老年人群淚液白細胞介素-6與糖尿病及其視網膜病變的相關性

張　潔　王偉超　王　虹　劉素波　李雅婷

(石家莊市第三醫院眼科，河北　石家莊　050011)

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老年人群淚液白細胞介素-6與糖尿病及其視網膜病變的相關性

張潔王偉超1王虹2劉素波1李雅婷3

(石家莊市第三醫院眼科，河北石家莊050011)

目的探討糖尿病(DM)及糖尿病視網膜病變(DR)與老年患者淚液、血清白細胞介素(IL)-6濃度的關系。方法納入人群分為三組：A組為2型糖尿病無視網膜病變老年患者組，B組為2型糖尿病有視網膜病變老年患者組，C組為正常對照老年人組。用ELISA法分別檢測三組人群淚液、血清中IL-6的含量。結果A、B組淚液IL-6含量均較C組高，B組淚液IL-6含量較A組高(P<0.01)；淚液IL-6與血清IL-6水平呈正相關(r=0.655，P<0.05)。結論老年DM患者淚液IL-6含量較正常老年人增高，老年DR患者淚液IL-6水平進一步升高，且淚液IL-6與血清IL-6水平呈直線正相關。

糖尿病；淚液；血清；白細胞介素-6

糖尿病性視網膜病變(DR)作為糖尿病(DM)眼部并發癥之一，對患者的生存質量構成了巨大的威脅，嚴重影響了患者的日常生活。研究認為2型糖尿病(T2DM)發病與自身免疫反應有關系，免疫反應激活免疫細胞產生的細胞因子在抑制胰島β細胞分泌胰島素及促進胰島β細胞損傷方面起著重要作用〔1〕。近年來的炎癥學說受到廣泛關注，認為T2DM可能是一種免疫性疾病，是細胞因子介導的一種炎癥反應，在DM的發病機制中炎癥起了媒介作用〔2〕，該學說認為DM及其血管并發癥的發生和發展有多種炎癥因子的參與〔2，3〕。其中T2DM發生、發展過程中介導炎癥反應的一種重要細胞因子是白細胞介素(IL)-6〔4〕。本研究探討DM及DR的發生與老年患者血清及淚液IL-6濃度的關系。

1　資料與方法

1.1一般資料收集老年T2DM患者100例、正常對照老年人50例，將此納入人群分為3組：T2DM無DR組(A組)50例，男25例，女25例，平均年齡65.4歲；DR組(B組)50例，男26例，女24例，平均年齡64.2歲；正常對照組(C組)50例，男25例，女25例，平均年齡63.1歲。以上3組人群的年齡、性別均無明顯差別，具有可比性。T2DM患者按1999年WHO的診斷標準進行確診，患者起病年齡均>30歲，經眼底血管熒光造影檢查排除或診斷為DR，患者口服降糖藥物有效果，除外降糖藥物繼發性失效，糖尿病自身免疫相關抗體檢測陰性，非酮癥狀態，排除嚴重心、肺、腦疾患，排除外嚴重肝、腎疾病以及明確應激狀態。

1.2標本收集所有受試者禁食、停藥8～10 h，然后分別同時采集3組人群的血液和淚液。標本收集成功，淚液標本置于法國Jouan超低溫冰箱-20℃保存備用；血液標本離心分離血清，與淚液標本同條件超低溫保存以備集中檢測。標本采集注意事項：以毛細玻璃管法收集淚液，由經培訓合格的研究人員依據標準操作流程完成，檢查者動作需輕柔。

1.3檢測方法采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗法(ELISA)檢測。遵照美國TBE公司的人IL-6 ELISA試劑盒(靈敏度>0.7 pg/ml)說明進行操作。OD450值采用法國Jouan公司的酶標儀進行測定。標準曲線繪制，橫坐標為標準品濃度，縱坐標為OD值。最后通過標本的OD值在標準曲線上查出其濃度。

1.4統計學方法采用SPSS17.0統計軟件進行單因素方差分析和相關分析。

2　結　果

2.1各組人群淚液IL-6的含量A組(12.23±7.28)pg/ml，B組(20.14±11.14)pg/ml，C組(4.56±2.82)pg/ml。三組間存在顯著差異(F=49.23，P<0.05)，A組、B組淚液IL-6含量均高于C組，B組淚液IL-6含量高于A組(q=4.89、9.92、-5.04，P均<0.01)。

2.2各組人群血清IL-6的含量A組(126.19±47.90)pg/ml，B組(256.36±94.45)pg/ml，C組(96.94±52.41)pg/ml。各組間差異顯著(F=77.38，P<0.05)，A、B組血清IL-6含量均較C組高，B組血清IL-6含量較A組高(q=2.14、11.68、-9.54，P均<0.01)。

2.3淚液IL-6與血清IL-6濃度的相關分析淚液IL-6濃度分布與血清IL-6濃度分布呈現直線正相關關系(r=0.655 0，P<0.05，95%CI為0.130 0～0.893 2)。

3　討　論

炎癥因子可認為是啟動環節，由其引起的血管內皮炎癥反應在DM慢性并發癥發生發展中起到重要的作用。IL-6是重要的炎癥因子之一，其在T2DM血管病變發生發展過程中的作用不容忽視。

B細胞、T細胞、單核細胞等是產生IL-6的主體，IL-6在損傷修復及免疫、炎癥反應中起到了關鍵性調節作用〔5〕。IL-6的主要生物學作用是促進B細胞增殖分化和分泌抗體；在IL-2 、IL-6共同作用下，T細胞分化為細胞毒性T淋巴細胞；促使肝臟合成急性期蛋白；并對神經系統、血液系統等產生廣泛效應。IL-6為一種內源性致熱原，可參與炎性反應；另外，IL-6作為急性反應的始發因子，可參與很多疾病的發病過程，并起到重要的作用〔6，7〕。Sheng等〔7〕研究發現，IL-6與胰島素相互作用，從而可以影響T2DM的發生。胰島素抵抗在T2DM發病中起重要作用，并貫穿于T2DM全過程，IL-6也是一種可以引起胰島素抵抗的重要細胞因子〔8〕。Yuuki等〔9〕關于DR的研究發現：DR患者組的眼玻璃體中IL-6濃度明顯高于對照組，由此證實IL-6與DR的發生和發展有著密切的聯系。Claudio等〔10〕報道增殖性DR患者其玻璃體內IL-6濃度顯著增高，并且增高的水平與眼底視網膜病變的嚴重程度呈正相關。Funatsn等〔11〕通過檢測DM患者房水、玻璃體和血漿中的IL-6濃度，并研究了其相互的關系，結果表明隨著DM病程的延長，眼底視網膜病變的加重，患者房水、玻璃體和血漿中的IL-6濃度也隨之增高，由此提示IL-6與DM的發生、發展有著密切的聯系。Canataroglu等〔12〕的研究結果：增殖性DR患者的玻璃體IL-6和IL-8的含量均有顯著升高，表明IL-6與增殖性DR的發生和發展有密切的聯系。

本研究以老年人為研究對象，檢測了健康老年人及T2DM老年患者淚液及血清的IL-6濃度，在國內外尚屬首創。淚液的收集檢查過程是無創的，易于被老年患者接受。本研究結果表明，對于老年人群而言，老年患者T2DM及DR的發生與其淚液IL-6的水平有關系，血清IL-6與淚液IL-6水平正相關，因此對老年人群淚液IL-6濃度進行測定，有望成為老年DM患者病情監測及評估的可能方法。

1Senn JJ，Klover PJ，Nowak IA，etal.Interleukin induce cellular insulin resistance in hepatocytes〔J〕.Diabetes，2002；51：3391-9.

2Barzilay JI，Abrahaxn L，Heckbert SR，etal.The relation of markers of inflammation to the development of glucose disorders in the elderly：the cardiovascular health study〔J〕.Diabetes，2001；50：2384-9.

3Esposito K，Nappo F，Marfella R，etal.Inflammation cytokine concentrations are acutely increased by hyperglycemia in human：role of oxidative stress〔J〕.Circulation，2002；106(16)：2067-72.

4Manning PJ，Sutherland WH，Walker RJ，etal.The effect of glucose ingestion on inflammation and oxidative stress in obese individuals〔J〕.Metabolism，2008；57(10)：1345-9.

5Yah Z，Zhao N，Wang Z，etal.A mutated human tumor necrosis factor-alpha improves the therapeutic index in vitro and in vivo〔J〕.Cytotherapy，2006；8(4)：415-23.

6Wolf AM，Wolf D，Rnmpiod H，etal.The kinase inhibitor imatinib mesylate inhibits TNF-alpha production in vitro and prevents TNF dependent acute hepatic inflammation〔J〕.Proc Natl Acad Sci U S A，2005；102(38)：13622-7.

7Sheng WH，Chiang BL，Chang SC，etal.Clinical manifeststions and inflammatory cytokine responses in patients with severe acute respiratory syndrome〔J〕.J Formos Med Assoc，2005；104(10)：715-23.

8Rodriguez-Rodriguez E，Perea JM，Lopez-Sobaler AM，etal.Obesity，insulin resistance and increase in adipokines levels：importance of the diet and physical activity〔J〕.Nutr Hosp，2009；24(4)：415-21.

9Yuuki T，Kanda T，Kimura Y，etal.Inflammatory cytokines in vitreous fluid and plasma of patients with diabetic vitreoretinopathy〔J〕.J Diabetes Complic，2001；15(5)：257-9.

10Claudio L，Martiney JA，Brosnan CF.Ultrastructural studies of the blood-retina barrier after exposure to interleukin-1 beta or tumor necrosis factor-alpha〔J〕.Lab Invest，1994；70(6)：850-86.

11Funatsn H，Yamaschita H，Noma H，etal.Aqueous humour levels of cytokines are related to vitreous levels and progression of diabetic retinopathy in diabetic patient〔J〕.Opthalmology，2005；243(1)：3-8.

12Canataroglu H，Varinli I，Ozcan AA，etal.Interleukin (IL)-6，interleukin (IL)-8 levels and cellular composition of the vitreoushumor in proliferative diabetic retinopathy，proliferative vitreoretinopathy and traumatic proliferative vitreoretinopathy〔J〕.Ocul Immunol Inflamm，2005；13(5)：375.

〔2015-02-03修回〕

(編輯苑云杰/曹夢園)

石家莊市科技支撐計劃項目(No.111461293)

張潔(1979-)，女，碩士，副主任醫師，主要從事眼表及眼底疾病的研究。

R771.3

A

1005-9202(2016)18-4472-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.18.033

1石家莊市第一醫院內分泌科2石家莊市第一醫院干部老年病科

3石家莊市第七醫院健康檢查科