番鴨曲霉菌病的病理學(xué)診斷

齊新永 ， 趙興緒 ， 劉佩紅

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) ， 甘肅蘭州730070 ； 2.上海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 ， 上海長(zhǎng)寧201103)

番鴨曲霉菌病的病理學(xué)診斷

齊新永1，2， 趙興緒1， 劉佩紅2

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) ， 甘肅蘭州730070 ； 2.上海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 ， 上海長(zhǎng)寧201103)

曲霉菌病是真菌中的曲霉菌引起多種禽類、哺乳動(dòng)物和人的真菌病，主要侵害呼吸器官，以呼吸器官發(fā)生干酪樣、壞死性炎癥、形成肉芽腫結(jié)節(jié)或霉菌斑為特征。禽曲霉菌病主要發(fā)生于雞、鴨、鵝、火雞、鵪鶉、鴿和其他多種鳥(niǎo)類，但以幼禽多發(fā)，成年禽多為散發(fā)。幼禽最易感染，常呈急性暴發(fā)性流行，發(fā)病率和死亡率都很高，可造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。2015年6月份，上海郊區(qū)某番鴨養(yǎng)殖戶發(fā)生疑似禽曲霉菌病，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查 上海郊區(qū)某番鴨養(yǎng)殖戶從本地某孵房購(gòu)入番鴨1 200只，飼養(yǎng)至7日齡時(shí)開(kāi)始發(fā)病。發(fā)病鴨縮頸，站立不穩(wěn)，食欲減退或廢絕，少數(shù)拉稀，死亡很快，3 d死亡200多只，取病死鴨5只，送本中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步化驗(yàn)。

1.2 病鴨剖檢取樣 將5只病鴨處死后，逐只剖檢，詳細(xì)記錄剖檢病變，無(wú)菌取腦、心、肝、肺、脾，用于細(xì)菌分離。另取內(nèi)臟1套，用10%中性福爾馬林溶液固定。

1.3 細(xì)菌分離培養(yǎng) 將腦、心、肝、脾、肺接種哥倫比亞血瓊脂平板，二氧化碳培養(yǎng)箱37 ℃培養(yǎng)24 h，觀察有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。

1.4 壓片鏡檢 無(wú)菌采取病死鴨大腦、胸氣囊結(jié)節(jié)和肺部病變，置于載玻片上，滴加少量的10%氫氧化鉀溶液浸泡并加蓋玻片，在酒精燈上略加熱，然后輕輕壓蓋玻片，使之透明鏡檢。

1.5 病理組織學(xué)檢查 對(duì)固定好的肺、腦、肝、脾、腎等組織采取常規(guī)石蠟切片技術(shù)進(jìn)行切片，厚度4 μm，蘇木素-伊紅染色，顯微鏡檢查。

2 結(jié)果

2.1 病死鴨剖檢 病死鴨剖檢主要表現(xiàn)為肺臟有淡黃色米粒大小的結(jié)節(jié)(見(jiàn)中插彩版圖1)，散在分布于肺臟表面或整個(gè)肺臟組織，切開(kāi)內(nèi)容物呈干酪樣。有時(shí)氣囊混濁、變厚，氣囊上也有類似于肺臟的結(jié)節(jié)。大腦呈現(xiàn)黃色干酪樣壞死(見(jiàn)中插彩版圖2)。腎稍腫。肝臟呈暗紅色，膽囊腫大充滿膽汁。

脾臟有壞死點(diǎn)。腸道壁變薄有黃綠色稀便，泄殖腔內(nèi)有黃綠色稀糞。

2.2 細(xì)菌分離 心、肝、脾、肺、腦細(xì)菌培養(yǎng)均為陰性。

2.3 壓片鏡檢 大腦壞死組織壓片鏡檢，可見(jiàn)大量分枝狀間隔菌絲和分生孢子(見(jiàn)中插彩版圖3)。肺臟結(jié)節(jié)壓片鏡檢可見(jiàn)到分生孢子梗和孢子，頂囊上分生孢子呈輻射狀排列(見(jiàn)中插彩版圖4)。

2.4 病理組織學(xué)檢查 肺組織主要以出血、肉芽腫病變和干酪樣壞死為特征(見(jiàn)中插彩版圖5)，其中壞死結(jié)節(jié)周圍有巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞聚集，由增生的上皮樣細(xì)胞、纖維結(jié)締組織包圍形成肉芽腫。在肉芽腫中心區(qū)域，可以看到干酪樣壞死和菌絲體。

腦充血、出血，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，神經(jīng)元變性、壞死，呈現(xiàn)空泡化，腦組織有大量分枝的菌絲體(見(jiàn)中插彩版圖6)。

3 討論

該病例通過(guò)臨床剖檢、組織壓片鏡檢以及病理組織學(xué)觀察確診為禽曲霉菌感染。禽曲霉菌病是養(yǎng)禽場(chǎng)常見(jiàn)的疾病之一，病原主要為煙曲霉菌和黃曲霉菌，動(dòng)物發(fā)病多是因吸入大量的曲霉菌孢子所致。陰暗潮濕和發(fā)霉的育雛設(shè)施，常使雛雞吸入大量的孢子而發(fā)病。發(fā)霉的飼料和飼槽也可引起感染。但雛禽感染此病常常來(lái)自于孵房，孵房的污染源可以存在于任何地方，包括孵化箱、出雛箱、大廳和進(jìn)氣管道。感染此病的雛禽潛伏期一般為5～7 d，該養(yǎng)殖場(chǎng)在購(gòu)入雛鴨后1周內(nèi)發(fā)生禽曲霉菌病可能來(lái)自于孵房感染，雛鴨在孵房?jī)?nèi)吸入大量曲霉菌孢子后在飼養(yǎng)1周時(shí)出現(xiàn)癥狀。在隨后的走訪我們發(fā)現(xiàn)，從該孵房購(gòu)買的其他一些養(yǎng)鴨戶的雛鴨也出現(xiàn)了同樣的情況，可以肯定此病的傳染源來(lái)自孵房。

雛禽感染禽曲霉菌常呈現(xiàn)曲霉菌性肺炎、眼炎和腦炎等病理變化[1]，肺臟是曲霉菌的主要靶器官，曲霉菌性肺炎最為常見(jiàn)[2-3]，由曲霉菌引起的眼炎和腦炎的病例報(bào)道較為少見(jiàn)。在該病例中，曲霉菌性肺炎和腦炎病變同時(shí)存在，其中腦組織壓片鏡檢觀察到大量菌絲體，是腦部感染的重要依據(jù)。禽曲霉菌病主要經(jīng)呼吸道和消化道感染，而腦部感染通常是由于肺臟原發(fā)性病灶內(nèi)的曲霉菌通過(guò)血流擴(kuò)散而引起的[4-8]，除了菌絲以外，大腦病變主要以壞死和嗜異細(xì)胞及單核細(xì)胞浸潤(rùn)為特征。

在禽曲霉菌防治方面，必須對(duì)孵房進(jìn)行徹底清洗消毒，特別是孵化箱內(nèi)的碎裂蛋應(yīng)及時(shí)清除，孵房應(yīng)經(jīng)常清洗通風(fēng)管道，室內(nèi)應(yīng)合理通風(fēng)換氣。孵化箱及出雛箱清洗后再進(jìn)行一次甲醛氣體熏蒸消毒，徹底殺滅真菌及其孢子。治療時(shí)可以用制霉菌素，每百只雛雞每天用50萬(wàn)單位拌料，連用 3～5 d。

[1] 李國(guó)勤.禽曲霉菌病病理變化研究進(jìn)展[J].畜牧獸醫(yī)雜志，2001，20(2)：16-18.

[2] 李麗，于洋，孫培明.肉鴨煙曲霉菌病的診斷及分析[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2015,2:90-91.

[3] 安明范，李元果，宋啟明,等.禽曲霉菌性肺炎[J].吉林畜牧獸醫(yī)，2010，31(3):43-46.

[4] Fragner P，Vitovec J，viadik P.Enzooric or disseminated visceral aspergillosis in turkey Chicks[J].Ceska Mycol，1975，29:115-118

[5] Sah R L，Mohant y G.C.A note on mycotic meningoencephalitis in duckling caused by As pergillus species[J].Indian J.Animal Sci，1974，44:211-213.

[6] Richard J L，Thurston J R，Cutlip R C,etal.Vaccination studies of aspergillosis in turkeys:subcutaneousinoculation with several vaccine preparations followed by aerosol Challenge exposure[J].Am J V et Res,1982，43:488-492.

[7] Dyar P M，F(xiàn)letcher O J，Page R K.Aspergillosis in turkeys associated with use of contaminated litter[J].Avian dis，1984，28:250-255.

[8] Jensen H E，Christensen J P，Bisgeard M,etal.Immunohis-tochemis try for the diagnosis of aspergill osis in turkey poults[J].Avian pathol，1997，26:5-18.

2015-12-24

滬農(nóng)科基字(2014)第7-3-3號(hào):上海地區(qū)主要?jiǎng)游锊≡⑸锓N質(zhì)資源保存利用

齊新永(1966-)，男，高級(jí)獸醫(yī)師，博士生.主要從事預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究，E-mail:gxysjsh@163.com

趙興緒，E-mail:Zhaoxx@gsau.edu.cn

S858.32

B

0529-6005(2016)12-0044-02