趨化因子配體2、5在前列腺癌組織中的表達

劉頁玲　尹春華(江西護理職業技術學院，江西　南昌　330052)

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趨化因子配體2、5在前列腺癌組織中的表達

劉頁玲尹春華1(江西護理職業技術學院，江西南昌330052)

〔摘要〕目的探討趨化因子配體( CXCL) 2、5在前列腺癌( PC)組織中的表達。方法156例PC患者根據其所患病癥類型分為三組，PC組82例，前列腺上皮內瘤( PIN)組32例，良性前列腺增生( BPH)組42例，Western印跡檢測各組CXCL2和CXCL5的表達情況。結果PC組、PIN組的CXCL2和CXCL5的陽性表達率高于BPH組( P＜0．05)。PC組的CXCL2和CXCL5的陽性表達率高于PIN組( P＜0．05)。Western印跡結果表明: CXCL2和CXCL5在PC組相對表達量，PC組＞PIN組＞BPH組( P＜0．05)。結論CXCL2和CXCL5在PC中高表達。

〔關鍵詞〕趨化因子配體5;前列腺癌

1南昌大學第一附屬醫院婦產科

第一作者:劉頁玲( 1977－)，女，碩士，副教授，主要從事神經解剖學研究。

前列腺癌( PC)是男性常見的泌尿系統惡性腫瘤〔1〕。文獻認為〔2〕，腫瘤的侵襲和轉移過程是由趨化因子及其家族成員嚴密調控的。部分趨化因子具有促血管生成的作用，如趨化因子配體( CXCL1、2、5、8)等。本文擬觀察CXCL2和CXCL5在PC組織的表達。

1材料與方法

1. 1一般資料收集2005年1月至2014年1月在南昌大學第一附屬醫院就診的患者標本，年齡52～81〔平均( 68．2± 8．1)〕歲。根據其病癥類型分為PC組82例;前列腺上皮內瘤( PIN)組32例;良性前列腺增生( BPH組) 42例。

1. 2試劑山羊CXCL2多克隆抗體、小鼠抗人CXCL5單克隆抗體、小鼠抗人β－actin單克隆抗體均購自Abnova公司。Western印跡發光試劑購自普利萊公司。SP染色試劑盒、DAB顯色劑、抗體稀釋液均購自北京中山生物技術有限公司。

1. 3方法嚴格按照二步快捷免疫組化法試劑盒使用說明書進行操作，行CXCL2和CXCL5免疫組化染色，二氨基聯苯胺( DAB)顯色。以磷酸鹽緩沖液( PAB)代替一抗行陰性染色，用已知陽性切片做陽性對照。根據染色的深度及陽性細胞的數量分別計分〔3〕。無著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。陽性細胞數＜5%為0分，5%～25%為1分，26% ～50%為2分，51%～75%為3分，＞75%為4分。兩項結果相加，＜2分為陰性，≥2分為陽性。

1. 4 Western印跡按每孔30 μg上樣，10%聚丙烯酰胺凝膠( SDS－PAGE) 120 V電壓下分離，再用30 V電壓將凝膠上的蛋白濕轉至硝酸纖維素膜( NC膜)上。5%脫脂奶粉將膜封閉2 h后，加人一抗(抗體稀釋度參見說明書)，4℃孵育過夜。Tris鹽酸緩沖液( TBST)充分漂洗后加人辣根過氧化物酶標記的二抗(抗體稀釋度參見說明書)孵育1 h。最后用Western印跡發光試劑顯色，暗室曝光顯像于膠片上。

1. 5統計學方法應用SPSS13．0軟件進行χ2檢驗。

2結果

2. 1 CXCL2和CXCL5的表達情況PC組、PIN組CXCL2〔53 例( 64．6%)、8例( 25．0%)〕和CXCL5〔49例( 59．8%)、11例( 34．4%)〕的陽性表達率高于BPH組〔均為2例( 4．8%)〕( P＜0．05)。PC組的CXCL2和CXCL5的陽性表達率都高于PIN組( P＜0．05)。

2. 2 CXCL2和CXCL5的蛋白表達Western印跡結果表明，CXCL2和CXCL5相對表達量PC組＞PIN組＞BPH組( P＜0．05)。見圖1。〔4〕

3討論

趨化因子能使相關細胞發生趨化運動。這類小分子通過與受體結合而引起多種生理反應〔5〕，如在細胞的生長、分化及凋亡中發揮作用，還可使淋巴細胞向炎癥部位聚集，啟動炎癥反應〔6〕，除此之外還具有促進病毒感染和腫瘤的生長及轉移等功能。CXCL5也稱上皮中性粒細胞活化肽( ENA)－78，屬于CXC趨化因子家族的成員之一〔7〕，可與其受體CXCR2發生特異性結合，引起促血管生成的生物學效應，進而促進腫瘤生長、發展及轉移。CXCL2也屬于趨化因子家族的成員之一，也稱巨噬細胞炎性蛋白( MIP)－2。CXCL2結構上與CXCL1、5、8具有同源性〔8〕。本研究表明CXCL5與PC的生成有密切的關系。腫瘤的分化程度越低、惡性程度越高、病變程度越強，CXCL5的表達越高，表明CXCL5可能與PC的發展、浸潤及轉移有關，其可能機制為: CXCL5與其受體CXCR2特異性結合后，激活了酪氨酸激酶受體，生成新生血管，為PC的生長及發展提供養分及轉移通道〔9〕。筆者推測，腫瘤細胞表面的CXCR2能夠增強腫瘤的增殖及侵染能力，破壞內皮的屏蔽功能，促進腫瘤細胞骨架的重建，這有待進一步深入研究。

4參考文獻

1 Davis EJ，Beebe－Dimmer JL，Yee CL，et al．Risk of second primary tumors in men diagnosed with prostate cancer: a population－based cohort study〔J〕．Cancer，2014; 120( 17) : 2735－41．

2 Kogan－Sakin I，Cohen M，Paland N，et al．Prostate stromal cells produce CXCL－1，CXCL－2，CXCL－3 and IL－8 in response to epithelia－secreted IL－1〔J〕．Carcinogenesis，2009; 30( 4) : 698－705．

3袁振，蔣雷鳴，王松．趨化因子受體7和血管內皮生長因子C在前列腺癌中的表達〔J〕．中國老年學雜志，2013; 33( 19) : 4695－7．

4 Torisawa YS，Mosadegh B，Bersano－Begey T，et al．Microfluidic platform for chemotaxis in gradients formed by CXCL12 source－sink cells〔J〕．Integr Biol，2010; 2( 11－12) : 680－6．

5 van der Meulen AA，Biber K，Lukovac S，et al．The role of CXC chemokine ligand( CXCL) 12－CXC chemokine receptor( CXCR) 4 signalling in the migration of neural stem cells towards a brain tumour〔J〕．Neuropathol Appl Neurobiol，2009; 35( 6) : 579－91．

6 Wong YF，Cheung TH，Lo KW，et al．Identification of molecular markers and signaling pathway in endometrial cancer in Hong Kong Chinese women by genome－wide gene expression profiling〔J〕．Oncogene，2007; 26 ( 13) : 1971－82．

7 Okabe H，Beppu T，Ueda M，et al．Identification of CXCL5/ENA－78 as a factor involved in the interaction between cholangiocarcinoma cells and cancer－associated fibroblasts〔J〕．Int J Cancer，2012; 131( 10) : 2234－41．

8 Park JY，Park KH，Bang S，et al．CXCL5 overexpression is associated with late stage gastric cancer〔J〕．J Cancer Res Clin Oncol，2007; 133 ( 11) : 835－40．

9 Reiland J，Furcht LT，McCarthy JB．CXC－chemokines stimulate invasion and chemotaxis in prostate carcinoma cells through the CXCR2 receptor 〔J〕．Prostate，1999; 41( 2) : 78－88．

〔2015－03－16修回〕

(編輯袁左鳴/滕欣航)

通訊作者:尹春華( 1976－)，男，碩士，副主任醫師，主要從事婦科腫瘤學研究。

基金項目:江西省衛生廳科技計劃( No．20142008)

〔中圖分類號〕R737. 25

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202( 2016) 02-0295-02;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2016. 02. 018