Sysmex XE-5000血液分析儀復檢規則的建立與評估

張書鳳，何艷群，焦炳欣，華文浩

(首都醫科大學附屬北京地壇醫院檢驗科，北京 100015)

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Sysmex XE-5000血液分析儀復檢規則的建立與評估

張書鳳，何艷群，焦炳欣，華文浩△

(首都醫科大學附屬北京地壇醫院檢驗科，北京 100015)

摘要:目的建立針對該院Sysmex XE-5000血液分析儀血常規測定的復檢規則并進行評估,以此提升測定結果的實效性。方法收集2014年該院門診及病房共計606例患者標本，兩名主管技師采用雙盲法進行顯微鏡檢查，以此結果的平均值為判斷標準，并根據國際血液學復檢專家組制訂的41條規則，同時結合該院傳染病醫院的患者特色及儀器特點，制訂該院的血常規20條復檢規則。結果以顯微鏡檢查結果為標準，檢測的606份標本，符合規則116份,復檢率19.14%(116/606)，其中真陽性率6.93%(42/606)，假陽性率12.21%(74/606)，假陰性率2.64%(16/606)，真陰性率78.22%(474/606)，靈敏度72.41%，特異度86.5%。陽性結果預期值36.21%，陰性結果預期值96.73%，總有效率85.15%。結論該檢驗室制訂的復檢規則合理有效，對于血常規測定速度的提高，檢驗報告的質量，無漏診真正血液患者,準確地為臨床醫生提供有價值的信息，在臨床的應用中有重要意義。

關鍵詞:Sysmex XE-5000血液分析儀;顯微鏡檢查;復檢規則

血常規檢測是最基本的血液檢驗項目，通過觀察血細胞數量變化及形態分布，判斷疾病類別，檢測的主要內容有白細胞(WBC)，紅細胞(RBC)，血紅蛋白，血小板(PLT)的數量，WBC分類，以及相關的一些參數。近年來隨著科學技術的不斷發展，各種不同原理、不同特點的血液分析儀普遍應用于檢驗科工作中，雖然大大減少了檢驗工作者的勞動強度，但是儀器受很多因素的影響，不能完全準確地反映患者信息。血液分析儀在形態學檢查方面仍只能作為一種過篩手段，當遇到可疑情況時，尤其在病理條件下，應人工進行顯微鏡復查，這已是不爭的事實[1]。根據國際血液學復檢專家組制訂的41條復檢規則結合本院特色，制訂了符合本院血液分析儀的20條復檢規則，并根據復檢規則中儀器的結果與顯微鏡結果進行統計分析，評估所制訂復檢規則的可行性，以確保檢測結果的準確性。

1材料與方法

1.1標本來源隨機收集2014年10月門診及病房共計606份血常規標本，用于建立復檢規則。

1.2儀器與試劑檢測采用Sysmex XE-5000血液分析儀及配套試劑，質控物批號42210810。顯微鏡為日本奧林巴斯顯微鏡。瑞士染液為珠海貝索生物技術有限公司提供的BASO染液試劑。

1.3方法

1.3.1血液分析儀檢測所有檢測標本均按照本室Sysmex XE-5000血液分析儀標準操作規程(SOP)文件中要求的操作程序進行檢測。半年進行儀器的校準，每日3個不同濃度水平的質控，并將原始檢測結果備份存檔。

1.3.2顯微鏡檢查同時對所有標本均制備厚薄適宜的血涂片各兩張，按《全國臨床檢驗操作規程》進行瑞氏染色，沖洗，晾干[2]。由兩位具有中級及以上職稱有形態學檢驗經驗的檢驗技師進行顯微鏡鏡檢分析。顯微鏡復檢涂片依據人民衛生出版社第4版的血液學檢驗：分為計數和性狀復檢，計數WBC和PLT，如計數儀WBC為(4～7)×109/L相當于每高倍視野平均WBC數2～4個；(7～9)×109/L相當于每高倍視野平均WBC數4～6個；(10～12)×109/L相當于每高倍視野平均WBC數6～10個；(13～18)×109/L相當于每高倍視野平均WBC數10～12個。PLT：正常每油鏡視野可見8～15個PLT，計數儀PLT計數為100×109/L。性狀是觀察有無大量PLT凝塊及巨大PLT，同時沒有增多的細胞碎片等，WBC分類及有無幼稚可疑細胞。

1.3.3血液分析儀檢測和顯微鏡鏡檢陽性判斷標準以出現至少1條血細胞復檢規則，同時鏡檢后計數或性狀陽性者視為真陽性；若出現至少1條血細胞復檢規則，但鏡檢后計數或性狀陰性者視為假陽性；若未出現復檢規則中的任何一條，且鏡檢陰性者視為真陰性；若未出現復檢規則中的任何一條但鏡檢陽性者視為假陰性。

1.3.4復檢規則的評估根據國內外通用的評估復檢規則指標[3-5]，評估復檢規則篩選的真陽性率、假陽性率、真陰性率、假陰性率(即漏診率)和復檢率。真陽性率=真陽性標本數/用于規則建立的總標本數×100%；假陽性率=假陽性標本數/用于規則建立的總標本數×100%；真陰性率=真陰性標本數/用于規則建立的總標本數×100%；假陰性率=假陰性標本數/用于規則建立的總標本數×100%；復檢率=根據規則需要鏡檢的標本數/總標本數×100%。

2結果

以儀器報警信息與顯微鏡鏡檢計數與性狀結果相符合為陽性符合標本，以無報警信息及顯微鏡鏡檢陰性為陰性符合標本。606例標本的檢測結果中116例符合規則，復檢率19.14%。見表1。

表1　　復檢率統計表

以儀器報警信息與顯微鏡鏡檢計數與性狀結果相符合為陽性符合標本，以無報警信息及顯微鏡鏡檢陰性為陰性符合標本。真陽性的報警類型分布結果見表2。假陽性的報警類型分布結果見表3。

表2　　真陽性的報警類型分布結果

表3　　假陽性的報警類型分布結果

本規則靈敏度72.41%，特異度86.5%。陽性結果預期值36.21%，陰性結果預期值96.73%，總有效率85.15%。其中假陰性率為2.64%，符合專家組認為5%是保證患者檢測結果安全性最大可接受的假陰性率。無重大血液病的漏診[6]。

3討論

隨著全自動血液分析儀的廣泛使用，帶給醫院檢驗科極大的便利及工作效率，但是再先進的血細胞分析儀都是一種篩查手段，都需要顯微鏡檢查來補充和完善[7]。

在本文評估中真陽性率6.93%低于國外報道(11.2%)，假陽性率12.21%低于國外報道(18.6%)，可能與地區和人群有差異。復檢規則的真陽性報警68例，其中以出現異淋細胞32.4%，WBC減少8.8%，巨大PLT 11.8%，PLT聚集17.6%，PLT減少11.8%報警信息為主，不管是單個報警還是聯合報警，鏡檢在數量和形態方面都為相符結果，這可能與本院為傳染病醫院有關。由于本院以收治傳染病患者為主，且以肝炎患者居多，同時伴有艾滋病、梅毒等各種感染性疾病患者。WBC、紅細胞、PLT參數減少，在慢性肝炎和肝硬化的發生率約37%～77%，在重型肝炎和暴發性肝衰竭患者中約為50%。再者治療過程中使用的干擾素、抗腫瘤等藥物對WBC也有影響，WBC經常顯著降低。報警中顯示的異淋細胞是淋巴細胞在病毒、毒素等抗原的刺激下發生增殖并向漿細胞或幼稚細胞轉化，從而導致多種多樣的形態變化。異淋細胞的出現原因可能是由于本院的傳染性單核細胞增多癥、麻疹、風疹、肝功能異常患者很多。在出現報警中的WBC、中性粒細胞百分比、幼稚粒細胞的患者中，WBC顯著增高，未分類，血紅蛋白、PLT顯著降低，鏡檢中篩查出血液病患者，鏡下可見原始幼稚細胞。

本文中復檢規則評估中的假陽性率占12.2%，主要報警多表現為WBC分類異常，WBC減少，PLT減少，PLT聚集的報警信息。分類異常中異型淋巴細胞多見，可能是所用的抗凝劑乙二胺四乙酸(EDTA)中的高鉀對WBC的刺激，使部分淋巴細胞形態改變，類似異淋細胞[8]。某些肝病患者紅細胞膜具有抵御溶血劑作用，導致紅細胞破壞不完全，直接影響WBC的計數與分類[9]。在單個報警出現幼稚粒細胞時，尤其是婦科患者，可能是妊娠時期胎兒體內存在的物質對母體造成的影響，屬于生理性范疇。PLT數量減少兒科比較多見，大部分為抽血不暢，或操作不規范導致有肉眼見不到的凝塊，影響檢測結果，出現假陽性。而WBC假陽性的報警可能與有核紅細胞、難溶紅細胞有關。假陽性的PLT聚集報警，與儀器檢測原理有關，雖然Sysmex XE-5000在紅細胞/PLT檢測通道采用核酸熒光染色結合流式法兩種方法計數PLT，但不能分辨顆粒內部結構和形態，如小紅細胞、紅細胞和WBC碎片使結果假性增高。大PLT增多，PLT凝集血凝塊形成可假性減低[10]。假陰性與標本性狀有關，由于脂血和黃疸的影響，可使血紅蛋白假性增高。加強與臨床的溝通尤為重要，減少漏檢的發生。

綜上所述，本文中的復檢規則制訂合理、有效。但是隨著樣本量的不斷增加，對工作人員的要求也在不斷增加。要在規定的時間內報告出準確的結果，必須結合報警信息、散點圖、直方圖及顯微鏡鏡檢綜合判斷，給臨床醫生提供更準確的報告。

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·論著·

Establishment and evaluation of Sysmex XE-5000 hematology analyzer review criteria

ZhangShufeng,HeYanqun,JiaoBinxin,HuaWenhao△

(DepartmentofClinicalLaboratory,AffiliatedBeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100015,China)

Abstract:ObjectiveTo establish and evaluate the review criteria of blood routine detection by the Sysmex XE-5000 hematology analyzer in our hospital for improving the effectiveness of the measurement results.Methods606 blood samples were collected from the outpatients and inpatients during 2014 and performed the microscopic examination by 2 technologists-in-charge with the double-blind method.The average value of these results was used as the judging criteria.According to the 41 items of rule formulated by the international expert group and combining with the patients characteristics of infectious disease hospital and instrument features in this hospital,20 items of review criteria for blood routine test of our hospital was formulated.ResultsWith the microscopic examination results as the criteria,among 606 detected samples,116 samples were in line with the rules and the review rate was 19.14(116/606),in which the true positive rate was 6.93% (42/606),the false positive rate was 12.21% (74/606),the false negative rate was 2.64% (16/606),the true negative rate was 78.22% (474/606),the sensitivity was 72.41% and the specificity was 86.5%.The expected values of positive and negative results were 36.21% and 96.73% respectively.The total effective rate was 85.15%.ConclusionThe review criteria formulated by this laboratory are reasonable and effective,which has an important significance in the clinical application for increasing the detection speed of blood routine,improving the laboratory reports quality,without missed true blood patients and accurately providing the valuable information for clinicians.

Key words:Sysmex XE-5000 hematology analyzer;microscopic examination;review criteria

通訊作者：

作者簡介：張彥平，男，在職碩士研究生，主要從事臨床檢驗基礎研究。△E-mail:zhangwanggang2003@yahoo.com。

收稿日期：(2015-07-22)

文獻標識碼：

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2015.24.027A

文章編號：1673-4130(2015)24-3572-02