之外，還必須，明確乙型肝炎兩對半每個標志代表的不同意義以及失控處理方法、質量檢測方法、標準等［2］。

標本處理過程和保存也是影響乙型肝炎兩對半檢測結果的主要因素。采集標本過程中，如果標本已經出現溶血的情況，那么已經發生破裂的紅細胞就會不斷釋放出大量的氧化物酶活性物，對顯色劑的顯色反應造成干擾，最后導致實驗結果出現小三陽或大三陽的結論。對采集試管進行清潔處理時，必須嚴格按照標準方法進行操作，保證對其進行完全、徹底的清洗，以便有效控制檢查感染發生率。在實際的檢測過程中，盡量選擇玻璃試管或1次性真空采集管，標本則選擇非抗凝標本。標本凝固不全也會在一定程度上對檢測結果造成不良影響。少數檢驗操作人員為盡快完成ELISA法檢測工作，通常在標本還沒有達到標準要求時就對血清進行強行分離，殘留的纖維蛋白原會使檢測結果出現假陽性的結論。所以，對血液標本進行分離操作之前，必須保證其充分凝固狀態，以得到準確無誤的檢測結果［3］。ELISA法具有非常高的而敏感性，其對各種干擾元素的敏感性也非常強，因此，抗凝、離心操作時必須科學嚴謹，以降低交叉感染發生率，保證檢測結果的準確性。按照血清的存放條件對標本進行保存，禁止對血清進行顛倒混勻或者反復溶凍，也不可長時間存放。綜合乙型肝炎兩對半監控技術的特異性與靈敏性對質控方法進行選擇，對病原體或抗體進行篩查，保證血清OD值的穩定性不受影響，切實提高檢測質量?？赏ㄟ^復驗的方法對失控標本進行處理，保證檢測結果的準確率符合既定要求［4］。

根據臨床現在相關研究結果可知，很多人的血清標本中都含有類風濕因子、嗜異性抗體、補體等非液體性干擾物質，這些物質會對ELISA法檢測乙型肝炎兩對半的結果產生一定的影響，對患者血清標本自身特異性導致異常實驗結果的情況，需要再次進行復檢的方法得到檢測結果。除此之外，在為患者進行乙型肝炎兩對半ELISA法檢測之前，還必須明確其之前用藥情況，將血液本身的相關影響因素排除之后，方可進行檢測。

乙型肝炎兩對半應用ELISA法檢測時，加樣、溫育以及洗板、顯色這幾個環節是最為重要的影響因素。加樣時，首先需要明確實驗室操作具體規程，然后按照這些標準進行操作，經常校準加樣器，并徹底清洗加樣器。將標本加入向反應孔時，切不可同時與其他反應孔接觸，使用振蕩器對標本進行＞30 s的混勻后才能將其置入溫育箱。溫育環節中需要對標本是否出現周邊效應進行密切觀察，可選擇水育的方法進行操作，以防止出現周邊效應或其進入其他影響物質。進行洗板的操作時，需要對時間差進行控制，徹徹底底的進行清洗，待洗凈之后還要做好污染的預防措施。使用含氯的消毒劑時，必須防控好其與反應孔之間的相互作用，避免洗滌液發生外溢或者混用的情況出現。顯色是ELISA法檢測必不可少的一個溫育反應過程，時間、光線、溫度等均會對這一過程產生干擾。所以進行顯色操作時必須避免強光刺激，在規定時間內快速完成比色操作，嚴格審查檢測結果，做好詳細數據記錄［5］。

2　 結 果

影響1628例患者檢測結果準確性的因素具體如下：實驗前標本準備工作不充足、檢驗人員的素質與水平較差、血清標本質量不達標、檢驗操作程序不規范、檢驗結果研讀不準確等。

3　 討 論

ELISA法對乙型肝炎兩對半的檢測具有非常重要的作用，其在乙型肝炎診斷和治療方面意義顯著［6］。由本次研究結果可知，實驗前標本準備工作不充足、檢驗人員的素質與水平較差、血清標本質量不達標、檢驗操作程序不規范、檢驗結果研讀不準確等諸多因素都會對ELISA法檢測乙型肝炎兩對半的結果產生影響。對這些影響因素進行充分分析并做好相應的防范措施，可顯著提高ELISA法檢測結果的準確性和檢測質量。鑒于此，檢驗人員必須保持高度負責、嚴謹慎重的工作態度，妥善安排實驗前的標準準備工作，規范操作，準確評定檢驗結果，對相關影響因素進行控制，切實提高檢測結果的準確性和有效性，以便為臨床診斷和治療提供真實可靠的數據參考。

［1］ 黃家麗.分析對用ELISA法檢測乙肝兩對半準確性的影響因素［J］.當代醫藥論叢，2014，12（4）:168-169.

［2］ 趙遠懷，向際兵，羅樂平，等.乙肝兩對半檢測的臨床意義和影響因素［J］.中國當代醫藥，2011，18（3）:69-70.

［3］ 羅斌，曾永龍，滕元姬，等.TRFIA與ELISA法對乙肝兩對半測定的比較分析［J］.右江醫學，2012，40（5）:701-703.

［4］ 楊雙明.ELISA法檢測患者乙肝兩對半的影響因素及意義［J］.健康必讀（中旬刊），2013，12（8）:154-.

［5］ 石梁.酶聯免疫法和膠體金快速檢測板檢測乙肝兩對半的比較分析［J］.臨床醫藥文獻電子雜志，2015，49（28）:5919-5920.

［6］ 薛春楊，周建波.ELISA法乙肝兩對半檢測影響因素分析和臨床意義［J］.中國誤診學雜志，2011，11（16）:3913-3914.

［7］ 張琴.ELISA法檢測乙肝兩對半的影響因素及處理方法［J］.中國保健營養（中旬刊），2013，26（5）:208.

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1671-8194（2016）30-0142-02